本标准代替GB/T 5522-1985 《粮食、油料检验 过氧化氢酶活动度测定法》。本标准规定了粮食、油料中过氧化氢酶活动度测定的术语和定义、原理、试剂和材料、仪器与用具、试样制备、操作步骤、结果计算及重复性。本标准适用于粮食、油料中过氧化氢酶活动度的测定。本标准与GB/T 5522-1985 相比主要变化如下：———增加了术语和定义；———修改了高锰酸钾标准溶液的浓度和过氧化氢溶液的浓度；———统一了反应温度和时间；———增加了检测结果的重复性要求。 GB/T 5522-2008 粮油检验 粮食、油料的过氧化氢酶活动度的测定 GB/T5522-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS 67.040
中华人民共和国国家标准
GB/T5522—2008
代替GB/r5522—1985
粮油检验
粮食、油料的过氧化氢酶活动度的测定Inspection of grains and oils-Determination of hydrogen peroxidase activity of grain and oilseeds2008-11-04发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局满
中国国家标准化管理委员会
2009-01-20实施
本标准代替GB/T55221585《粮食、油料检验险过氧化氢酶活动度测定法》。本称摊与GB/T5522--1985相比主要变化如下：一增加了术语和定义；
修改了高锰酸钾标准溶液的浓度和过氧化氢溶液的浓度；·统一了反应温度和时间；
增加了检测结果的重复性要求。本标准由国家粮食局提出。
本标准由金国粮油标准化技术委员会归口。GB/T 5522—2008
本标准起草单位：安徽省粮油产品质量监督检测站、河南工业大学、国家粮食局成都粮食储藏科学研究所、天津市粮油检测站。
本标准主要起草人：季-顺、周红梅、张浩、李弯琴、程建华、赵淑媛、汪桃花、吴云、王静。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T5522—1985
1范围
粮油检验
粮食、油料的过氧化氢酶活动度的测定GB/T5522—2008
本标雄规定了粮食、油料中过氧化氢酶活动度测定的术讲和定义、原理、试剂和材料、仪器与用具、试样制备、操作步骤、结果计算及重复性。本标准适用于粮食、油料中过氧化氢酶活动度的测定。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备GB5491粮食、油料检验打样、分样法GB/T5197粮食、油料检验水分测定法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（G3/T6682—2008，ISO3696：1987：MOD）3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。3.1
过化氢酶活动度hydrogcnperoxidaseactivity；HPA规定条件下，一定量试样中的过氧化氢酶与过氧化氧作用所消耗的过氧化氧量，用每克试样（T基）所消耗的过氧化氢毫克数表示。4原理
在pH7.7条件下，从样品中提坡过氧化氢嗨，在提取液中加入一定量的过氧化氧，使过氧化氢在过氧化氢酶作用下分解，再用高锰酸钾溶液滴定过量的过氧化氛，根据高锰酸钾溶液的消耗量计算出试样中过氧化氢酶活动度。
5试剂和材料
以下试剂均为分析纯试剂。
5.1水：符合CB/T6682实验室用水三级要求。5.22%过氧化氢溶液：取30%过氧化氢溶液 2 mL,加水稀释至30 rmL。5.310%硫酸溶液：10 ml.浓硫酸灿人90 mI.水中。5.4高锰酸钾标准溶液:c(1/5KMn0,)=0.2mo1/L,按GB/T 601配制和标定。5.5pH7.7索伦逊磷酸盐缓冲液：A液;称取磷酸氢二钠 11.876 g,溶于1 I.水巾3 液:称取磷酸二氢钾 9. 078 岛,溶于 1. L 水中。临用时,A液、B液按 9 :1 混合。1
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5.6不英砂。
6仪器与用具
6.1温水浴锅(或恒温培养箱)。
6.2电炉。
6.3具塞锥形瓶:250 ml。
6.4简:10 ml.,25 mL,100 ml-。6.5移液管:5 mL,20 mL,
6.6研钵。
6.7酸式滴定管;25 mL
电热恒温于燥箱，
6.9天平：分度值 0,001 =
锥形瓶：150mL。
6. 11 漏斗。
6.12比色管:50 ml.。
7试样制备
按CB5491进行分样。对大颗粒样品（如大豆、玉米、花生），要预先破碎；对带壳样品，要预先脱壳。
8操作步骤
8.1祥品水分测定按GB/T5497执行。8.2过氧化氢酶的提取：称取试样约1多（m），精确至0.01倒入研钵（6.6)中。加少量不英砂（5.6），粗磨至无整粒样后，量取缓冲液（5.5)50mL，先加人少量以润湿样品，细磨至糊状后，小心转移至锥形瓶(6.3)中，用剩余的缓液分多次洗净研体，洗液并入锥形瓶中，剧烈摇5min，静置2h~~3h后过滤至比色管(6.12)中。
8.3酶活动度的测定:准确移坡 20.0 mL滤液于锥形瓶(6.10)中,加入 20 mL水和 3 mL 2%过氧化氢溶液(5.2),摇匀后在30℃恒温水浴锅(或恒温培养箱)(6.1)中放置15 min,加人5 mL10%硫酸溶液（5.3),摇勾，用0.2mo1/L.高锰酸钾标准溶液（5.4)滴定剩余的过氧化氢，滴定至微红色且30s不褪色为止，记录消耗的高锰酸钾标雅溶液体积(V,）。8.4空白试验：吸取20.0mL滤液于锥形瓶（6.10)中，直接煮沸1min。冷却后加入20mL水和3ml2%过氧化氧溶液(5.2),摇勾后在 30 C温培养箱或水浴锅中放置15 min,加入 5 ml.10%硫酸溶液(5.3）摇匀，用0.2mol/L高锰酸钾标溶液（5.4)滴定剩余的过氧化氢，滴定至微红色月30s不极色为止，记录消耗的高锰酸钾标准溶液体积(V。)。9结巢计算
过氧化氢酶活动度X按式(1)计算：武中：
X=(Va-V)×mx(io=M)×17×)
X—过氧化氢酶活动度（以T基计),单位为毫克过氧化氢每克(mgHzO/g)；V—空白试验用去高锰酸钾体积,单位为毫升(mL);Vt——试样滴定用去高锰酸钾体积,单位为毫升(tnL);2
一实际商锰酸钾标准溶液浓度，单位为摩尔每升(mo)/I）；m-：试样质量，单位为克（g)；M试样水分含最，%；
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17——与L.00ml高锰酸钾标准溶液[c(1/5KMnO,）=0.2rnol/Lj相当的H.U,的质量。计算结果保留到小数点后一位。重复性
相同的实验材料，用尚样的方法，在同--实验室出同一操作人员使用同-设备在较短的时间间隔内获得两个独立的测定结果，测定结果之间绝对差值大于其算术平均值的10%的情况不得超过5%。GB/T 5522-2008
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粮油检验
粮食，油料的过氧化氢酶活动度的测定GB/T5522—2008
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5字数6千字
2009 年 1月第一版
2009年1月第一次印刷
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