QB/T 4483-2013
基本信息
标准号:
QB/T 4483-2013
中文名称:木聚糖酶制剂
标准类别:轻工行业标准(QB)
标准状态:现行
出版语种:简体中文
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相关标签:
聚糖
酶制剂
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
QB/T 4483-2013 木聚糖酶制剂
QB/T4483-2013
标准压缩包解压密码:www.bzxz.net
标准内容
ICS67.180.20
分类号:X69
备案号:41609-2013
中华人民共和国轻工行业标准
QB/T4483-2013
木聚糖酶制剂
Xylanasepreparations
2013-07-22发布
2013-12-01实施
中华人民共和国工业和信息化部发布前言
本标准按用照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出,QB/T4483—2013
本标准由全国食品工业标准化技术委员会(SAC/TC64)归口。本标准主要起草单位:武汉新华扬生物股份有限公司、白银赛诺生物科技有限公司、青岛蔚蓝生物集团有限公司、山东龙力生物科技股份有限公司、湖南鸿鹰翔生物工程股份有限公司、山东隆大生物工程有限公司、大连工业大学、合肥学院、中国生物发酵产业协会。本标准主要起草人:杜军、李晓燕、詹连生、俞峰、陈亮珍、马俊杰、樊淳红、钱娟娟、李宪臻、张洁、刘捷、王永兰。
1范围
木聚糖酶制剂
QB/T4483-2013
本标准规定了木聚糖酶制剂的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则及标志、包装、运输,贮存。
本标准适用于经微生物液体深层发酵、提纯制得的工业用木聚糖酶制剂的生产、检验和销售。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志(GB/T191-2008,ISO780:1997,MOD)GB5009.3-2010食品安全国家标准食品中水分的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-2008ISO3696:1987,MOD)GB7718食品安全国家标准预包装食品标签通则GB25594 食品安全国家标准 食品工业用酶制剂GB/T23527蛋白酶制剂
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
xylanase
木聚糖酶
能破坏植物的纤维组织,将木聚糖分解成木糖的酶3.2
木聚糖酶活力activityofxylanase一定时间内,催化木聚糖溶液降解释放还原糖的能力。注:1g固体酶(或1mL液体酶),于50C、一定pH条件下(酸性木聚糖酶制剂pH为4.8:中性木紧糖酶制剂pH为6.0:碱性木聚糖酶制剂pH为9.0),1min从浓魔Smg/mL木聚糖溶液中,降解释放1μmol还原糖,即为一个酶活力单位,以“u/g(u/mL)”表示。
4产品分类
4.1按产品形态分为固体剂型和液体剂型。4.2按产品等级分为优等品和一等品。4. 3按产品的作用(pH范围)分为酸性木聚糖酶制剂、中性木聚糖酶制剂和碱性木聚糖酶制剂。5要求
5.1感官要求
固体剂型:粉状、微囊状或颗粒状,粒度均匀,色泽一致,无惩变、潮解、结块现象,有特殊发酵气味,无异味。
液体剂型:淡黄色至深褐色液体,可有少量凝聚物,有特殊发醇气味,无异味。5.2理化要求
应符合表1的规定。
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酶活力·/wg(或u/mL)
干燥失重/%
细度(40自标准端通连率)
可接供器
一如有特要求,
53卫生要求
优等品应行合GB25
试验方法
本标准所用试剂和水
6.1感官
称取样品10g(或10
6.2酶活力
定的醇活力规格执行
用分析线
体制型
中规定的
酸性木聚糖酶制剂、中性木聚糖酶制剂和碱性木聚糖酶制剂分别按阴录A、附录B方法进行测定
63干燥失重
按GB5009.3-2010中第一法进行测定6.4细度
按GB/T23527规定的方法进
检验规则
批次的确定
以同一次投
7.2取样规则
7.21取样应
72.2取样
检验的取样
7.23成品
相关方确定
现格,同一品种的均一质量的产品为生整个灌装过程中,或均匀分布于灌装后的宣的方法保征取样具有代表性,保证取样部位制型
一等品
RC规定的
洁。对用干微生物
菌操作。
主量见表2.取样的样本量可按服估计的批量参照表不应小于30ng(或300mL)不足接照比例适表2成品抽样的样本
由生产企业和(或)
执·城
注:批量是指批中所包合的单位商品数,单位为桶或箱,样本最是指杆本中所包香的样本单位数,单位为精成袋。7.3出厂检验
7.3.1每批产品应经
部门检验合格
培格让
7.3.2出厂检验项目为:
感官、酶活力、干燥失
7.4型式检验
7.41下列情况之一时
a)正常生产半年
b)停产3个月以
G)主要原料及工艺
d)国家质量监督机
e)出厂检验结果点
7.4.2型式检验的检验
7.5判定规则
7.5.1标志标签,包装
感官,理化有
7.5.3卫生有1项不合
标志,包装、运输
型式检验
变时:
出或客户要求时:
检验结果有较大差,
本标准的全部技术享
可整改后复验
可加信电样进行堡
可出厂
结果为准
给用准
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8.1标志
8.1.1产品的包装上应粘贴有牢固的标签,标签内容应包括:产品名称,产地、厂名、生产日期、批号及保质期等。优等品应符合GB7718的要求8.1.2包装储运图示标志按GB/T191执行8.2包装
产品的内包装和(或)包#
应的食品包装用/食品容服
8.3运输
产品运输过程bZxz.net
施,搬运、装卸
8.4购存
产品含
存:防受热
精品产品
降有害及其他污染物品混贮,运输工专清洁。干燥,韧质,光线,温度,湿度易引起失活,应手干燥、通风
(醇活力)
免用特合相
、防晒设
避光处临
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A1原理
附录A
(规范性附录)
中性木聚糖酶制剂活力的测定
木聚糖酶能将木聚糖降解成嘉糖和单糖。还原性寡糖和单糖在沸水浴条件下可与3.5-二硝基水杨酸DNS)试剂发生显色反应。反应液颜色的强度与酶解产生的还原糖量成正比,而还原糖的生成量又与反应液中木聚糖酶的活力成正比。因此,通过分光比色测定反应液颜色的强度,可计算反应液中木聚糖酶的活力。
A2试剂与溶液
除特殊说明外,所用的试剂均为分析纯,水均为符合GB/T6682中规定的二级水。A.2.1柠檬酸溶液(浓度为005mol/L)称取一水柠檬酸1.06g溶于80mL水中,搅拌,用水定容至100mLA.2.2磷酸氢二钠溶液(浓度为0.1mol/L)称取磷酸氢二钠l42g,溶于80mL水中,搅拌,用水定容至100mLA.2.3磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液pH为6.0)称取一水柠檬酸7.75g:无水磷酸氢二销17.93g:再加水溶解,定容至2000mL,测定其pH。如果PH偏离6.0,再用柠檬酸溶液(A.2.1)或磷酸氧二钠溶液(A.2.2)调节至6.0A2.4氢氧化钠溶液(浓度为200g/L)称取氢氧化钠20.0g:加水溶解,定容至100mLA2.5木糖溶液(C,H0g)(浓度为10.0mg/mL)称取无水木糖1g(精确至0.0001g),加磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(A.2.3)溶解,定容至100mL。A2.6木聚糖溶液(浓度为10mg/mL)称取木聚糖(SigmaX0627)1.00g,加入0.32g氢氧化销,再加入90mL水,磁力搅拌,同时缓慢加热(25min),直至木聚糖完全溶解。然后停止加热,继续搅拌30min至室温,测定其pH。如果pH为6.0,用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液(A.2.3)定容至100mL,如果pH偏高6.0,再用柠檬酸溶液(A.2.1)或磷酸氧二钠溶液(A.2.2)调节至6.0,然后再用磷酸氢二钙-柠檬橡酸缓冲溶液(A.2.3)定容至100mL。使用前适当摇匀。4C避光保存,有效期为12h。A.2.7DNS试剂
称取3.5-二硝基水杨酸3.15g,加水500mL。搅拌3s~5s,水浴至45C。然后逐步加入100mL氢氧化钠溶液(A.2.4),同时不断揽拌,直到溶液清激透明,注意:在加入氢氧化钠过程中,溶液温度不应超过48℃。再逐步加入四水酒石钾钠91.0g、苯酚2.50g和无水亚硫酸钠2.50g继续45C水浴加热。同时补加水300mL,不断揽拌,直到加入的物质完全溶解。停止加热,冷却至室温后,用水定容至1000mLl用烧结玻璃过滤器过滤,取滤液,储存在棕色瓶中,避光保存。室温下存放7d后可使用,有效期为60d警告;处理酸碱和配制 DNS 试剂时。应在通风概或通风良好的房间进行,截上保护眼使和乳胶手妻、一旦皮肤或眼睛接触了上述物质,及时用大量的水冲洗.Sigmax0627是商品名,给出这一信息是为了给本标准的使用者一个相对标准。如果其他产品能有相同的效案。则可使用这能筛效的产品
A.3仪器与设备
分析天平:感量0.0001g:
PH计:精确至0.01:
磁力搅拌器:附加热功能:
电磁振荡器:
烧结玻璃过滤器:孔径为0.45μm离心机:最大离心加速度不小于2000×g:温度计:精度0.1C:
恒温水浴锅:温度控制范围在30℃~80℃之间,精度为0.1℃:秒表:每h误差不超过5S:
分光光度计:能检测350nm~800mm的吸光度范围:移液器:精度为1山
A.4绘制标准曲线
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A.4.1吸取磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液CA2.3)2.0mL,加入DNS试剂(A.2.7)2.5mL,沸水浴加热5min用自来水冷却至室温,用水定容至12.5mL,制成标准空白样。A.4.2分别吸取木糖溶液(A.2.6)1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL和7.00mL分别用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(A.2.3)定容至100mL,配制成浓度为0.10mg/mL、0.2mg/mL0.30mg/mL0.40mg/mL、0.50mg/mL、0.60mg/mL和0.70mg/mL的木糖标准溶液。A.4.3分别吸取上述浓度系列的木糖标准溶液各1.00mL(做两个平行),分别加入到刻度试管中,再分别加入1mL水和2.5mLDNS试剂(A.2.7)。电磁振荡3s,沸水浴加热5min。然后用自来水冷却到室温,再用水定容至12.5mL。以标准空白样为对照调零,在540nm处测定吸光度OD值。A.4.4以木糖浓度为y轴、吸光度OD值为x轴,绘制标准曲线。每次新配制DNS试剂均需要重新绘制标准曲线。
A.5反应用酶液的制备
A.5.1固体样品的反应用酶液制备称取试样两份,精确至0.0001g加入100mL磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液(A.2.3),搅拌30min,再用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液(A.2.3)做二次稀释(稀释后的待测酶液中木聚糖酶制剂活力应控制在0.05wmL~0.09u/mL之间)。
A.5.2液体样品的反应用酶液制备液体试样可直接用磷酸氢二钠-片模酸缓冲溶液(A.2.3)进行稀释、定容(稀释后的酶液中木聚糖酶制剂活力宜控制在0.05/mL~0.0%w/mL之间).如果稀释后酶液的pH偏离6.0.需用柠模酸溶液(A.2.1))或磷酸氢二钠溶液(A.2.2)调节至6.0,然后再用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液(A.2.3)做适当定容。A.6测定步骤
吸取10mL木聚糖溶液(A.2.6),50C水浴保温平衡5min吸取10mL经过适当稀释的醒液(A.5.1或A.5.2),50C水浴保温平衡5min。吸取1.0mL经过适当稀释的酶液(已经过50C平衡),加入到刺度试管中,再加入2.5mLDNS试剂CA2.7),电磁振荡35。然后加入1.0mL木聚精溶液(已经过50C平衡),50C保温30min后取出,QB/T4483-2013
沸水浴加热5min
空白对照,在540mm
吸取1.00mL经过适
(已经过50C平衡)
3s,以终止酶解反应。
标准空白样(A.4.1)为
A7结果计算
稀释的酶液(已经过50
蓝摄荡3s#50C精确保温
盟热:min,
用自来水酒
在540nm处测定吸
试样稀释液中的木商耐割
式中:
试样稀释
酶反应液
酶空白样
标准曲线
活力按公式CA.1)
(-4)x
唐酶制剂活力,u/g
标准曲线的做典
木糖的摩尔质量,M(C.HoO)=150.2g/mol:降解反应时间,单位为分钟(min):转化因子,1mmol=1000umol。
加入到刻度试管
加入2.5mLDNS试,
:加水定容至12.5
空白样(A5.1)为
1.0mL木聚糖
,电磁报荡
摄满荡3s。以
.....CA.)
Xp值应控制在0.05u/g~0.09u/g(或wmL)之间如果不在这个范国内,应重新选书液的稀释
度,再进行分析测定
校正后试样稀释液中的木形
(A2)
所得结果
AB允许差
择液中的本聚糖酶制剂活力,wg(或择倍数
的定结果的策术平均值为准。平行测定结果的绝对实验结单社中#
美值不蹈过8%
除下述与“附录A”
布通果
B.1试剂与溶液
除特殊说明外,所用
B.1.1乙酸溶液C浓度
吸取冰乙度0.6mL,
B.12乙酸钠溶液(浓压
称取三水酸钠136
B.1.3乙酸钠乙酸缓冲
称取三水乙酸销8.02
C观英性带
酸性木聚糖酶利们活为的
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吸计算方法等同“附策A
有所改动外,其他者作零情
5682中规定的二级才
为分析纯,水均为符
定容至100mL
mL水中,搅择,用
务1饼
离4.8,再用乙酸落液B
B.1.4木糖溶液(CHOs)(浓度为10.0mg/mL)100mL
如果pH偏
称取无水大糖Yg(精确至0.0001g),加乙酸钠-乙酸缓冲液(B.1.3)溶解,定容至B.1.5木聚糖滴(浓度为10m/ml)mL
称取木聚糖(SigmaX0627)1.00g,加入0.32g氢氧化钠,再加入90mL水,磁力搅拌,同时缓慢加热(25min),直至木聚糖完全溶解然后停止加热,继续搅拌30min,测定其pH,如果p8.用乙
酸钠-Z酸级冲浴液CB13)定容至10调节至4.8,然后再用乙酸钠
有效期为12h。
饰系扫车容L
藏(B.11)或
当播摇多
光保存
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附录C
(规范性附录)
碱性木聚糖酶制剂活力的测定
除下述与“附录A”在溶液上有所改动外,其他操作步骤及计算方法等同“附录A\。试剂与溶液
除特殊说明外,所用的试剂均为分析纯,水均为符合GB/T6682中规定的二级水。C.1.1甘氨酸溶液(浓度为0.2mo1/)称取甘氨酸1.5g,用水溶解,定容至100mL。C.1.2氢氧化钠溶液(浓度为0.2mol/L)称取氢氧化钠8.0g。加水溶解,定容至1000mL,混匀备用C.1.3甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液(pH为9.0)取44mL氢氧化钠溶液(C.12)和250mL甘氨酸(C.1.1)溶液混合后,用去离子水定容至L,于4℃冰箱内保存备用
C.1.4木糖液(C,HiaO)(浓度为10.0g/mL)称取无水木糖1.000g,加甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(C.1.3)溶解,定容至100mL。C.1.5木聚糖溶液(浓度为10mg/mL)称取木聚糖(SigmaX0627)1.00g,加入0.035g氢氧化钠,再加入70mL水,磁力搅拌,同时缓慢加热(25min),直至木聚糖完全溶解。然后停止加热,继续搅拌30min,测定其pH。如果pH为9.0.用甘氨酸一氢氧化钠缓冲溶液(C.1.3)定容至100mL。如果pH偏离9.0,再用甘氨酸溶液(C.1.1)或氢氧化钠溶液(C.1.2)调节至9.0,然后再用甘氢酸-氢氧化钠缓冲溶液(C.1.3)定容至100mL。使用前适当摇匀。4℃避光保存,有效期为12h。
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