NY/T 2060.4-2011 辣椒抗病性鉴定技术规程 第4部分:辣椒抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程 NY/T2060.4-2011 标准压缩包解压密码：www.bzxz.net

ICS 65.020
中华人民共和国农业行业标准
NY/T2060.4—2011
辣椒抗病性鉴定技术规程
第4部分：辣椒抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程
Rules for evaluation of pepper for resistance to diseases-Part 4: Rule for evaluation of pepper for resistance tocucumber mosaic virus
2011-09-01发布
2011-12-01实施
中华人民共和国农业部发布
NY/T2060《辣椒抗病性鉴定技术规程》分为5个部分：第！部分：辣搬抗疫病鉴定技术规程；第2部分：辣椒抗消枯病鉴定技术规程；第3部分：辣椒抗烟草花川病毒病鉴定技术规程第部分：辣概抗黄瓜花叶病毒病鉴定疲术规程；-一-第5部分：辣椒抗南方根结线虫病鉴定技术规程。本部分为NY/T2060的第4部分
本部分按照（GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分出中华人民共和国农业部种植业管理司提出。本部分出全国巅莱标准化技术委员会（SAC/T℃C467)叫，本部分起草单位：中国农业科学院跳菜花卉研究所，本部分主要起节人：杨宁红、谢内炎，冯兰香、杨翠、龚慧芝、范振川、陈闽华。NY/T2060.4—2011
1范围
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第4部分：辣椒抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程本部分规定了辣龈抗黄瓜花叶病毒病鉴定的术语和楚义，接种休制备、室内抗性鉴定，病情调杏，抗病性评价以技鉴定记载表格。
本部分适用于各种辣椒（CapsicunannumL）资源对疫病抗性的室内鉴定及评价.2术语和定义
VY/T1857.7-2010界定的以及下列术语和定义适用于本文件。2.1
辣椒CMV病毒病cucuhermosaicvirus onpeppers由黄瓜花叶病毒（CucurnbermosaieCucurnovirus,CMV）引起的病株呈现系统花叶，病叶牵小，增厚，卷再，畸形，易脱落；有些品种叶片有大型黄绿色环斑或檬叶癌状。病果有浅黄色至黄褐色环纹斑块、果少且小,畸形。重病株黄绿色、节间缩短、枝条丛生、严重时矮化是从簇状等症状的辣搬病毒病3黄瓜花叶病毒接种体制备
3.1病原物分离
从发病植株的典型病叶上以常规汁液摩擦法分离黄瓜花叶病毒病病原物。分离物经血清学、寄主范围、枯斑寄主，理化性状及传播方式测定，电子显微镜观察病毒粒子形态等方法鉴定确认为黄瓜花叶病毒（Cucumbcrmosaicvirus)后，再进行分离物纯化和致病性测定，保存备用，3.2株系鉴定
对川于抗病性鉴定接种的病毒分离物芦先进行株系鉴定。鉴定方法参照A.2.3.3接种体殖和保存
3.3.1接种体繁殖
取少量黄瓜花叶病毒供试株系的鲜病叶摩擦接种在枯斑三生烟（Nicotianatabacumcvs.SamsunNN)或珊西 NC:烟(N. t.vs.Xanthi N)上,置防虫温室内,在26℃～28℃条件卜培育 7d10 d后采收病叶。
3.3.2接种体保存
接种体可常年保存在防虫温室内的枯斑生炳或珊叫烟上，或将鲜病叶制作成冻1叶保存在一20℃以下的冰箱内，
冻干叶的简易制作法：将鲜病叶剪成小块，在吸水纸上哟勾地铺放一层，可照此连续铺放数层，但各层吸水纸之间必须用硅胶或氯化钙隔川，然后置于密封的容器里，再将容器置于1冰箱。头两天每天史换一次卡燥剂，以后每两天史换一次，直到碎病叶彻底干燥，整个制作过程应防止其独病毒的污染。4室内抗性鉴定
4.1鉴定室
苗期人工接种鉴定室巡常是可调节温度和北照的防出光温室，使之具备良好的发病坏境。1
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4.2鉴定设计
鉴定材料随机排列或顺序排列.每份鉴定材料通复3次，每一重复1株苗。4.3鉴定对照材料
设茄门甜为感病对照：前尚未发现理想的抗病对照辣椒，巾椒6号辣品种比较耐病，可试用，4.4鉴定材料育苗
鉴定种子在10%磷酸二钠溶液中浸泡15min清水冲洗后置于温培养箱中28℃催芽，播种于育南钵内，脊萨基质为炭，蛭有和菜口（2：1：1），基质经高溢蒸汽灭菌（134℃,30min），在日光温室电育苗，室内温度18℃~25℃，苗成牛长健壮、一致，4.5接种
4.5.1接种时期
幼尚在1片~-2片真叫期进行接种。4.5.2接种浓度
1g鲜病叶加30ml.的0.03nol/L磷酸盐缓冲液（pH8.0)匀浆，纱布过滤或3000r/min离心15 min，其滤液贼.清液为接种悬浮液。4.5.3接种方法
接种前将番茄幼苗黑暗处理一昼夜，巾在叶面上撒适量600金刚砂，少量鉴定可采用摩擦接种法，即充分洗净的手指蘸取接种悬浮液，在叶面轻度摩擦造成微伤，每株接种第1片～第2片真叶；量鉴定采而喷枪接种法，即喷枪的杯内盛接种浮腋，喷枪咀距叶片约24.5.4接种后的管理
接种关的室内温度为26℃~30℃，以后人温度尽量控制在24%～28℃，夜间不低于20，常规光照，正常裁培管理。
5病情调查
5.1调查时间
第1次接种后约21d进行。
5.2病情级别划分
幼苗病情级别及其相对应的症状描述见表1。表黄瓜花叶病毒引起的辣椒病毒病病情级别的划分病情级别
5.3调查方法
无症状
症状措述
心叶的叶脉为明脉，1片--2片真叶呈现花叶中上部听片轻花叶
多数叶片花啡少数叶H畸形或明鼠皱缩多数叶片重花叶.部分叶片畸形、细长，植株明鼠矮化儿乎所有叶片重花叶，多数叶片崎形、嵌叶。植严亚矮化，共至枯死调查每份鉴定材料接种株发病情况，根据病害症状描述，逐份材料进行调查，记载病情级别，计算出病情指数(DI)。病情指数按式()计算：DI
Z(s×n)
式中：
病情指数；
各病情级别的代表数值；
各病情级别的植株数；
N调查总植株数；
S—-最高病情级别的代表数值。6抗病性评价
6.1抗病性评价标准
依据鉴定材料3次重复的病情指数平均值确定其抗性水平，划分标准见表2。表2辣椒对黄瓜花叶病毒病抗性的评价标准病情指数(DI)
10D-60
6.2鉴定有效性判别
抗性评价
免安Immune(1）
高抗 Highly resistant(IIR)
抗病Resistam(R)
抗Moderntelyresistant(MR)
感病Susceptible(S)
高感 IIighly suscuptibl(HS)
平感病对照材料达到其应感病程度（DI40），该批次鉴定视为有效。鉴定记载表格
辣椒抗黄瓜花叶病毒病鉴定结果记载表格见表3表3辣椒抗黄瓜花叶病毒病鉴定结果记载表编
品种/种质
播种口期
接种小有期
株系类型
重复区号
接种H期
病情级别
接种病原膜分离物编号
谢查口期
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鉴定技术负责人（签字）：
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A.1学名
附录A
【资料性附录】
辣椒上黄瓜花叶病毒病病原和株系黄瓜花叶病莓，学名Cucumbermosaic virus，缩写CMV2理化特性
病毒粒了球状，直径30nm，分「量5.0×105-~6.7X10*，沉淀系数86S，等电点pH7.0。核酸含量18%，单链RNA其四个分的分子量分别为1.16×10°1.05×10°，0.8×10°，0.39×10°。外壳蛋分子量为 24 500,由 287 个氨基酸组或,其组分:Ala 6、Arg 8.4.As [0. 4、Cys 1 0、(lu 7. 1,Gly 5. 6,ITis 1. 4,Ile: 5. 5,L.cu 9. 2,Lys 6. 3,Met 2. 7,Phe 2. 5,Pro 6, 4,Ser 1l. 1, Thr 6. 1, Trp 0, Tyr 3. 8, Val7.6。病钝化温度55℃~60℃,稀释限点10~10，室温下体外保毒期3d~5l。4
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