本标准规定了用高效液相色谱(HPLC)测定固态速溶茶中儿茶素类含量的方法。本标准适用于固态速溶茶中儿茶素类含量的测定。本标准修改采用ＩＳＯ １４５０２-２：２００５《高效液相色谱法测定绿茶中儿茶素》。本标准与ＩＳＯ１４５０２-２：２００５的主要差异为：本标准采用了ＩＳＯ１４５０２-２：２００５中速溶茶儿茶素测定的有关部分，不包括ＩＳＯ１４５０２-２：２００５中茶叶儿茶素的测定部分；本标准结构上对ＩＳＯ１４５０２-２：２００５进行了适当的调整。 GB/T 21727-2008 固态速溶茶儿茶素类含量的检测方法 GB/T21727-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS67.140.10
中华人民共和国国家标准
GB/T21727-2008
固态速溶茶
儿茶素类含量的检测方法
Instant tea in solid form-Determination of catechins content(1SO 14502-2:2005, Determination of substances characteristic of green andblack tea-Part 2:Content of catechins in green teaMethodusing high-performance liquid chromatography,MOD)2008-05-04发布
数国游企
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2008-10-01实施
GB/T21727—2008
本标准修改采用ISO14502-2：2005高效液相色谱法测定绿茶中儿茶素》。本标准与ISO14502-2.2005的主夏差异为：本标准采用了ISO14502-2：2005中球溶茶儿茶素测定的有关部分，不包括ISO14502-2；2005中茶叶儿茶素的测定部分：本标准结构上对IS014502-2:2005进行了适当的调整。
本标准由中华全国供销合作总社提出并归口，本标准起草单位：中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院。本标准主要起草人：徐建峰、周卫龙，许凌。范围
固态速溶茶儿茶素类含量的检测方法GB/T21727--2008
本标准规定了用高效液相色谱CHPLC)测定固态理蹄茶中儿茶素类含量的方法。本标唯适用于固态速溶茶中儿茶素类合量的定。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用面成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本，凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T18798.1固态速籍茶敢样（GB/T18798.1-2002,eqVISO7516.1984）GB/T18798.3固态速溶茶水分制定（GB/T18798.32002eqvISO7513:1990）3原理
速溶茶用热的10%乙睛溶解。儿茶素类的测定用Cl柱，检测波长278nm，梯度洗脱，HPLC分析，用儿茶素类标难物质外标法直接定量，也可采用儿茶素类与咖啡碱的相对校正因子RRFs（ISO国际环试结果)（见7.2)来定量。
4依器
4.1分析天平：感量0.0001g
4.2水浴。
4.3离心机：转速3500/min。
4.4混匀器。
4.5高效液相色谱仪（HPLC）：包含梯度洗脱及检测器（检测波长278nm）。4.6数据处理系统。
4.7液相色谱柱：C.（粒径5μm250mmX4.6mm）5试剂
本标准所用水为重器馏水，除特殊规定外，所用试剂为分析纯。5.1乙睛：色谱纯。
5.2甲醇。
5.3乙酸
5.4甲醇水溶液（体积比）7十3
5.5乙二胺四乙酸（EDTA）溶液：10mg/mL（现配）。5.6抗环血酸落液：10mg/mL（现配)。5.7稳定落液：分别将25mLEDTA溶液（5.5），25mL抗坏血酸溶液（5.6）,50mL乙腈（5.1）加人500mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀.5.8获相色谱流动相
5.8.1瓷动相A+分别将90mL乙腩（5.1).20mL乙酸（5.3）2mLEDTA（5.5）加人1000mL容量1
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瓶中，用水定容至刻度，揭匀。溶液需过0.45m膜，5.8.2流动相B：分别将800mL乙（5.1）、20mL乙酸（5.3）、2mLEDTA（5.5）加人1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇勺。溶液需过0.45xm膜。5.9标准储备溶液
5.9.1咖啡碱储各落液，2.00mg/mL5.9.2没食子酸（GA）储备溶液：0.100mgmL。5.9.3儿茶素类储备溶液，+C1.00mg/mL，+EC1.00mg/mL，+ECC2.00mz/mL，+EGCG2.00mg/mL,+ECG2.00mg/mL.
5.10标准工作落液：用稳定溶液（5.7)配制。标准工作落液的浓度没食子酸5μz/mL25μg/mL，咖啡碱50μg/mL150μg/mL+C50pg/mL~150μg/mL,+EC50μg/mL~150μg/mL,+EGC100μg/mL~300μg/mL+ECCG100μg/mL-~400μg/mL.+ECG50μg/mL~200μg/mL6操作方法
6.1取样
按GB/T18798.1的规定。
6.2测定步照
6.2.1干物质含量测定
按GB/T18798.3的规定。
6.2.2供试液的制备
称取0.5g（精确到0.0001g）均匀的速落茶于50mL容量瓶，加人≤60℃水籍解，加5mL乙脂（5.1）并用水定容至刻度，摇勺。用移液管移取上述提取液2mL至10mL容量瓶中，用稳定溶液（5.7）定容至刻度摇匀，过0.45±m膜，待测。6.2.3色谱条件
流动相流速：1mL/min。
柱温：35℃
紫外检测器：=278nm
梯度条件：100%A相保持10min
15min内由100%A相→68%A相.32%B相68%A相.32%B相保持10min
6.2.4测定
100%A相
待流速和柱温稳定后，进行空白运行。准确吸取10L混合标准系列工作液注射入HPLC，在相同的色谱条件下注射10止测试液。测试液以睡面积定量。7结果计算
7.1计算方法
7.1.1以儿茶素类标准物质定量，按式(1)计算：AXfexVxd
儿茶素含量（%）=4
m，X105Xm
式中：
A所测样品中被测成分的峰面积；f——所测成分的校正因子（浓度/峰面积，浓度单位\μg/mL\)；一样品提取液的体积，单位为毫升（mL）一稀释医子（通常为2mL释成10mL，其帮释因于为5）：d
m-样品称取量，单位为克（g)：m
样品的干物质含盘，%。
7、1.2以咖啡碱标准物质定量按式(2)计算：AXRRFaXVXd
儿茶素含量（%)-
ScarXmX10°Xm
式中：
RRF—一所测成分相对于咖啡碱的校正因子：X10g
Sca——咖啡碱标准曲线的斜率（峰面积/浓度，浓度单位\ug/mL\)7.2儿茶素类相对咖啡碱的校正因子表见表1。
7.3儿茶素类总盈计算公式
表1儿茶素类相对咖啡藏的校正因于表+EGC
GB/T21727-2008
见式(3)。
儿茶素类总量C%）=EGC含量+C含量+EC含量+EGCG含量+ECG含量.3）7.4重复性
同一样品儿茶索类总量的两次谢定值相对误差应≤10%，若测定值相对误差在此范国，则取两次测得值的算术平均值为结果，保留小数点后两位
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