DB34/T 486-2004
基本信息
标准号： DB34/T 486-2004
中文名称：霍山石斛
标准类别：地方标准(DB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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相关标签： 石斛
标准分类号
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标准简介
DB34/T 486-2004 霍山石斛
DB34/T486-2004
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标准内容
安徽省地
霍山石斛
2004-11-09发布
方标准
DB34/T4862004
2004-11-09实施
安徽省质量技术监督局发布
1范围
2规范性引用文件
3产地范围
4定义
5原植物形态
6要求
7试验方法
8检验规则
9包装、标志、运输、贮存
+++..++..+++..++.
（规范性附录）石斛多糖含量的测定方法.（规范性附录）
石斛总生物碱含量的测定方法
DB34/T4862004
DB34/T4862004
本标准是对霍山石斛生产销售使用进行分析研究的基础上，总结多年实践经验，按照GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分；标准的结构和编写规则》的规定，参照《中国药典》2000年版一部，并根据实际情况编制的。
本标准由安徽国家农业标准化与监测中心提出本标准起草单位：安徽国家农业标准化与监测中心本标准主要起草人：耿天霖、昊南侠、陈萍、丁昌东、程禹
本标准于2004年11月9日首次发布，I
1范围
霍山石斛
DB34/T486-2004
本标准规定了霍山石斛的产地、定义、形态、要求、试验方法、检验规则、及包装标志、运输、赔存。
本标准适用于采收期为三年以上崔山石于品规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T5009.11
GB/T5009.12
GB/T5009.15
GB/T5009.17
GB/T5009.22
GB/T5009.19
食品中总砷的测定方法
食品中总铅的测定方法
食品中总镉的测定方法
食品中总汞的测定方法
食品中黄曲霉毒素B,的测定方法食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法《中国药典》2000年版一部
《中国药典》2000年版一部
3产地范围
附录IA药材取样法
附录IXH水分测定法
本标准所指霍山石斛为安徽省霍山县境内所产石斛。4定义
霍山石斛
本标准霍山石斛指著名道地产区安徽省霍山县所产三种石斛：霍山米斛（DendrobiumhuoshanenseC.Z.TangetS.J.Cheng）、霍山铁皮石（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）、霍山铜皮石斛（DendrobiumcrispulumKimura etMigo)。
龙头凤尾
石斛剪去部分须根经揉制、整形、烘烤等加工，制成螺旋形金黄色的商品，茎基残留短须根习称龙头，茎末保留顶梢较细习称凤尾。4.3足干
指经过加工干燥含水量达到标准。5原植物形态
5.1霍山米（DendrobiumhuoshanenseC.Z.TangetS.J.Cheng）茎丛生，直立，肉质状，长3～9cm，从下部向上逐渐变细，下部直径0.25～0.3cm或更宽，具3～7节，淡黄绿色，有时带淡紫红色斑点。叶薄革质，2～3片互生于茎的上部，舌状长圆形，长通常23cm，宽0.5～0.7cm，端钝并且微凹。总状花序出自于已经落了叶的茎上部：花苞片浅白色带栗色，卵形，1
DB34/T4862004
长约0.3cm；花黄绿色，稍有香气，中萼片卵状披针形，长1.2～1.4cm，宽0.4~0.5cm，端钝；侧萼片镰刀状披针形，长1.2～1.4cm，基部宽0.5～0.7cm，端钝：萼囊短钝而近圆形：花瓣卵状长圆形，与中萼片等长而稍宽，端钝：唇瓣近阔菱形，长宽约相等，1～1.5cm，基部楔形并且具一个肼抵体，上部稍3裂，侧裂片近半卵形，两侧裂片之间密生短毛：中裂片半周状三角形，基部密生长白毛，并且具个椭圆形横向的黄色斑块，端近尖：蕊柱足密生长白毛：药帽绿白色，近半球形，顶端微凹。花期5月。
5.2铁皮石（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）茎直立，圆柱形，通常长20~35cm，粗0.2～0.4cm.幼嫩茎长5～7cm，肥壮饱满，可粗达0.9cm。长茎着花时略弯垂。叶3～5枚，生于茎上部节上。二列，长圆状批针形，纸质，长3～4（～7）cm，宽0.91.1（1.5）cm.先端钝且多稍钩转。花序生于无叶的茎上部节上，花序轴稍弯曲，长24cm具2～3花：花直径1.5～2cm，萼片花瓣淡黄绿色或白色，唇瓣白色而在上部具1枚紫红色大斑块，下部两侧具紫红色条纹，中萼片与花瓣相似，长圆状披针形，长1.7～1.9cm，宽0.4～0.5cm；萼囊圆锥形，长0.5cm，唇瓣卵状披针形，长1.6cm。不明显3裂或不裂；唇盘上密被乳突状短柔毛，基部有1枚黄绿色眠体。花期36月。
5.3铜皮石斛（DendrobiumcrispulumKimuraetMigo）茎多直立，圆柱形，灰绿色、紫绿色或紫红色，通常长25～40cm，粗0.3～0.5cm。近基部稍纤细，具多节，被膜质鞘。叶披针形，长4～6cm，宽0.7~0.9cm。先端钝且稍不等侧2裂。花序生于无叶茎的节上，通常具2花，花苞片膜质，浅白色带赤褐色斑痕，花白色至淡黄色，萼片与花瓣披针形至狭卵状披针形，长1.5～1.7（~2.5）cm，宽0.3～0.4（0.9）cm：萼囊圆锥形，长4～5cm：唇瓣卵状披针形，长1.4～2.5cm，不明显3裂，中裂片卵状长圆形，先端急尖至渐尖，无毛，密布短柔毛，基部常具1枚椭圆形肼抵体，唇盘在两侧裂片之间近中裂片基部常具1个紫红色、淡褐色或淡黄色斑块。花期3～5月。
6要求
6.1等级标准
各品种商品分级标准见表1
表1等级技术要求
足干，螺旋形紧贴，2一4个旋纹，身幼细结实，全部具有“龙头凤尾”，金黄色，无杂质，无霉，不捶破，表面光滑，无叶鞘。
足干，螺旋形紧贴，2一4个旋纹，身幼细结实，金黄色。无杂质，无霉，不捶破，表面光滑，无叶鞘。
足干，螺旋形紧贴，2一4个旋纹，身幼细结实，金黄色，无杂质，无霉。不捶破，表面光滑，无叶鞘。
足干，螺旋形紧贴，2一4个螺纹，质地结实，暗金黄色，无杂质，无霉，不捶破。足干，螺旋形紧贴，3一5个旋纹，质地结实，暗金黄色，无杂质，无霉，不捶破。规格
条长2.8cm以内，直径0.25cm以内。条长2.8cm以内，直径0.30cm以内。条长3.0cm以内，直径0.35cm以内。条长3.5cm以内，直径0.4cm以内。条长4cm以内，直径0.4cm以内。续表1
2理化指标
理化指标见表2
总生物碱
黄曲霉毒素B
六六六
试验方法
7.1等级标准检验
足干，螺旋紧贴，2一4个旋纹，质地结实，无杂质，无霉，不捶破，黄绿色或金黄色，表面光滑。
足干，螺旋形紧贴，3一5个旋纹，质地结实，无杂质，无霉，不捶破，黄绿色或金黄色，表面光滑。
理化指标
DB34/T4862004
条长3.5cm以内，直径0.4cm以内。条长4cm以内，直径0.4cm以内。指标
≤13%
霍山米斛
霍山铁皮石斛
霍山铜皮石斛
霍山米斛
霍山铁皮石斛
霍山铜皮石斛
感观用感官检查，规格用游标卡尺测量。7.2理化指标测定
7.2.1水分
≤5.0mg/kg
≤0.3mg/kg
≤2.0mg/kg
≤0.2mg/kg
≤5μg/kg
≤0.1mg/kg
≤0.1mg/kg
按《中国药典》2000年版一部附录IXH水分测定法的规定执行。7.2.2多糖含量的测定
按附录A规定执行。
7.2.3总生物碱含量的测定
按附录B规定执行。
7.2.4铅的测定
按GB/T5009.12的规定执行。
7.2.5镐的测定
按GB/T5009.15的规定执行。
7.2.6砷的测定
≥17.00%
≥0.025%
≥0.050%
≥0.025%
DB34/T4862004
按GB/T5009.11的规定执行。
7.2.7汞的测定
按GB/T5009.17的规定执行。
7.2.8黄曲霉毒素B1的测定
按GB/T5009.22的规定执行。
7.2.9六六六、DDT的测定
按GB/T5009.19的规定执行。
3检验规则下载标准就来标准下载网
8.1抽样
按《中国药典》2000年版一部附录IIA药材抽样方法规定进行。8.2判定
8.2.1理化指标任一项不符合本标准要求判为不合格，8.2.2感观和规格两项指标中以最低一项指标判定等级。9包装、标志、运输、购存
9.1包装
预包装的容器（箱、袋）要求大小一致，整洁、干燥、牢固、符合包装卫生标准的包装材料。9.2标志
每件包装上应标明品名、产地、包装日期、执行标准号、等级、重量（毛重、净含量）、生产单位或供货单位。
9.3运输
9.3.1运输工具应清洁、卫生、无毒、无污染、9.3.2运输时应防潮、防暴晒、防污染，9.4购存
9.4.1贮存场所应通风、干燥、避光、无污染、防蛀。9.4.2按等级、规格分别贮存。
1仪器
分光光度计
2试剂
葡聚糖标准品
无水乙醇
香草醛-冰乙酸
高氯酸
乙酸乙酯
3方法
3.1制作标准曲线
附录A
（规范性附录）
石斛多糖含量的测定方法
DB34/T486-2004
准确称取标准葡聚糖20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml、1.6ml及1.8ml，各以蒸馏水补至2.0ml然后加入6%苯酚1.0ml以及浓硫酸5.0ml，静置10分钟，摇匀，室温放置20分钟后，于490mm测光密度。用2.0ml水按同样显色操作为空白，以横坐标为多糖为微克数，纵坐标为吸光度值，得标准曲线。3.2样品多糖含量测定
精确称取石斛粗粉（60目）50g，加三倍体积蒸馏水，80℃提取2小时，重复二次，合并三次提取离心上清夜，旋转蒸发浓缩至一定体积，流水透析过夜后，继续用蒸馏水透析2小时，取5ml透析液，定容至250ml，测定时吸取该液0.3ml、0.5ml、1.0ml。按上述步骤操作，测定吸光度，以标准曲线计算多糖含量。
4计算
按下式计算样品中多糖含量：
样品多糖含量（%）三
AXVX250
VX100X50
A—标准曲线对应的多糖含量
Vi—吸取样液体积
V2—透析后实际体积
DB34/T4862004
1仪器
分光光度计
2试剂
附录B
（规范性附录）
石斛总生物碱含量的测定方法
pH4.5缓冲液：0.2mol/L、pH=4的邻苯二甲酸氢钾，用0.2mol/L调至Ph=4.50.04%溴甲酚氯溶液：溴甲酚氯40.0mg，加100mlpH4.5缓冲液，过滤。氢氧化钠
无水乙醇
石斛碱对照品（分析纯）
其他试剂为分析纯
3方法
3.1标准曲线的制备
精称石碱对照品1mg，置100ml容量瓶，加氯仿至刻度。精取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml分别置于分液漏斗中，用氯仿稀释至10.0ml，加入Ph4.5缓冲液5.0ml和0.04%溴甲酚氯溶液2.0ml，剧烈振摇3分钟，静置30分钟，氯仿层通过经氯仿浸泡处理并干燥的药棉滤过。取续滤液5.0ml，加0.01mol/L氢氧化钠无水乙醇溶液1.0ml，摇勾。以氯仿10.0ml，同法操作，作为空白对照，于620nm处测得吸光度。
3.2样品的测定
精取石斛粗粉0.5g，用适量氨水湿润，密封放置30分钟，精密加入氯仿10.0ml，置水浴上加热回流2小时，冷却后称重，补足失重，过滤。精去续滤液2.0ml于分液漏斗中，加氯仿液8.0ml（稀释5倍），作为样品液。将样品液按标准曲线项同法操作。同时精密量取石斛碱对照品溶液2.0ml置分液漏斗中，同法操作，测得吸光度，计算总生物碱含量。4 计算
按下式计算样品总生物碱含量：总生物碱含量（%）=
AX5X10X10
A—标准曲线对应的石斛碱含量
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霍山石斛
2004-11-09发布
方标准
DB34/T4862004
2004-11-09实施
安徽省质量技术监督局发布
1范围
2规范性引用文件
3产地范围
4定义
5原植物形态
6要求
7试验方法
8检验规则
9包装、标志、运输、贮存
+++..++..+++..++.
（规范性附录）石斛多糖含量的测定方法.（规范性附录）
石斛总生物碱含量的测定方法
DB34/T4862004
DB34/T4862004
本标准是对霍山石斛生产销售使用进行分析研究的基础上，总结多年实践经验，按照GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分；标准的结构和编写规则》的规定，参照《中国药典》2000年版一部，并根据实际情况编制的。
本标准由安徽国家农业标准化与监测中心提出本标准起草单位：安徽国家农业标准化与监测中心本标准主要起草人：耿天霖、昊南侠、陈萍、丁昌东、程禹
本标准于2004年11月9日首次发布，I
1范围
霍山石斛
DB34/T486-2004
本标准规定了霍山石斛的产地、定义、形态、要求、试验方法、检验规则、及包装标志、运输、赔存。
本标准适用于采收期为三年以上崔山石于品规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T5009.11
GB/T5009.12
GB/T5009.15
GB/T5009.17
GB/T5009.22
GB/T5009.19
食品中总砷的测定方法
食品中总铅的测定方法
食品中总镉的测定方法
食品中总汞的测定方法
食品中黄曲霉毒素B,的测定方法食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法《中国药典》2000年版一部
《中国药典》2000年版一部
3产地范围
附录IA药材取样法
附录IXH水分测定法
本标准所指霍山石斛为安徽省霍山县境内所产石斛。4定义
霍山石斛
本标准霍山石斛指著名道地产区安徽省霍山县所产三种石斛：霍山米斛（DendrobiumhuoshanenseC.Z.TangetS.J.Cheng）、霍山铁皮石（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）、霍山铜皮石斛（DendrobiumcrispulumKimura etMigo)。
龙头凤尾
石斛剪去部分须根经揉制、整形、烘烤等加工，制成螺旋形金黄色的商品，茎基残留短须根习称龙头，茎末保留顶梢较细习称凤尾。4.3足干
指经过加工干燥含水量达到标准。5原植物形态
5.1霍山米（DendrobiumhuoshanenseC.Z.TangetS.J.Cheng）茎丛生，直立，肉质状，长3～9cm，从下部向上逐渐变细，下部直径0.25～0.3cm或更宽，具3～7节，淡黄绿色，有时带淡紫红色斑点。叶薄革质，2～3片互生于茎的上部，舌状长圆形，长通常23cm，宽0.5～0.7cm，端钝并且微凹。总状花序出自于已经落了叶的茎上部：花苞片浅白色带栗色，卵形，1
DB34/T4862004
长约0.3cm；花黄绿色，稍有香气，中萼片卵状披针形，长1.2～1.4cm，宽0.4~0.5cm，端钝；侧萼片镰刀状披针形，长1.2～1.4cm，基部宽0.5～0.7cm，端钝：萼囊短钝而近圆形：花瓣卵状长圆形，与中萼片等长而稍宽，端钝：唇瓣近阔菱形，长宽约相等，1～1.5cm，基部楔形并且具一个肼抵体，上部稍3裂，侧裂片近半卵形，两侧裂片之间密生短毛：中裂片半周状三角形，基部密生长白毛，并且具个椭圆形横向的黄色斑块，端近尖：蕊柱足密生长白毛：药帽绿白色，近半球形，顶端微凹。花期5月。
5.2铁皮石（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）茎直立，圆柱形，通常长20~35cm，粗0.2～0.4cm.幼嫩茎长5～7cm，肥壮饱满，可粗达0.9cm。长茎着花时略弯垂。叶3～5枚，生于茎上部节上。二列，长圆状批针形，纸质，长3～4（～7）cm，宽0.91.1（1.5）cm.先端钝且多稍钩转。花序生于无叶的茎上部节上，花序轴稍弯曲，长24cm具2～3花：花直径1.5～2cm，萼片花瓣淡黄绿色或白色，唇瓣白色而在上部具1枚紫红色大斑块，下部两侧具紫红色条纹，中萼片与花瓣相似，长圆状披针形，长1.7～1.9cm，宽0.4～0.5cm；萼囊圆锥形，长0.5cm，唇瓣卵状披针形，长1.6cm。不明显3裂或不裂；唇盘上密被乳突状短柔毛，基部有1枚黄绿色眠体。花期36月。
5.3铜皮石斛（DendrobiumcrispulumKimuraetMigo）茎多直立，圆柱形，灰绿色、紫绿色或紫红色，通常长25～40cm，粗0.3～0.5cm。近基部稍纤细，具多节，被膜质鞘。叶披针形，长4～6cm，宽0.7~0.9cm。先端钝且稍不等侧2裂。花序生于无叶茎的节上，通常具2花，花苞片膜质，浅白色带赤褐色斑痕，花白色至淡黄色，萼片与花瓣披针形至狭卵状披针形，长1.5～1.7（~2.5）cm，宽0.3～0.4（0.9）cm：萼囊圆锥形，长4～5cm：唇瓣卵状披针形，长1.4～2.5cm，不明显3裂，中裂片卵状长圆形，先端急尖至渐尖，无毛，密布短柔毛，基部常具1枚椭圆形肼抵体，唇盘在两侧裂片之间近中裂片基部常具1个紫红色、淡褐色或淡黄色斑块。花期3～5月。
6要求
6.1等级标准
各品种商品分级标准见表1
表1等级技术要求
足干，螺旋形紧贴，2一4个旋纹，身幼细结实，全部具有“龙头凤尾”，金黄色，无杂质，无霉，不捶破，表面光滑，无叶鞘。
足干，螺旋形紧贴，2一4个旋纹，身幼细结实，金黄色。无杂质，无霉，不捶破，表面光滑，无叶鞘。
足干，螺旋形紧贴，2一4个旋纹，身幼细结实，金黄色，无杂质，无霉。不捶破，表面光滑，无叶鞘。
足干，螺旋形紧贴，2一4个螺纹，质地结实，暗金黄色，无杂质，无霉，不捶破。足干，螺旋形紧贴，3一5个旋纹，质地结实，暗金黄色，无杂质，无霉，不捶破。规格
条长2.8cm以内，直径0.25cm以内。条长2.8cm以内，直径0.30cm以内。条长3.0cm以内，直径0.35cm以内。条长3.5cm以内，直径0.4cm以内。条长4cm以内，直径0.4cm以内。续表1
2理化指标
理化指标见表2
总生物碱
黄曲霉毒素B
六六六
试验方法
7.1等级标准检验
足干，螺旋紧贴，2一4个旋纹，质地结实，无杂质，无霉，不捶破，黄绿色或金黄色，表面光滑。
足干，螺旋形紧贴，3一5个旋纹，质地结实，无杂质，无霉，不捶破，黄绿色或金黄色，表面光滑。
理化指标
DB34/T4862004
条长3.5cm以内，直径0.4cm以内。条长4cm以内，直径0.4cm以内。指标
≤13%
霍山米斛
霍山铁皮石斛
霍山铜皮石斛
霍山米斛
霍山铁皮石斛
霍山铜皮石斛
感观用感官检查，规格用游标卡尺测量。7.2理化指标测定
7.2.1水分
≤5.0mg/kg
≤0.3mg/kg
≤2.0mg/kg
≤0.2mg/kg
≤5μg/kg
≤0.1mg/kg
≤0.1mg/kg
按《中国药典》2000年版一部附录IXH水分测定法的规定执行。7.2.2多糖含量的测定
按附录A规定执行。
7.2.3总生物碱含量的测定
按附录B规定执行。
7.2.4铅的测定
按GB/T5009.12的规定执行。
7.2.5镐的测定
按GB/T5009.15的规定执行。
7.2.6砷的测定
≥17.00%
≥0.025%
≥0.050%
≥0.025%
DB34/T4862004
按GB/T5009.11的规定执行。
7.2.7汞的测定
按GB/T5009.17的规定执行。
7.2.8黄曲霉毒素B1的测定
按GB/T5009.22的规定执行。
7.2.9六六六、DDT的测定
按GB/T5009.19的规定执行。
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8.1抽样
按《中国药典》2000年版一部附录IIA药材抽样方法规定进行。8.2判定
8.2.1理化指标任一项不符合本标准要求判为不合格，8.2.2感观和规格两项指标中以最低一项指标判定等级。9包装、标志、运输、购存
9.1包装
预包装的容器（箱、袋）要求大小一致，整洁、干燥、牢固、符合包装卫生标准的包装材料。9.2标志
每件包装上应标明品名、产地、包装日期、执行标准号、等级、重量（毛重、净含量）、生产单位或供货单位。
9.3运输
9.3.1运输工具应清洁、卫生、无毒、无污染、9.3.2运输时应防潮、防暴晒、防污染，9.4购存
9.4.1贮存场所应通风、干燥、避光、无污染、防蛀。9.4.2按等级、规格分别贮存。
1仪器
分光光度计
2试剂
葡聚糖标准品
无水乙醇
香草醛-冰乙酸
高氯酸
乙酸乙酯
3方法
3.1制作标准曲线
附录A
（规范性附录）
石斛多糖含量的测定方法
DB34/T486-2004
准确称取标准葡聚糖20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml、1.6ml及1.8ml，各以蒸馏水补至2.0ml然后加入6%苯酚1.0ml以及浓硫酸5.0ml，静置10分钟，摇匀，室温放置20分钟后，于490mm测光密度。用2.0ml水按同样显色操作为空白，以横坐标为多糖为微克数，纵坐标为吸光度值，得标准曲线。3.2样品多糖含量测定
精确称取石斛粗粉（60目）50g，加三倍体积蒸馏水，80℃提取2小时，重复二次，合并三次提取离心上清夜，旋转蒸发浓缩至一定体积，流水透析过夜后，继续用蒸馏水透析2小时，取5ml透析液，定容至250ml，测定时吸取该液0.3ml、0.5ml、1.0ml。按上述步骤操作，测定吸光度，以标准曲线计算多糖含量。
4计算
按下式计算样品中多糖含量：
样品多糖含量（%）三
AXVX250
VX100X50
A—标准曲线对应的多糖含量
Vi—吸取样液体积
V2—透析后实际体积
DB34/T4862004
1仪器
分光光度计
2试剂
附录B
（规范性附录）
石斛总生物碱含量的测定方法
pH4.5缓冲液：0.2mol/L、pH=4的邻苯二甲酸氢钾，用0.2mol/L调至Ph=4.50.04%溴甲酚氯溶液：溴甲酚氯40.0mg，加100mlpH4.5缓冲液，过滤。氢氧化钠
无水乙醇
石斛碱对照品（分析纯）
其他试剂为分析纯
3方法
3.1标准曲线的制备
精称石碱对照品1mg，置100ml容量瓶，加氯仿至刻度。精取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml分别置于分液漏斗中，用氯仿稀释至10.0ml，加入Ph4.5缓冲液5.0ml和0.04%溴甲酚氯溶液2.0ml，剧烈振摇3分钟，静置30分钟，氯仿层通过经氯仿浸泡处理并干燥的药棉滤过。取续滤液5.0ml，加0.01mol/L氢氧化钠无水乙醇溶液1.0ml，摇勾。以氯仿10.0ml，同法操作，作为空白对照，于620nm处测得吸光度。
3.2样品的测定
精取石斛粗粉0.5g，用适量氨水湿润，密封放置30分钟，精密加入氯仿10.0ml，置水浴上加热回流2小时，冷却后称重，补足失重，过滤。精去续滤液2.0ml于分液漏斗中，加氯仿液8.0ml（稀释5倍），作为样品液。将样品液按标准曲线项同法操作。同时精密量取石斛碱对照品溶液2.0ml置分液漏斗中，同法操作，测得吸光度，计算总生物碱含量。4 计算
按下式计算样品总生物碱含量：总生物碱含量（%）=
AX5X10X10
A—标准曲线对应的石斛碱含量
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