本标准规定了水果罐头中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红人工合成着色剂的高效液相色谱测定方法。本标准适用于水果罐头中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红人工合成着色剂的测定。 GB/T 21916-2008 水果罐头中合成着色剂的测定 高效液相色谱法 GB/T21916-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS67.080
中华人民共和国国家标准
GB/T21916—2008
水果罐头中合成着色剂的测定
高效液相色谱法
Determination of synthetic colour in fruit tins-High performance liquid chromatography2008-05-16发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2008-11-01实施
中华人民共和国
国家标准
水果罐头中合成着色剂的测定
高效液相色谱法
GB/T21916—2008
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2008年8月第一版
2008年8月第一次印刷
书号：155066·1-32379
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本标准的附录A为资料性附录。
本标准由全国食品安全应急标准化工作组提出并归口。GB/T21916—2008
本标准起草单位：沈阳产品质量监督检验院（国家加工食品及添加剂质量监督检验中心）。本标准主要起草人：于立强、王冬妍、苏锡辉、赵丽秀、吕成学、张风清、赵检、张丽君、黄士军、明立艳、杨晓丽。
1范围
水果罐头中合成着色剂的测定
高效液相色谱法
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GB/T21916-2008
本标准规定了水果罐头中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱感红、亮蓝、赤藓红人工合成着色剂的高效液相色谱测定方法。本标准适用于水果罐头中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红人工合成着色剂的测定。
本标准检出限为柠檬黄0.300mg/kg、苋菜红0.300mg/kg、靛蓝0.300mg/kg、胭脂红0.300mg/kg、日落黄0.150mg/kg、诱感红0.150mg/kg、亮蓝0.100mg/kg、赤藓红0.150mg/kg。2原理
水果罐头中的人工合成着色剂用乙醇-氨水提取，利用固相萃取柱净化，采用高效液相色谱-二极管阵列检测器测定，外标法定量。3试剂和材料
3.1水：去离子水或相当纯度的水。3.2甲醇：色谱纯。
3.3无水乙醇：分析纯。
3.4氨水：分析纯。
3.5盐酸：分析纯。
3.6乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取1.54g乙酸铵，加水溶解，定容至1000mL，经0.45μm过滤器过滤。
3.7无水乙醇-氨水溶液：量取无水乙醇80mL，氨水1mL，加水定容至100mL，混勺。3.8pH8的50%甲醇溶液：量取甲醇50mL，加水定容至100mL，混匀，加氨水调pH值到8。3.9pH8的水：水加氨水调pH值到8。3.102
2%氨水：量取氮水2mL，加水定容至100mL，混匀。3.11盐酸-乙醇溶液（1+9）：量取10mL盐酸、90mL乙醇，混匀。3.1250%甲醇溶液：量取甲醇50mL，加水定容至100mL，混匀。3.13固相萃取柱或相当者：Sep-PakPlusQMA360mg，颗粒度37μm~55um，临用前依次加5mL甲醇(3.2)和5mL水预处理，保持柱体湿润。3.14合成着色剂标准储备液：准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱感红、亮蓝、赤藓红各0.0500g，置100mL容量瓶中，加水至刻度，配制成500μg/mL标准储备液。
3.15合成着色剂标准使用液：临用时将标准储备液加水稀释成20μg/mL的标准中间液，再将该中间液稀释成0.100，0.200，0.400,1.00，3.00，5.00μg/mL的标准系列溶液，经0.45μm过滤器过滤。4仪器
4.1高效液相色谱仪，配有二极管阵列检测器。1
GB/T21916—2008
分析天平：感量0.1mg。
4.3匀浆机。
快速混匀器。
4.5离心机：3000r/min。
4.6恒温水浴。
4.70.45um水性样品过滤器。
固相萃取装置。
5样品制备
将整份试样用匀浆机打碎，再搅拌均匀，准确称取2.00g左右样品（精确至0.01g），装人离心管中。加10mL无水乙醇-氮水溶液，涡旋0.5min，再3000/min离心10min，将上清液倒人塞有脱脂棉的玻璃漏斗中过滤，将剩余残渣再重复操作三次，将收集的滤液（约40mL）置于80℃水浴中浓缩至约2mL，为试样溶液。
5.2净化
将浓缩后的试样溶液用2%的氨水调成pH8后，转移到预处理过的固相萃取柱中，依次用3mLpH8的水和3mLpH8的50%甲醇以小于2mL/min的流速清洗，弃去全部流出液。再用10mL盐酸乙醇溶液（1十9）将着色剂洗脱出固相萃取柱，收集洗脱液，用氨水中和，80℃水浴浓缩至尽干，冷却后用50%的甲醇溶液溶解并定容至10mL，经0.45μm滤膜过滤后，进行高效液相色谱测定。6测定
6.1液相色谱条件
色谱柱：DiamonsilCia，5μm，4.6mmX250mm。6.1.1
6.1.2流动相：甲醇-乙酸铵溶液(o.02mol/L)。6.1.3梯度洗脱：梯度洗脱条件见表1。表1
液相色谱梯度洗脱条件
时间/min
6.1.4进样量：10μL。
流速/(mL/min）
甲醇/%
乙酸铵溶液/%
6.1.5检测器：二极管阵列检测器选择柠檬黄428nm、宽菜红521nm、靛蓝608nm、胭脂红509nm、日落黄483nm、诱感红507nm、亮蓝625nm、赤藓红529nm波长测定。6.2测定
根据保留时间定性，外标峰面积法定量。八种合成着色剂标准品的液相色谱图参见附录A。7结果计算
结果按式(1)计算：
式中：
X-cxVX1000
mx1000
X-—试样中被测组分的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；TiKAONIKAca-
GB/T21916—2008
一由标准曲线得到的试样溶液中被测组分的含量，单位为微克每毫升（μg/mL）；试样溶液定容体积，单位为毫升(mL)；V
试样质量，单位为克(g)。
计算结果保留三位有效数字。
8精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%GB/T21916—2008
70000元
65 000
55000号
50·000弄
40 000
30000元bZxz.net
15000弄
-5 000
一柠檬黄；
-宽菜红；
靛蓝；
胭脂红，
日落黄；
诱感红；
充蓝；
赤藓红。
GB/T21916-2008
附录A
（资料性附录）
八种合成着色剂标准品的液相色谱图7
图A.1八种合成差色剂标准品的液相色谱图20
版权专有侵权必究
书号：1550661-32379
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