NY/T 1857.3-2010 黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程 第3部分：黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程 NY/T1857.3-2010 标准下载解压密码：www.bzxz.net

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中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1857.3-—2010
黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程第3部分：黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程Rules for evaluation of cucumber for resistance to diseascsPart 3 : Rule for evaluation of cucumber for resistance to fusarium wilt2010-05-20发布
2010-09-01实施
中华人民共和国农业部发布
NY/T 1857.3—2010
NY/T1857—2010《黄瓜十要病害抗病性鉴定技术规程为系列标准：共8部分：一第1部分：黄瓜抗箱等病鉴定技术规程；—第2部分：黄瓜抗白粉病鉴定技术规程；第3部分：黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程；-第4部分：黄瓜抗疫病鉴定技术规程；—第5部分:黄瓜抗黑星病鉴定技术规程；第6部分：黄瓜抗细菌性角斑病鉴定技术规程；一第7部分黄瓜抗黄瓜花叶病毒病整凝技术规程：-一第8部分：黄瓜抗南方根结线虫病鉴定技术规程。本部分为.NY/T1857-2010的第3部分本部分的附录A为资料性附录.
本部分由中华人民共和国农业部种栢业管理司提出开归口。本部分起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉桃究所，木部分主安起草人：杨宇红，谢丙炎、冯兰香、杨翠菜、龚慧芝。1
1范围
黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程第3部分：黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程NY/T 1857.3—2010
本部分规定了黄瓜抗粘萎病鉴定的术语和定义、接种体制备、鉴定条件及试验设Ⅱ、接种、病情调查、抗病性评价和整定记载表格。本部分适用于各种黄瓜资源对黄瓜枯萎病抗性的空内整定及评价。2术语和定义
下术语和定义适用」本部分：
抗病性dliseaseresistaunc
植物休所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状。2.2
抗病性鉴定identification of discase resistance通过适宜技术方法鉴定植物对特定病害的抵抗水！，2.3
抗性评价evaluation nf resistance levcls粮据采用的技术标准判别植物对特定病害反应稳度和抵抗水平的描述。2.4
致病性pathogenicity
病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。2.5
人工接种 artificial incxulation在适宜条件下，通过人工操作将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过混。2.6
病情级别diseaserating scale
人为定量植物个体或群体发病程度的数值化批述。2.7
病原分离物
pathogenic isolate
采用人T方法从植物发病部位分离获得的在特定环境条件下培养的病原物。2.8
培养基ullure medium
可以使病原物生长的白然或人工配制的基质：2.9wwW.bzxz.Net
接种体inuculuru
用于接种以引起病害的病原物或病原物的部分。2. 10
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接种悬浮液imoculumsuspension用于接种的含有定量接种体的液体。2.11
病情指数disase indlex(DI)
追过对植物个低发病程度（病情级别)数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述影式。2. 12
生理小种physiological race
病原物种内在形念上无差异，但在不同种挡物和品种上其有显著效病性差异的类群。2. 13
鉴别寄主differenlial hust
用于鉴和分特定病原物的生埋小种/致病型/殊系的一套带有不同抗性基因的寄主品种/品系或材料。
黄瓜枯萎病Cucumbcr fusarimnwilt山尖镰孢菊黄瓜专化型EFusaniumorysporun（Schl.）.p.(ucumeninwen所引起的平蔓H部纵裂，维管束变揭，致整株枯死的黄瓜十传病害。3接种体制备
3.1病原物分离
从黄瓜发病植株茎部病变的维管束用带规红织分离法分离枯蒸病病原物。分离物经形态学鉴定及瓜类（黄瓜、甜瓜，西瓜、南瓜、冬瓜，丝派）接种硼认为尖镰孢茵黄瓜专化型LFustrinusor（Schl.)）.sp.cucumerinumOwcn-后，采川单孢分离进行分离物纯化，经致病性测定后，保存备用。3.2生理小种鉴定
对将用丁抗性鉴定接种的分离物首先迹行止现小种整定，生用小种鉴别窗主采用含有不筒抗枯楼病单基因的黄瓜材料，具体方法见附录A的A.23. 3接种体繁殖与保存
在接种前露要进行病原物接种体的繁殖。常用繁殖方法为将保存于PDA斜而培养基工的英瓜粘萎病菌接种于盛有Pl.培养液（马铃薯200，乳糖20档，蒸馏水1000n)的锥形瓶，肾于2528℃探床.上，以120r/min培养d～7d，培养液经两层纱布过，滤液置于离心机中以4000r/min离心10mi1,倒除上清液，加适最蒸馏水稀释后，即为饱子悬浮液，供接种用。或将黄瓜枯菱病菌按种在PA半板上，在25\C的恒温箱中培养7d，然后加无菌水·用玻棒将菌丝上的孢了刮下米，经两层纱布过滤后即得孢子浮液。
常用保存方法为：将黄瓜枯菱病菌接种于PT>A斜而培养基上，在25℃的恒漏箱中赔养7d后置1℃～8℃冰箱内保存；或在斜面上加一层火菌矿物油（随过斜面顶部1cm)后，置冰箱或室温下保存。4室内抗性鉴定
4.1鉴定室设置
人工接种鉴定室应具备人门调节温度、湿度及光照的条件，使人工接种后具备良好的发病坏境。4.2鉴定对照品种
鉴定时设\长春密刺”黄瓜为抗病对照品种，“津研2号”黄瓜为感病对照品种：4.3鉴定设计
鉴定材料随机或顺序排列，每份材料重复3次：每重复10株苗2
4.4鉴定材料育苗
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鉴定材料种子经5%次氯酸钠辫液浸种10Imil1后，用清水冲洗，放人垫有两层滤纸的培养Ⅲ中，然后F恒温培养箱中28C催芽。得胚根长至0.5cm时，将其播丁装有播种基质的塑料育节内。育苗基质为草炭、蛭石和菜日土（2！：1），基质经高温蒸汽灭菌（134℃.30min）。在20℃~~25C的日光温室内育苗.幼萌应牛长健壮、一致
4.5接种
4.5.1接种期
黄瓜枯菱病抗性鉴定接种期为2片子叫展平期。4.5.2接种浓度
约4×106孢子/mL，
4.5.3接种方法
将幼苗连根轻轻拔起，根部用水冲洗后川接种液没过根部浸根55，然后将接过种的黄瓜苗重新定植于有播种墨质的育苗钵中。
4.6接种后管理
接种唇将植株置于鉴定室内.每天光照14h，保持植株正常尘长的土壤湿度，接种期间温度控制在25℃--28℃范围内。
5病情调查
5.1调查时间
病倩调查接种后10d～15d进行。5.2调查方法
调查每份鉴定材料接种株发病情况，根据病害症状描述，逐份材料进行调否，记载病情级别，计算出病情指数(DI)。
病情指数按公式(1)计算：
式中：
一病情指数：
各病情级别代表数值：
一各病情级别病株（叶）数；
N调查总株(叶>数：
S—：最高病情级别代表值
5.3病情分级标准
≥(s×n)
室内病情分级及其对成的症状描述见表1。表1黄瓜枯萎病病情级别划分
病情级别
无症状
子叶黄化,但未娄蕊
子叶葵蕊
症状描述
广叶和真三蒙熊或植株矮化
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6抗性评价
鉴定有效性判别
当感病对照材料达到其相虚感病程度（DT50），该批次抗枯病鉴定视为有效。6.2抗性评价标准
依据鉴定材料的发病程度(病情指数)确定其对枯娄病的抗性水平，划分标准见表2。表2黄瓜对枯萎病抗性评价标准
病情措数
50-D70
鉴定记载表格
黄瓜抗枯萎病鉴定结果记载表格见表3。表3黄瓜抗枯萎病鉴定结果记载表编号
品种名称
.播种期
3.接生育期，
5.牛理小种类型：
病啃级别
2.接种口期：
抗性评价
高抗（HR）
抗病(R)
中抗(MR)
感(S)
高感（HS)
病情指数抗性评价
4.接种病原菌分离物编号：
。谢查日期：
鉴定技术负责人(签字)：
A.1学名和形态描述
附录A
(资料性附录
黄瓜枯萎病病原菌和生理小种
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火镰跑菌黄瓜专化Fusuriwn.axysporum(Schl.f.sp.cucumerinunzCwen1气生菌丝凹色双密，在乃铃薯藤糖琼脂培养基上则呈胃紫色或淡褐色绒露，小型分生孢「长椭面形，无色，单胞或偶尔双胞，大小7.5um20.0um×2.5rm～%.0um大型分生孢广纺锤形成镰川形无色，1～5个隔膜，以3个隔膜的店多，顶端细胞较长，渐尖，基部倒圆锥截形或有足细胞，大小为一个隔膜的12.5um~32.5umX3.75m~6.25μm.两个隔膜的21.25um~32.5um×5.0gm-7.5μm，三个隔膜的27.5mm~45.0um×5.5urn~-10.0jum：厚有孢「项生战间生，球形，淡黄色。该菌致病性有生理分化现象：分别定名为生理小种1.2、3号；我国黄瓜枯婆病菌的致病性不存在显著差异，即为同个牛理小种.在鉴别寄主的抗性表现为尺、R、S，与已知的小种1、2、3号不同,定名为生理小种4。A.2生理小种鉴定方法
A.2.1采用的鉴别寄主
生理小种鉴别寄采用MSUI8519.MSU441034、PI390265共3个黄瓜品种（材料）。A2.2枯萎病菌生理小种编码规则与命名表A.1枯萎病菌生理小种及其在鉴别寄主上的抗感反应鉴别寄
MSU 8519
MSUJ44:034
PI390263
小种1美国）
小种2（以色列)
小种3（本）
小种4(中国）
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