本标准规定了测定饲料酸化剂中柠檬酸、富马酸和乳酸含量的高效液相色谱法。本标准适用于饲料酸化剂中柠檬酸、富马酸和乳酸含量的测定。本方法的定量限为：柠檬酸８００ｍｇ／ｋｇ、富马酸８．０ｍｇ／ｋｇ、乳酸８００ｍｇ／ｋｇ。 GB/T 23877-2009 饲料酸化剂中柠檬酸、富马酸和乳酸的测定 高效液相色谱法 GB/T23877-2009 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS 65.120
中华人民共和国国家标准
GB/T23877—2009
饲料酸化剂中柠檬酸、富马酸和乳酸的测定
高效液相色谱法
Determination of citric acid,funmaric acid and lactic acid in feed acidifier-High performance liquid chromatography2009-05-26发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标雅化管理委员会
2009-10-01实施
本标准的附录A为规范性附录，附录B为资料性附录。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)提出并归口。GB/T23877—2009
本标准起草单位：上海市饲料质量监督检验站、上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所。
本标谁主要起草人赵志辉，黄志英、顾赛红、杨海锋、林淼、白冰、雷萍，凤懋。品伙伴网http：//wwwfoodmate.ne1范围
饲料酸化剂中柠檬酸、富马酸和乳酸的测定
高效液相色谱法
GB/T238772009
本标准规定了测定饲料酸化剂中柠檬酸，高马酸和乳酸含量能高效液相色谱法本标准适用于饲料酸化剂中柠檬酸、富马种和乳酸含量的测定，本方法的定量限为：柠媒醉800mg/kg、宽马酸8.0mg/kg乳酸800mg/kg。CHINA
规范性引用文件
下列文件中的茶最本标准的引用而成为本标准的器款凡是注可期的用文件，其随后所有的修改单（不包括误的内容）或修计板均不适用！车标准费鼓励根据车标准达成协议的各方研究是否可使用这些文
GB/T 601
GB/T 6682
GB/T 1469
3原理
中的最新版本
儿是不生日期的别用文件，其最新版本适用于木家准。化学女剂标准漏定溶液的制备
折实验室用
水规格利武验方法
饲料梁样bzxz.net
试样中柠楼厂
高马酸和乳酸丽水超南提取后，箱释全适气的教度，用高效撞相色谱仪进行测定，外标法计算柠檬酸富马酸和乳酸的含量4
试剂和材料
除非另有说明法所用说剂均为分析纯为在合（工82二级就定用水，4.1乙晴色谱纯
酵酸：色遮纯
4.30.1%磷酸溶液：准
1000ml
00mJ.磷酸（4.2),用符台CB/1582现定的一级用小溶解并定容至
4.4柠檬酸标准品：纯度299
4.5高马酸标准品：纯度含99.5
4.6柠檬酸标准储备液：准确称取柠檬标准品0.5025于50mL容量瓶中用水溶解并定容至划度，比溶液液度为10.0mR/mL，4条性下储意.保存期3个月4.7富马酸标准储备液：准确称取0.1000包富马酸标准品于100mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，此落液浓度为1.0m/mL4条件下储裁·保存期3个月，4.8乳酸标准储备液：制备和标定方法见附录A4.9混合标准储备液：取10.0mL柠檬酸标准储备液（4.6）.1.0mL富马酸标准储备液（4.7)和10,.L乳酸标准储条液（4.8)于50mL容量瓶中，用水定容至刻度混匀。3℃条件下储戴，保存期1个月，4. 10混合标准工作液：准确吸取0.10 trL、0.25 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.50 rrL、5.C0mL.10.00mL混合标准储备液（4.9）于10.0mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀、此为混合标准工作液现现用
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5仪器和设备
5.1实验室常用仪器设备。
5.2分析天平：感量为0.0001g。5.3超声波清洗器。
微孔滤膜：孔径0.45μm。
5.5高效液相色谱仪（配有紫外检测器或二极管阵列检测器）。试样的制备
按 GB/T 14699.1 规定,取有代表性的样品 1 kg,四分法缩减取 200 g,装入磨口瓶中备用。7分析步骤
7.1试样溶液制备
弥取试样1g~5g（精确至0.0001g)，置于100mL容量瓶中，加60mL水，在50℃C水浴中超声提取20min，冷却至室温，用水定容至刻度，摇匀，过滤。取滤液稀释，使最后稀释液中各种有机酸的浓度均落在4.10的工作曲线之内。取部分稀释液过0.45um滤膜，滤液作为试样溶液。7.2高效液相色谱条件
色谱柱：Cl柱.长250mm，内径4.6mm，粒度5μm（极性色谱柱）。柱温：35℃，
流动相：乙腈+磷酸溶液（4.3）=2.5+97.5（体积比）。流速：1.0mL/min。
检测波长：210nm。
进样量20 μL
7.3液相色谱测定
分别取混合标准工作较(4.10)和试样溶液(7.1),按7.2列出的条件进行液相色谱分析测定。以混合标准工作液作多点校准，并用色谱峰面积积分值定量。测定中应调整试样溶液的浓度，使柠檬酸、富马酸和乳酸的积分值分别落在标准曲线的相应范围内。8结果计算与表述
试样中柠檬酸、富马酸和乳酸的含量X，以质量分数表示，按式(1)计算：式中：
n×1000000×100%
由标准曲线得出的试样液中柠檬酸或富马酸或乳酸的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）V——试样液总体积，单位为毫升（mL)；稀释倍数；
试样的质量，单位为克（g）
测定结果用平-行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。9 复性
在重复性条件下，完成两个平行测定的结果的相对偏差不大于5%2
A, 1试剂和材料
乳:纯度约为 90%。
附录A
（规范性附录）
乳酸标准储备溶瘦的制备和标定A. 1.20,1 mol/L氢氧化钠标准滴定溶液:按 GB/T 601配制和标定。GB/T 23877—2009
A.1.31%酚激指示剂液,1 B酚酸浴于 60 mL 95%乙醇中,用水释至100 mL。使量和投备
A.2.1电热套：500mL.
A,2.2图底烧瓶：500mL。
A, 2. 3球形冷无管,100 mL。
A,3制备和标定
称敢乳酸药3.0名于500mL圆底烧瓶中，加270mL水，装上球形冷凝管，接通冷水，加热回流15h,冷却至室摄.移敢20mL溶液.加40mL~60mL水及0.2mL1%酚酥指示剂,用0.1mol/L氢氯化销标准漓定潜液滴定至微红色30不褪色，记录消耗0.1mol/L氢氧化钠标准滴定溶液的膏升数(V,)。乳股标准储备液的浓度c,，单位为微克每毫升（μg/tnL),按式(A1)计算：ex(V, -V2)
X 90. 08 X 1 000
式中，
氢氧化钠溶液的浓度，单位为靡尔每升（mol/L)；V1一-一满定乳酸溶液所消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，单位为毫升(nL);V,一空白试验时所消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积,单位为毫升(mL)V。乳酸裕液的体积,单位为紊升(mL);90.08——乳酸的率尔质量。
此标准储备液在4℃下可保存3个月。(A.1)
GB/T 23877—2009
附录B
(资料性附录）
柠播酸、高马酸和乳酸标准品的色谱围柠机酸、马酸和乳酸标准品的色谱图见图B.1。AU
GB/T23877-2009
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高马酸
标准溶液色谱图
版权专有债权必究
书号：155066，1-38465
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