本标准规定了生鲜牛奶挤下后，在贮存、搜集和运输到乳品加工厂期间利用乳过氧化物酶体系防止其细菌性腐坏的方法。本标准适用于利用乳过氧化物酶体系保存生鲜牛奶防止牛奶腐坏变质的技术要求。 GB/T 15550-1995 活化乳中乳过氧化物酶体系保存生鲜牛乳实施规范 GB/T15550-1995 标准下载解压密码：www.bzxz.net

中华人民共和国国家标准
活化乳中乳过氧化物酶体系保存生鲜牛乳实施规范
Code of practice for the preservation of raw and freshmilk by activating the lactoperoxidase system1主要内容与适用范围
GB/T15550-95
本标准规定了生鲜牛奶（包括水牛奶，下同）挤下后，在贮存、搜集和运输到乳品加工厂期间利用乳过氧化物酶体系防止其细菌性腐坏的方法。本标准适用于利用乳过氧化物酶体系保存生鲜牛奶防止牛奶腐坏变质的技术要求。2引用标准
GB1268化学试剂硫氰酸钠
GB2760食品添加剂使用卫生标准GB6684化学试剂30%过氧化氢
GB6914生鲜牛乳收购标准
3术语
3.1乳过氧化物酶（lactoperoxidase）代号为LP，存在于牛奶的乳清中，含铁的乳清蛋白质，约为乳清蛋白质的1%。牛奶中LP约为10～30μg/mL。LP的特性是对热比较稳定。普通巴氏杀菌法（62℃30min或72℃15s）不能使其丧失活力，但80℃2.5s即可使其破坏。3.2乳过氧化物酶体系(lactoperoxidase system）代号为LPS，天然存在于生鲜牛奶（包括水牛奶）中和人类唾液中，为乳过氧化物酶、硫氰酸盐与过氧化氢三种物质所组成的一种抗菡体系。3.3过氧化氢(hydrogen peroxide）化学分子式为H02，为种强氧化剂。100%浓度的过氧化氢18℃时比重为1.4465。3.4过碳酸钠(sodium percarbonate)为干燥、白色、结晶细粉末状化合物，极易溶于水，在水中可以缓慢地放出过氧化氢，因而它是一种强氧化剂。目前国外已用它做牛奶保鲜剂的主要成分，分子式为2Na2CO，·3H,Oz。3.5硫氰酸盐(thiocyanate）
化学分子式为SCN-，也可写成CNS-，为动物所有组织和分泌物中存在的阴离子。牛奶中SCN-含量为2～7(1～15）ppm。SCN-具有微弱的性和蓄积毒性，用作牛奶保鲜剂时，必须严格遵照本实施规范执行，严禁溢用。
国家技术监督局1995-04-19批准1995-12-01实施
4方法原理
GB/T 15550-
乳过氧化物酶在生鲜牛奶中的浓度相当高，足够满足其形成LPS达到抗菌的需要（0.5ug/mL）。在有H2O2的条件下，促使SCN-被氧化成为亚硫氰酸（HOSCN）。在牛奶的pH值（pH6.4～6.8)条件下，亚硫氰酸会分离，以亚硫氰酸根离子(OSCN-）为主要存在形式。这种离子专门和细菌细胞表面游离的硫氢基团（SH)化合，致使细菌的几种与生命代谢有关的酶丧失活力，阻碍了细菌的代谢和增殖的能力。
这种抗菌的硫氰酸盐氧化物在中性pH值条件下不稳定，容易自发地分解为硫氰酸盐。分解反应的速度决定于温度，温度较高时分解较快。奶的巴氏消毒可以保证这种活性氧化产物的残余完全除净。乳汁刚离乳房时，硫氰酸盐的氧化程度很小，但通过添加低微浓度的过氧化氢，可以促进这种氧化。使用高浓度（300～800ppm）H202保存生牛奶时，会毁坏奶中的乳过氧化物酶，阻止硫氰酸盐的氧化，利用H2O2本身的杀菌作用抗菌。SCN-与HO2化合，以等摩尔化合。如H,O，浓度较低，则有部分SCN-得不到氧化，OSCN-产量减少，保鲜的效力也相应地减弱；如H,O浓度较大，则会产生存在时间比OSCN-更为短暂的较高的含氧酸，如氰亚硫酸（HO,SCN)和鼠硫酸（HO.SCN）,在奶中分别分解为O,SCN-和OSCN-。其杀菌力虽较OSCN-为强，但极不稳定，存在时间太短，所以保鲜的效力仍然减弱。当提供的H,O为等摩尔时，LPS的抗菌作用在一一定限度内和SCN-浓度呈正相关。应用此法保鲜时，需要添加SCN-以保证奶内具有的SCN-水平达到所需求的抗菌作用。5保鲜剂的制备
5.1保鲜剂为硫氰酸钠和过氧化氢或过碳酸钠组成，硫氰酸钠和过氧化氢须分别不低于GB2168和GB6684中分析纯等级。过碳酸钠因缺少国家标准，暂时规定不得低于联合国JECFA1第35届会议制订的《过碳酸钠规格标准》附录A）。注：1）JECFA为联合国粮农组织/世界卫生组织联合食品添加剂专家委员会。5.2保鲜剂按形态分固态和液态两种，具有同等保鲜效果。5.2.1固态保鲜剂由硫氰酸钠和过碳酸钠组成。5.2.1.1硫氰酸钠添加量：每kg生鲜牛奶加入量15mg。5.2.1.2过碳酸钠添加量：纯度为85%时，每干克生鲜牛奶加入量30.8mg。5.2.1.3包装：上述两种药剂必须分开，用食品级半透明塑料膜分别包装，真空封口；或加乳糖等适量的填充剂压成片剂，用水泡眼塑料膜封装防潮。注明药剂名称和重量。5.2.2液态保鲜剂由硫氰酸钠溶液和过氧化氢溶液组成。5.2.2.1硫氰酸钠溶液配制：称取15.0g硫氰酸钠倒入100mL定容瓶内，加蒸馏水50mL摇荡，待溶解后再加蒸馏水至定容瓶刻度处，然后将溶液分装无毒塑料瓶或玻璃瓶内，封口。瓶上注明药剂名称和浓度（15g/100mL）。
5.2.2.2过氧化氢溶液配制：用移液管吸取30%过氧化氢溶液19.6mL，移入100mL定容瓶内加蒸馏水至刻度处，然后将溶液分装无毒塑料瓶或茶色玻璃瓶内，封口。瓶上注明药剂名称和浓度（8.5g/100mL)。
5.2.2.3以上两种溶液装箱时必须附使用说明，箱上印商品名称、厂名、封箱日期、有效期限、贮存运输时应注意事项(如防潮、防压等)。5.3液态或固态保鲜剂均应贮藏于阴暗、低温处（3～5℃为宜）。液态保鲜剂须经常用新配制的溶液对照检查其保存牛奶的效力，效力下降时应及时更换。5.4液态保鲜剂中过氧化氢溶液易分解，在3～5℃冰箱中保存期不应超过两个月，30℃以下室温中不宜超过两周。硫氰酸钠溶液在3~~5℃冰箱中贮藏4个月或室温中贮3个月都不会影响保鲜效果。固610
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态保鲜剂中硫氰酸钠太易潮解，加工片剂时应注意工艺问题。用胶囊分装的硫氢酸钠离开密封袋后，室温内贮存期不宜超过3个月。
6操作方法
6.1在奶中加入硫氰酸钠，固态、液态均可，但只能用一种，不可二者同时都用。加入剂量：如固态，则依照5.2.1.1项规定办理，如液态则用5.2.2.1项配制的硫氰酸钠溶液每10kg奶中加1.0mL。然后用洁净的搅拌器搅拌约1min，使其混合均匀。6.2在奶中加入过碳酸钠或过氧化氢，两者之中同样也只能加一种。加入剂量：加过碳酸钠须依照5.2.1.2项规定办理；加过氧化氢则用5.2.2.2项配制的过氧化氢溶液每10kg奶中加1.0mL。再搅拌2~～3min，使其完全溶解并均勾分布于生鲜奶中。6.3硫氰酸钠和过碳酸钠（或过氧化氢）添加时必须依照上述先后次序分别进行，不可颠倒，也不可以先混合，后加入或同时加入。
6.4添加保鲜剂应在奶挤出后2或3h之内进行。7使用的规定
7.1牛奶收购中心（站）、点或奶牛场因无冷却设施，或其他原因，必须用本方法处理生鲜牛奶，否则奶即会腐坏时才使用。
7.2本方法不能让个体农民、牧民自己操作，只能在收奶中心、收奶点和国营农牧场使用。操作人员必须经过培训，考试及格者方能上岗。使用本办法处理过的生鲜牛奶在向乳品加工厂交售时必须进行说明。wwW.bzxz.Net
7.3乳品厂加工搜集来的经过LPS方法处理的生鲜牛奶，应按照本方法的规定使用。乳品厂应建立有适当的控制方法（详见8章），以监督检查本方法的应用。7.4本方法抑菌的效果决定于奶的贮存温度。卫生等级好的生奶在不同的贮存温度条件下，用LPS方法保鲜的有效时间见表1：
贮存温度，℃
有效保鲜时间
16～17h
24~26h
48h左右
5～7夜
7.5应用LPS方法保存的生鲜牛奶，饮用和加工前必须经过加热消毒。7.6应用LPS方法保存生鲜牛奶单位须不排除应用正常的预防措施和管理常规以保证生鲜牛奶的良好质量及卫生标准。
8使用的控制
8.1在采用LPS保存生鲜牛奶方法实施地区，乳品厂收奶时必须进行控制检测。如酸度滴定，美兰测定，活菌总数测定和 SCN浓度测定等。611
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8.2因 SCN-在反应中没有消耗，用LPS方法处理的奶送达乳品厂时,SCN-浓度应为 10.74 ppm+奶中天然SCN-浓度（后者可以测定当地未处理的鲜奶求得）。8.3应不定期地随机采取奶样测定SCN-浓度。测值超出规定范围，必须查明原因，情节严重者应拒绝收奶。
8.4保鲜剂药品应由乳品厂统一定购和分发，并负责监督检查。612
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附录A
过碳酸钠技术规格要求
（补充件）
我国尚无这种化学试剂的国家标准。参考联合国JECFA第35届会议制订的《过碳酸钠规格标准》要求如下：
A1别名：碳酸钠过氧水化物,过氧碳酸钠。A2定义：化学名称
C.A.S编号：
化学式：
相对分子质量：
分析纯度：
过碳酸钠
15630-89-4
2Na2CO3.· 3H2O2
有效氧不少于13%（相当纯度85%）A3说明：干燥、白色、结晶细粉末状。注意：为强力氧化剂，应避免接触眼睛和皮肤。A4功能和用途：抗微生物增效剂（乳过氧化物酶/硫氰酸盐/过氧化物抗微生物的生奶保鲜体系的组成部分)。
A5特性：
A5.1鉴定测试：
溶解度：易溶于水（商业品溶液不清澈）度：pH为10.5左右（1%溶液）
钠的检测阳性通过
A5.2纯度测试：
砷：不超过 3mg/kg
重金属：不超过10mg/kg（如Pb）A6分析方法：
A6.1程序：
用量简仔细加100 mL硫酸溶液Cc(H,SO,）=1.8mo1/L)于600mL烧杯中，用称样血（taredwatchglass)准确地称取大约4g样品。设此样品重量为mg。将称样血放入烧杯中，烧杯上盖一表玻璃（clockglass），摇勾，使样品溶解。将溶液移入一500mL容量瓶中，用蒸馏水冲洗表玻璃和烧杯壁，并将冲洗液全部倒入容量瓶中，再用蒸馏水稀释至刻度处，充分混合。取 100 mL硫酸溶液Cc(H,SO.)=1.8mol/L]加入 600 mL锥形烧瓶中，并加高锰酸钾溶液【c（一KMnO,）一0.1mol/L）滴定至呈现暗淡持久粉红色。用安全移液管加入25.0mL样品溶液并充分混合。用高锰酸钾溶液［c（
VmL。
A6.2计算
一KMnO.)=0.1mol/L）滴定至再呈现暗淡持久粉红色。设滴定结果为样品中有效氧的含量计算如式（A1)：有效氧(如0,)% =
V × c× 8× 500
V×c× 1.6
×100=
10 × 1 000 × 25 × m
式中：c高锰酸钾溶液之物质的量浓度，mol/L，m
-样品重量，8；
-高锰酸钾溶液之用量，mL。
.....(A1)
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附录B
奶中硫氟酸盐(SCN-)的分析
（补充件）
B1原理：奶经过分离脱脂，加入三氯乙酸(TCA)脱蛋白后，再加入高铁复合物，在460 nm波长下，测定吸光度，可测出其中SCN2含量，可测定出最小的浓度为1～2ppm。B2试剂溶液
B2.120%(m/V)三氟乙酸(TCA)溶液：用20gTCA(分析纯)溶于100mL蒸馏水中，过滤即得。B2.2硝酸铁试剂：取16.0克硝酸铁[Fe（NO)：·9H,O](分析纯)溶解于50mL硝酸溶液Cc(HNO.）一2mol/L>1)中，用蒸馏水稀释至100mL。配好的溶液应贮存于黑暗冷凉地方。注：1）硝酸溶液Cc(HNOs)=2mol/LJ之配制法：取138.5毫升 65%HNOs(分析纯)用蒸馏水稀释成1000mL。B3测定：取4mL奶离心脱脂后加入2.0mL20%TCA溶液，混合均勾后，静置（好在3～5℃冰箱内）不少于30分钟，然后过滤。取清澈的滤液1.5mL加入1.5mL硝酸铁试剂，混合后，在460nm波长下测定吸光度，同时用1.5mL硝酸铁试剂加蒸馏水1.5mL混合均勾后做空白对照。测定必须在加入硝酸铁试剂后10min之内进行。因为颜色复合物不稳定，稍久即变。将所得结果与5～6个已知的不同浓度（如5、10.15、20和30ppm)的SCN-溶液用同样处理所得结果(标准）相比，即可求出奶中SCN的浓度。
附加说明：
本规范由中华人民共和国农业部提出。本规范由中国农业科学院畜牧研究所起草。本规范主要起草人主鹏，
本标准参照采用联合国食品法典委员会（CAC)批准的国际奶联（IDF）制订的《利用乳过氧化物酶体系保存生奶实施规范》和粮农组织/世界卫生组织联合食品添加剂专家委员会（JECFA）第35届会议（1989)制订的C.A.S15630—89《过碳酸钠规格标准》。614
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