ICS65.020.01
CCSB16
内蒙古自治区地方标准
DB15/T4106-2025
马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术规程
Code of practice technical for indoor evaluation of potato resistance to black leg disease
2025-07-10发布
2025-08-10实施
发布单位：内蒙古自治区市场监督管理局

前言
DB15/T4106—2025
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC25）归口。
本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业科学院、准格尔旗农牧局。
本文件主要起草人：孙平平、李正男、张磊、席先梅、雷雪峰、黄秀梅、杨永青、廉勇、付崇毅、霍宏丽、张溪、王金泉、牟英男、吴若晨。

1 范围
本文件规定了马铃薯黑胫病室内抗性鉴定的术语和定义、培养基制备、接种体制备、接种、病情调查和抗病性评价等内容。
本文件适用于马铃薯品种在室内条件下对黑胫病抗性水平的鉴定。

2 规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。

3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。

4 培养基制备
LBA培养基（病原细菌生长固体培养基）：5g酵母提取物，10g胰蛋白胨，10g氯化钠，15g琼脂粉，1000mL去离子水，121℃灭菌15min。
LB液体培养基（病原细菌生长液体培养基）：不加琼脂粉，其余同LBA的制作方法。

5 接种体制备
5.1 病原物分离
取马铃薯黑胫病感病植株，采用组织分离结合单孢分离法从发病部位分离病原物，柯赫氏法则确定致病菌，形态学、生理生化特性和分子序列对致病菌株进行鉴定，确定为马铃薯黑胫病病原菌 Pectobacterium atrosepticum，保存备用。
5.2 菌悬液的制备
取100μL在-80℃保存的分离病原菌涂抹于LBA培养基上，28℃培养48h。挑取菌落于100mL LB液体培养基中，置于28℃、180r/min培养48h，用无菌水调节菌悬液浓度至10^8 CFU/mL。
5.3 鉴定材料准备
选择形态完好、无明显伤病的马铃薯种薯，种植在装有无菌的细沙与腐殖土等量混匀的盆中，出苗后在温室环境下生长。采用随机排列盆栽，待马铃薯植株高约10cm用于接种。

6 接种