ICS65.020.01 CCSB16 内蒙古自治 区 DB15 地方标准 DB15/T4106-2025 马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术规程Code of practice technical for indoor evaluation of potatoresistance to black leg disease2025-07-10发布 内蒙古自治区市场监督管理局 发布 2025-08-10实施 前言 DB15/T4106—2025 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC25）归口。本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业科学院、准格尔旗农牧局。本文件主要起草人：孙平平、李正男、张磊、席先梅、雷雪峰、黄秀梅、杨永青、廉勇、付崇毅霍宏丽、张溪、王金泉、牟英男、吴若晨。1范围 马铃署黑腔病室内抗性鉴定技术规程DB15/T4106—2025 本文件规定了马铃薯黑胫病室内抗性鉴定的术语和定义、培养基制备、接种体制备、接种、病情调查和抗病性评价等内容。 本文件适用于马铃薯品种在室内条件下对黑腔病抗性水平的鉴定2规范性引用文件 2 本文件没有规范性引用文件。 术语和定义 3 本文件没有需要界定的术语和定义。培养基制备 LBA培养基（病原细菌生长固体培养基）：5g酵母提取物，10g胰蛋白陈，10g氯化钠，15g琼脂粉，1000mL去离子水，121℃灭菌15min。LB液体培养基（病原细菌生长液体培养基）：不加琼脂粉，其余同LBA的制作方法。接种体制备 5 5.1病原物分离 取马铃薯黑胫病感病植株，采用组织分离结合单孢分离法从发病部位分离病原物，柯赫氏法则确定致病菌，形态学、生理生化特性和分子序列对致病菌株进行鉴定，确定为马铃薯黑腔病病原菌Pectobacteriumatrosepticum，保存备用。5.2菌悬液的制备 取100uμL在-80℃保存的分离病原菌涂抹于LBA培养基上，28℃培养48h。挑取菌落于100mLLB液体培养基中，置于28℃、180r/min培养48h，用无菌水调节菌悬液浓度至10℃fu/mL。5.3鉴定材料准备 选择形态完好、无明显伤病的马铃薯种薯，种植在装有无菌的细沙与腐殖土等量混匀的盆中，出苗后在温室环境下生长。采用随机排列盆栽，待马铃薯植株高约10cm用于接种。接种 6 1