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DB13/T 1109-2009

基本信息

标准号: DB13/T 1109-2009

中文名称:食品中过敏原卵蛋白的测定 酶联免疫法

标准类别:地方标准(DB)

标准状态:现行

出版语种:简体中文

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相关标签: 食品 过敏原 蛋白 测定 免疫

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DB13/T 1109-2009 食品中过敏原卵蛋白的测定 酶联免疫法 DB13/T1109-2009 标准压缩包解压密码:www.bzxz.net

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标准内容

ICS 67.100
方标准
河北省地
DB13/T1109—-2009
食品中过敏原卵蛋白的测定
酶联免疫法
Determination of egg protein in foodsEnzyme-linked immunosorbent assay method2009-05-27发布
河北省质量技术监督局
htt
2009-06-11实施
本标推出河北省质景技术监督局提出。前言
DB13/T1109—2009
本标准起草单位:河北医科大学基础医学院、河北省食品安全重点实验室、河北省食品质量监督检验研究院。
本标准丰要起草人:吕品、张岩、李挥、周正、李丛芬、刘东、玉丽霞、刘辰魁、范斌、康素芬。http://foodm
atenet
酶联免疫法
食品中过敏原卵蛋自的测定
本标准规定了食品中过敏原卵蛋白的酵联免疫测定方法。本标准适用丁面制品利冷冻饮品中过敏原卵蛋白的测定。本部分的方法检出限:0.6mg/kg2规范性引用文件
DB13/T 11092009
下死文件中的条款通过本标准的引而成为本标准的条款。凡是注日期的引川文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用本标准,然而,鼓励根据本标推达成协议的各方研究是否使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用义件:其最新版本适用本标推。GB门6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
样品中的卵蛋白与试剂盒中微孔条.上预包被的偶联抗原竞争抗卵蛋白的抗体,加入酶标抗体后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含卵蛋白的含量成负相关,与标雅曲线比较即可得出样品中刚蛋白的含最。
4试剂和材料
除非另有说明,在分析中均为分析纯试剂和GBT6682中规定的一级水。4.1的蛋白检测试剂盒
4.1.48孔板:6条×8孔(涂布有抗蛋清蛋百的抗体)。4.1.2全蛋粉标准辫液:0mg/L,0.5mg/L,1.5mg/L,4.5mg/L,13.5mg/L4. 1. 3酶标抗休。
4.1.4染色液。
4. 1. 5 终止液。
4.1.610倍浓缩洗涤液。
4.1.720倍浓缩萃取液。
4.2萃取T.作液:用水将20倍浓缩苯取液按1:19体积比进行稀释,萃取.1作液在4℃环境可保存个汀。
4.3洗涤T.作液:用水将10倍浓缩洗涤液按1:9体积比进行稀释,用于酶标板的洗涤,洗涤1.作液在4℃环境可保存个月
5仪器
5.1酶标仪:具450mm滤光片。
5.2单道移液器:20μL-~200 μL和200μL~-1 000μL。5.3漩涡混匀器。
5.4冷冻离心机。
5.5刻度吸量管
5.6均质器。
食品伙付
5.7水浴锅
6分析步骤
6.1提取
DB13/T1109—2009
准确称取均质样品1.0各于50mL离心管中,加入20mL预热至60℃C的稀释萃取液,60℃水浴10min;2500r/min低温(4C)离心10min;过滤上清液:取100μuL用于分析。6. 2测定
6.2.1分别吸取取100uL标准工.作溶液或样品溶液到对应的微孔中,轻轻振荡混勾,用盖板膜盖板后室温反应 10 min。
6.2.2小心揭开盖板膜,将孔内液休甩T,川洗涤工作液(250L/孔),充分洗涤4~5次,每次间隔105:用吸水纸拍干(拍十后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。6.2.3每孔加入酶标二抗100 μL,轻轻振荡混勺,用盖板膜盖板后室温反应10 min,取出垂复洗板步骤 6. 2, 2。bZxz.net
6.2.4每个孔中加入染色液100 μL,盖板膜盖板后室温反应10 min。6.2.5每孔入终止液100uL,轻轻振荡混勾,设定酶标仪于450nm处,测定每孔吸光度值。6.3空自试验
除不称取试样外,均按工述步骤进行。6.4监控试验
每次测定均应做个添加蛋清蛋白标准的显色剂样品。」结果计算
以吸光度值为纵坐标,蛋蛋白标准!作游液浓度为横坐标,绘制半对数标雅!作曲线。从标准1竹曲线上得到试样中相应的蛋清蛋白浓度后,结果按公式(1)计算:X=c×V×1000
mx1000
武中:
X-—试样中蛋清蛋白残留量,单位为微克每「克(rgkg);心——从标准工作仙线上得到的试样中岱清强白浓度,单位为微克每Ⅱ(mg/1.);V一—样品溶液的体积,单位为旁升(ml.))m一样品溶液所含的试样质量,学位为克(g)。绍果表示到小数点后两位
注:计算果应除空凹值
食品伙伴
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