本标准规定了蜂蜜中植物花粉含量及浓度的测定方法。本标准适用于蜂蜜，不包括蜂蜜制品。 GB/T 23194-2008 蜂蜜中植物花粉的测定方法 GB/T23194-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS67.180.10
中华人民共和国国家标准
GB/T23194-—2008
蜂蜜中植物花粉的测定方法
Method for the determination of plant pollen in honey2008-12-31发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2009-06-01实施
本标准的附录A、附录B为资料性附录。本标准由中华全国供销合作总社提出并归口。GB/T23194—2008
本标准起草单位：江西农业大学蜜蜂研究所、中国农业科学院蜜蜂研究所、北京百花蜂产品科技发展有限公司、杭州澳医保灵药业有限公司、兰溪市鸿香生物科技有限公司、绍兴县润露绿色食品有限公司。
本标准主要起草人：曾志将、魏丽、马兰宇、虞英民、李熠、汪志平、冯华君。I
1范围
蜂蜜中植物花粉的测定方法
本标准规定了蜂蜜中植物花粉含量及浓度的测定方法。本标准适用于蜂蜜，不包括蜂蜜制品。2术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。2.1
花粉pollen
由一个营养细胞和1个～2个生殖细胞组成的显花植物的雄性种质。2.2
蜂花粉
beepollen
工蜂采集花粉，用唾液和花蜜混合后形成的物质。注：包括工蜂采集形成的团粒和人工粉碎加工形成的粉末。2.3
honey;beehoney
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蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物结合后，经充分酿造而成的天然甜物质。3原理
用乙酸软化蜂蜜中花粉的内含物，乙酸酐和硫酸的混合液再将软化的内含物分解，使花粉外壁及孔沟清晰，在显微镜下便于观测花粉形态和计数。4试剂
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或去离子水。4.1乙酸。
4.2乙酸酐+硫酸（9+1,体积比）：用时现配。4.3甘油。
4.4苯酚。
仪器与设备
烧杯：150mL。
5.2量筒：50mL。
5.3移液管：5mL，10mL。
5.4电炉。
5.5滴管。
5.6盖玻片。
5.7载玻片。
5.8离心管：100mL。
5.9离心机（2000r/min）。
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5.10电热恒温水浴锅。
5.11显微镜。
5.12血细胞计数板。
6试样的制备
6.1未结晶的样品，将其搅拌均匀。有结晶析出的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后揽匀，冷却至室温以备检验用。6.2称取均勾蜜样25g，加人约40℃的50mL蒸馏水，使蜂蜜溶解和稀释。此试样溶液用于蜂蜜中蜜源植物花粉含量的测定。
6.3称取均匀蜜样25g，并量取蜜样的体积。加入约40℃的50mL蒸馏水，使蜂蜜溶解和稀释。此试样溶液用于蜂蜜中蜜源植物花粉浓度的测定。7测定步骤
7.1花粉粒提取
将试样溶液（6.2)和试样溶液（6.3)分别倒入离心管中，以2000r/min的速度离心10min，弃去约4/5的上清液，加入5mL乙酸（4.1）并拌匀，浸泡2h。进行离心（2000r/min，10min），弃去药1/2的上清液，加入新鲜配制的乙酸和硫酸的混合液（4.2)6mL，并拌匀，然后将离心管放人80℃～90℃水浴中加热7min。停止加热后，迅速离心（2000r/min，10min），弃去5mL上清液，加10mL蒸馏水洗涤，离心水洗三次后，弃去上清液，使试样溶液（6.2）留下约5mL的样液，试样溶液（6.3）留下3mL的样液。加人1mL50%的甘油（4.3）保存，并加人2滴～3滴苯酚（4.4）作为防腐剂（若当时就计数及观察形态则可不加甘油和苯酚）。7.2蜂蜜中植物花粉含童的测定
7.2.1制片
吸取1滴样液放在载玻片上，加盖玻片，将边缘多余液体用滤纸吸干。7.2.2镜检
取制好的载玻片放在低倍镜下找到花粉，再在高倍镜下观察，每张载玻片均匀选择10个视野观察，鉴定花粉类别，统计花粉粒的数量。我国常见蜜源植物花粉的形态参见附录A。注：显微镜下花粉含量很少时，可选择有花粉的视野进行观察计数。7.2.3平行试验
按以上步骤，对同一试样进行两次平行试验测定。7.3蜂蜜中植物花粉浓度的测定
7.3.1镜检计数室
在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数。7.3.2加样液
用水稍微沾湿计数室两侧的支持柱，以推压法将盖玻片平放在计数室表面，尽量减少盖玻片与支柱之间的空气。用吸管吸取制备后的样液，沿盖玻片与计数室之间的缝隙充入计数室。7.3.3显微镜计数
加样后静置5min，然后将血细胞计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜找到计数室所在位置，然后换成高倍镜进行计数。在显微镜下，可见每个计数室平台上均刻有清晰的网格划线。由网格线围成的正方形区域为细胞计数区，最大正方形边长3mm，分为9个大方格，每个大方格边长1mm，面积1mm2，若覆以盖玻片并充满液体，液体的体积为0.1mm（0.1μL），四角的四个大方格分别以单划线分为16个方格，用作计数白细胞。位于中央的大方格即为计数室。计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格；另一种是一个大方格分成2
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16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，但无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方格都是400个。由于绝大多数蜂蜜原料中花粉数量少，因此在计数时直接计取每个计数室内的花粉粒数。
由于划线部分也占有计数室的总面积，因此对压线花粉粒也应列入计数，为避免重复计数或漏计，一般遵循数上不数下，数左不数右的原则。计数一个样液要从血细胞计数板内两个计数室中取得的平均数值来表示样液中花粉粒的数量。我国常见蜂蜜中花粉浓度的调查数据参见附录B。7.3.4清洗血细胞计数板
使用完毕后，将血细胞计数板在水龙头上用水冲洗干净，但不应用硬物洗刷。洗完后自行晾干或用吹风机吹于。镜检，观察每小格内是否残留花粉或其他沉淀物。若不于净，应重复洗涤至干净为止。7.3.5平行试验
按以上步骤，对同一试样进行两次平行试验测定。8计算与表述
蜂蜜中花粉率按式(1)计算；花粉浓度按式(2)计算。式中：
×100%
X-某种蜜源植物花粉粒占总花粉粒的比率；Ni——-10个视野中某种蜜源植物花粉粒数，单位为个；N2——10个视野中蜜源植物花粉粒总数，单位为个。N
×3×10×103
式中：
c-某种蜜源植物花粉粒浓度，单位为个每毫升（个/mL)；N--血细胞计数板平均个计数室中某种蜜源植物花粉粒个数，单位为个；V一量取的蜜样的体积，单位为毫升（mL）。计算结果保留两位有效数字。
·（2）
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附录A
（资料性附录）
中国主要及少数辅助商品蜂蜜中植物花粉形态特征中国主要及少数辅助商品蜂蜜中植物花粉形态特征见图A.1~图A.18。极面×1058
极面×756
极面×1058
极面×1058
赤道面×1058
刺槐花粉形态
赤道面×756
油菜花粉形态
赤道面×1058
荞麦花粉形态
赤道面×1058
图A.4荔枝花粉形态
极面×1058
极面×1058
极面×1285
赤道面×1058
党参花粉形态
赤道面×1058
搬树花粉形态
赤道面×1058
柑桔花粉形态
极面×2117
赤道面×2117
紫云英花粉形态
极面×2520
赤道面×2520
拎属植物花粉形态
GB/T23194—2008
GB/T231942008
极面×1361
赤道面×1361
枣花花粉形态
极面×1663
赤道面×1663
图A.11荆条花粉形态
极面×1663
赤道面×1663
图A.12益母草花粉形态
极面×1058
极面×1512
赤道面×1058
黄连花粉形态
赤道面×1512
龙眼花粉形态
极面×1058
赤道面×1058
图A.15首花粉形态
极面×1209
赤道面×907
图A.16茗子花粉形态
极面×1210
极面×1512
赤道面×1814
枇杷花粉形态
赤道面×1512
枸杞花粉形态
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（资料性附录）
中国主要及少数辅助商品蜂蜜中植物花粉含量及浓度中国主要及少数辅助商品蜂蜜中植物花粉含量及浓度见表B,1。表B.1中国主要及少数辅助商品蜂蜜中植物花粉含量及浓度产品名称
袖菜蜂鲨
刺槐蜂蜜
紫云英蜂蜜
荆条蜂蜜
柑桔蜂蜜
荔枝蜂搬
龙眼蜂蜜
枣花蜂蜜
枇杷蜂蜜
蓉子蜂蜜
觉参蜂蜜
极树蜂蜜
检属植
物蜂蜜
植物学名
Brassica campestris L
Robinia pseudoacacia L.
Astragalus sinicus L
Viter negundo var.
heterophylla(Franch,)Rehd,
Citrus reticulata Blanco
Litchi chinensis Sonn.
Dimocarpus longan Lour,
Ziziphus jujuba Mill.
Eriobotrya
ja ponica(Thunb, )Lindl.
Vicia cracca L
Codonopsis pilosula
(Franch,)Nannf.免费标准bzxz.net
Tilia amurensis Rupr,
Eurya spp.
原料蜜
本花种花粉率/%
60自过滤后
82.24±3.39
37.62±7.97
62.33±2.95
23.00±9.44
44.14±3.07
86.37±2.81
75.55±3.73
75.21±5.15
72.71±2.35
45.37±3.07
44.73±5.03
85.05±5.51
86.84±2.78
200过滤后
原料蜜
总花粉浓度/（个/mL）
60日过港后
74,.67±6.80
73.34±3.58
334750±3200
26.97±9.44
20440±3110
9700±2500
3400±1.500
18500±5600
53.02±6.4820.55±6.73
831540±3640
20.97±9,81
118.18±9.41
3500±1450
29.04±3.26
71.38±0.75
74.30±2,59
72.10±6.23
59.50±4.69
36.04±3.29
10.72±6.50
65.71±7.46
6510±3280
7790±1740
45.53±2.83
6200±1570
64.55±8.14
9070±1640
45.75±5.88
4.44±0.09
22.22±8.68
19.65±8.99
11710±4520
1250±770
2100±930
3050±1200
48.76±3,8538.74±2,5012580±30302800±900
4000±1100
4500±1200
5500±900
8200±700
6380±1500
500±700
1700±100
1900±700
10.600±2500
200目过港后
5200±1400
720±180
2500±500
2400±900
400±100
4200±1200
4400±1300
6200±1500
4500±1700
1100±300
1800±400
7.700±1000
本花种花粉浓度/（个/mL）
原料蜜
60自过港后
200目过滤后
28170±3060|7274±12004200±10007880±2100
800±200
20 020±2400|9800±1200
880±420
2670±880
6540±1820
4510±1370
700±50
1200±500
3400±700
3700±700
6440±17805700±1000
400±100
600±100
2500±800
1700±700
4300±1700
8250±2.570|3800±11002.058±1700590±390
900±590
2600±900
180±20
600±200
500±130
10520±31505100±1500
200±50
400±200
2500±900
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产品名称
土黄连蜂壶
荞麦蜂蜜
益母草蜂蜜
首著蜂蜜
梅杞蜂蜜
植物学名
Bertberis anrpisis C. Y. Wu.Fagopyrum
Moench
esculentum
Leomwsrtemisia
(Lour.)S. Y. Hu
Medicago satiua L
Lycium chinense Mill.
原料蜜
本花种花粉率/%
60目过滤后
表B.1（续）
200日过港后
原料蜜
总花粉浓度/（个/mL）
60目过谜后
37.32±3.9327.88±3.735120±215047.30±4.73
66,17±4.4257,87±2.8339,04±3,117 360±2 2105.61±1.92
56.51±4,07
4.31±1.14
45,56±3.71
2.51±0,330230±263
26.77±7.45
71.80±2.22
69.50±4.69
962.18±8.33
7.800±2030
15830±2630
3300±1100
7000±1600
6800±600
7500±1600
8300±2500
200日过滤后
2.000±800
5600±600
4200±800
4 000±900
4000±900
本花种花粉浓度/（个/mL）
原料蜜
2 480±1260
4700±1050
810±500
4580±1790
60目过键后
1300±400
4200±700
400±100
3400±800
11480±2240|5600±1.700
200日过滤后
500±100
2700±1200
100±40
1400±800
2400±800
GB/T23194—2008
GB/T23194-2008
中华人民共和国
国家标准
蜂蜜中植物花粉的测定方法
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邮政编码：100045
网址spc.net.cn
电话：6852394668517548
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开本880×12301/16
6印张1字数19千字
2009年4月第一版
2009年4月第一次印刷
书号：155066·1-36510定价16.00元由本社发行中心调换
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