QB/T 4483-2013
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QB/T 4483-2013 木聚糖酶制剂
QB/T4483-2013
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标准内容
ICS67.180.20
分类号：X69
备案号：41609-2013
中华人民共和国轻工行业标准
QB/T4483-2013
木聚糖酶制剂
Xylanasepreparations
2013-07-22发布
2013-12-01实施
中华人民共和国工业和信息化部发布前言
本标准按用照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出，QB/T4483—2013
本标准由全国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口。本标准主要起草单位：武汉新华扬生物股份有限公司、白银赛诺生物科技有限公司、青岛蔚蓝生物集团有限公司、山东龙力生物科技股份有限公司、湖南鸿鹰翔生物工程股份有限公司、山东隆大生物工程有限公司、大连工业大学、合肥学院、中国生物发酵产业协会。本标准主要起草人：杜军、李晓燕、詹连生、俞峰、陈亮珍、马俊杰、樊淳红、钱娟娟、李宪臻、张洁、刘捷、王永兰。
1范围
木聚糖酶制剂
QB/T4483-2013
本标准规定了木聚糖酶制剂的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则及标志、包装、运输，贮存。
本标准适用于经微生物液体深层发酵、提纯制得的工业用木聚糖酶制剂的生产、检验和销售。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志（GB/T191-2008，ISO780:1997，MOD）GB5009.3-2010食品安全国家标准食品中水分的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-2008ISO3696：1987，MOD）GB7718食品安全国家标准预包装食品标签通则GB25594 食品安全国家标准 食品工业用酶制剂GB/T23527蛋白酶制剂
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
xylanase
木聚糖酶
能破坏植物的纤维组织，将木聚糖分解成木糖的酶3.2
木聚糖酶活力activityofxylanase一定时间内，催化木聚糖溶液降解释放还原糖的能力。注：1g固体酶（或1mL液体酶），于50C、一定pH条件下（酸性木聚糖酶制剂pH为4.8：中性木紧糖酶制剂pH为6.0：碱性木聚糖酶制剂pH为9.0），1min从浓魔Smg/mL木聚糖溶液中，降解释放1μmol还原糖，即为一个酶活力单位，以“u/g（u/mL）”表示。
4产品分类
4.1按产品形态分为固体剂型和液体剂型。4.2按产品等级分为优等品和一等品。4. 3按产品的作用（pH范围）分为酸性木聚糖酶制剂、中性木聚糖酶制剂和碱性木聚糖酶制剂。5要求
5.1感官要求
固体剂型：粉状、微囊状或颗粒状，粒度均匀，色泽一致，无惩变、潮解、结块现象，有特殊发酵气味，无异味。
液体剂型：淡黄色至深褐色液体，可有少量凝聚物，有特殊发醇气味，无异味。5.2理化要求
应符合表1的规定。
QB/T4483-2013
酶活力·/wg（或u/mL）
干燥失重/%
细度（40自标准端通连率）
可接供器
一如有特要求，
53卫生要求
优等品应行合GB25
试验方法
本标准所用试剂和水
6.1感官
称取样品10g（或10
6.2酶活力
定的醇活力规格执行
用分析线
体制型
中规定的
酸性木聚糖酶制剂、中性木聚糖酶制剂和碱性木聚糖酶制剂分别按阴录A、附录B方法进行测定
63干燥失重
按GB5009.3-2010中第一法进行测定6.4细度
按GB/T23527规定的方法进
检验规则
批次的确定
以同一次投
7.2取样规则
7.21取样应
72.2取样
检验的取样
7.23成品
相关方确定
现格，同一品种的均一质量的产品为生整个灌装过程中，或均匀分布于灌装后的宣的方法保征取样具有代表性，保证取样部位制型
一等品
RC规定的
洁。对用干微生物
菌操作。
主量见表2.取样的样本量可按服估计的批量参照表不应小于30ng（或300mL）不足接照比例适表2成品抽样的样本
由生产企业和（或）
执·城
注：批量是指批中所包合的单位商品数，单位为桶或箱，样本最是指杆本中所包香的样本单位数，单位为精成袋。7.3出厂检验
7.3.1每批产品应经
部门检验合格
培格让
7.3.2出厂检验项目为：
感官、酶活力、干燥失
7.4型式检验
7.41下列情况之一时
a）正常生产半年
b）停产3个月以
G）主要原料及工艺
d)国家质量监督机
e）出厂检验结果点
7.4.2型式检验的检验
7.5判定规则
7.5.1标志标签，包装
感官，理化有
7.5.3卫生有1项不合
标志，包装、运输
型式检验
变时：
出或客户要求时：
检验结果有较大差，
本标准的全部技术享
可整改后复验
可加信电样进行堡
可出厂
结果为准
给用准
QB/T4483-2013
8.1标志
8.1.1产品的包装上应粘贴有牢固的标签，标签内容应包括：产品名称，产地、厂名、生产日期、批号及保质期等。优等品应符合GB7718的要求8.1.2包装储运图示标志按GB/T191执行8.2包装
产品的内包装和（或）包#
应的食品包装用/食品容服
8.3运输
产品运输过程
施，搬运、装卸
8.4购存
产品含
存：防受热
精品产品
降有害及其他污染物品混贮，运输工专清洁。干燥，韧质，光线，温度，湿度易引起失活，应手干燥、通风
（醇活力）
免用特合相
、防晒设
避光处临wwW.bzxz.Net
QB/T4483-2013
A1原理
附录A
（规范性附录）
中性木聚糖酶制剂活力的测定
木聚糖酶能将木聚糖降解成嘉糖和单糖。还原性寡糖和单糖在沸水浴条件下可与3.5-二硝基水杨酸DNS）试剂发生显色反应。反应液颜色的强度与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中木聚糖酶的活力成正比。因此，通过分光比色测定反应液颜色的强度，可计算反应液中木聚糖酶的活力。
A2试剂与溶液
除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合GB/T6682中规定的二级水。A.2.1柠檬酸溶液（浓度为005mol/L）称取一水柠檬酸1.06g溶于80mL水中，搅拌，用水定容至100mLA.2.2磷酸氢二钠溶液（浓度为0.1mol/L）称取磷酸氢二钠l42g，溶于80mL水中，搅拌，用水定容至100mLA.2.3磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液pH为6.0）称取一水柠檬酸7.75g：无水磷酸氢二销17.93g：再加水溶解，定容至2000mL，测定其pH。如果PH偏离6.0，再用柠檬酸溶液（A.2.1）或磷酸氧二钠溶液（A.2.2）调节至6.0A2.4氢氧化钠溶液（浓度为200g/L）称取氢氧化钠20.0g：加水溶解，定容至100mLA2.5木糖溶液（C，H0g）（浓度为10.0mg/mL）称取无水木糖1g（精确至0.0001g），加磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液（A.2.3）溶解，定容至100mL。A2.6木聚糖溶液（浓度为10mg/mL）称取木聚糖（SigmaX0627）1.00g，加入0.32g氢氧化销，再加入90mL水，磁力搅拌，同时缓慢加热（25min），直至木聚糖完全溶解。然后停止加热，继续搅拌30min至室温，测定其pH。如果pH为6.0，用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液（A.2.3）定容至100mL，如果pH偏高6.0，再用柠檬酸溶液（A.2.1）或磷酸氧二钠溶液（A.2.2）调节至6.0，然后再用磷酸氢二钙-柠檬橡酸缓冲溶液（A.2.3）定容至100mL。使用前适当摇匀。4C避光保存，有效期为12h。A.2.7DNS试剂
称取3.5-二硝基水杨酸3.15g，加水500mL。搅拌3s~5s，水浴至45C。然后逐步加入100mL氢氧化钠溶液（A.2.4)，同时不断揽拌，直到溶液清激透明，注意：在加入氢氧化钠过程中，溶液温度不应超过48℃。再逐步加入四水酒石钾钠91.0g、苯酚2.50g和无水亚硫酸钠2.50g继续45C水浴加热。同时补加水300mL，不断揽拌，直到加入的物质完全溶解。停止加热，冷却至室温后，用水定容至1000mLl用烧结玻璃过滤器过滤，取滤液，储存在棕色瓶中，避光保存。室温下存放7d后可使用，有效期为60d警告；处理酸碱和配制 DNS 试剂时。应在通风概或通风良好的房间进行，截上保护眼使和乳胶手妻、一旦皮肤或眼睛接触了上述物质，及时用大量的水冲洗.Sigmax0627是商品名，给出这一信息是为了给本标准的使用者一个相对标准。如果其他产品能有相同的效案。则可使用这能筛效的产品
A.3仪器与设备
分析天平：感量0.0001g：
PH计：精确至0.01：
磁力搅拌器：附加热功能：
电磁振荡器：
烧结玻璃过滤器：孔径为0.45μm离心机：最大离心加速度不小于2000×g：温度计：精度0.1C：
恒温水浴锅：温度控制范围在30℃～80℃之间，精度为0.1℃：秒表：每h误差不超过5S：
分光光度计：能检测350nm~800mm的吸光度范围：移液器：精度为1山
A.4绘制标准曲线
QB/T4483-2013
A.4.1吸取磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液CA2.3）2.0mL，加入DNS试剂（A.2.7）2.5mL，沸水浴加热5min用自来水冷却至室温，用水定容至12.5mL，制成标准空白样。A.4.2分别吸取木糖溶液（A.2.6）1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL和7.00mL分别用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液（A.2.3）定容至100mL，配制成浓度为0.10mg/mL、0.2mg/mL0.30mg/mL0.40mg/mL、0.50mg/mL、0.60mg/mL和0.70mg/mL的木糖标准溶液。A.4.3分别吸取上述浓度系列的木糖标准溶液各1.00mL（做两个平行），分别加入到刻度试管中，再分别加入1mL水和2.5mLDNS试剂（A.2.7）。电磁振荡3s，沸水浴加热5min。然后用自来水冷却到室温，再用水定容至12.5mL。以标准空白样为对照调零，在540nm处测定吸光度OD值。A.4.4以木糖浓度为y轴、吸光度OD值为x轴，绘制标准曲线。每次新配制DNS试剂均需要重新绘制标准曲线。
A.5反应用酶液的制备
A.5.1固体样品的反应用酶液制备称取试样两份，精确至0.0001g加入100mL磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液（A.2.3），搅拌30min，再用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液（A.2.3）做二次稀释（稀释后的待测酶液中木聚糖酶制剂活力应控制在0.05wmL～0.09u/mL之间）。
A.5.2液体样品的反应用酶液制备液体试样可直接用磷酸氢二钠-片模酸缓冲溶液（A.2.3）进行稀释、定容（稀释后的酶液中木聚糖酶制剂活力宜控制在0.05/mL~0.0%w/mL之间）.如果稀释后酶液的pH偏离6.0.需用柠模酸溶液（A.2.1)）或磷酸氢二钠溶液（A.2.2）调节至6.0，然后再用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液（A.2.3）做适当定容。A.6测定步骤
吸取10mL木聚糖溶液（A.2.6），50C水浴保温平衡5min吸取10mL经过适当稀释的醒液（A.5.1或A.5.2），50C水浴保温平衡5min。吸取1.0mL经过适当稀释的酶液（已经过50C平衡），加入到刺度试管中，再加入2.5mLDNS试剂CA2.7），电磁振荡35。然后加入1.0mL木聚精溶液（已经过50C平衡），50C保温30min后取出，QB/T4483-2013
沸水浴加热5min
空白对照，在540mm
吸取1.00mL经过适
（已经过50C平衡）
3s，以终止酶解反应。
标准空白样（A.4.1）为
A7结果计算
稀释的酶液（已经过50
蓝摄荡3s#50C精确保温
盟热：min，
用自来水酒
在540nm处测定吸
试样稀释液中的木商耐割
式中：
试样稀释
酶反应液
酶空白样
标准曲线
活力按公式CA.1)
（-4）x
唐酶制剂活力，u/g
标准曲线的做典
木糖的摩尔质量，M（C.HoO）=150.2g/mol：降解反应时间，单位为分钟（min）：转化因子，1mmol=1000umol。
加入到刻度试管
加入2.5mLDNS试，
：加水定容至12.5
空白样（A5.1）为
1.0mL木聚糖
，电磁报荡
摄满荡3s。以
.....CA.)
Xp值应控制在0.05u/g~0.09u/g（或wmL）之间如果不在这个范国内，应重新选书液的稀释
度，再进行分析测定
校正后试样稀释液中的木形
（A2)
所得结果
AB允许差
择液中的本聚糖酶制剂活力，wg（或择倍数
的定结果的策术平均值为准。平行测定结果的绝对实验结单社中#
美值不蹈过8%
除下述与“附录A”
布通果
B.1试剂与溶液
除特殊说明外，所用
B.1.1乙酸溶液C浓度
吸取冰乙度0.6mL，
B.12乙酸钠溶液（浓压
称取三水酸钠136
B.1.3乙酸钠乙酸缓冲
称取三水乙酸销8.02
C观英性带
酸性木聚糖酶利们活为的
QB/T4483-2013
吸计算方法等同“附策A
有所改动外，其他者作零情
5682中规定的二级才
为分析纯，水均为符
定容至100mL
mL水中，搅择，用
务1饼
离4.8，再用乙酸落液B
B.1.4木糖溶液（CHOs）（浓度为10.0mg/mL）100mL
如果pH偏
称取无水大糖Yg（精确至0.0001g），加乙酸钠-乙酸缓冲液（B.1.3）溶解，定容至B.1.5木聚糖滴（浓度为10m/ml）mL
称取木聚糖（SigmaX0627）1.00g，加入0.32g氢氧化钠，再加入90mL水，磁力搅拌，同时缓慢加热（25min），直至木聚糖完全溶解然后停止加热，继续搅拌30min，测定其pH，如果p8.用乙
酸钠-Z酸级冲浴液CB13）定容至10调节至4.8，然后再用乙酸钠
有效期为12h。
饰系扫车容L
藏（B.11）或
当播摇多
光保存
QB/T4483-2013
附录C
（规范性附录）
碱性木聚糖酶制剂活力的测定
除下述与“附录A”在溶液上有所改动外，其他操作步骤及计算方法等同“附录A\。试剂与溶液
除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合GB/T6682中规定的二级水。C.1.1甘氨酸溶液（浓度为0.2mo1/）称取甘氨酸1.5g，用水溶解，定容至100mL。C.1.2氢氧化钠溶液（浓度为0.2mol/L）称取氢氧化钠8.0g。加水溶解，定容至1000mL，混匀备用C.1.3甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液（pH为9.0）取44mL氢氧化钠溶液（C.12）和250mL甘氨酸（C.1.1）溶液混合后，用去离子水定容至L，于4℃冰箱内保存备用
C.1.4木糖液（C,HiaO）（浓度为10.0g/mL）称取无水木糖1.000g，加甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（C.1.3）溶解，定容至100mL。C.1.5木聚糖溶液（浓度为10mg/mL）称取木聚糖（SigmaX0627）1.00g，加入0.035g氢氧化钠，再加入70mL水，磁力搅拌，同时缓慢加热（25min），直至木聚糖完全溶解。然后停止加热，继续搅拌30min，测定其pH。如果pH为9.0.用甘氨酸一氢氧化钠缓冲溶液（C.1.3）定容至100mL。如果pH偏离9.0，再用甘氨酸溶液（C.1.1）或氢氧化钠溶液（C.1.2）调节至9.0，然后再用甘氢酸-氢氧化钠缓冲溶液（C.1.3）定容至100mL。使用前适当摇匀。4℃避光保存，有效期为12h。
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分类号：X69
备案号：41609-2013
中华人民共和国轻工行业标准
QB/T4483-2013
木聚糖酶制剂
Xylanasepreparations
2013-07-22发布
2013-12-01实施
中华人民共和国工业和信息化部发布前言
本标准按用照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出，QB/T4483—2013
本标准由全国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口。本标准主要起草单位：武汉新华扬生物股份有限公司、白银赛诺生物科技有限公司、青岛蔚蓝生物集团有限公司、山东龙力生物科技股份有限公司、湖南鸿鹰翔生物工程股份有限公司、山东隆大生物工程有限公司、大连工业大学、合肥学院、中国生物发酵产业协会。本标准主要起草人：杜军、李晓燕、詹连生、俞峰、陈亮珍、马俊杰、樊淳红、钱娟娟、李宪臻、张洁、刘捷、王永兰。
1范围
木聚糖酶制剂
QB/T4483-2013
本标准规定了木聚糖酶制剂的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则及标志、包装、运输，贮存。
本标准适用于经微生物液体深层发酵、提纯制得的工业用木聚糖酶制剂的生产、检验和销售。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志（GB/T191-2008，ISO780:1997，MOD）GB5009.3-2010食品安全国家标准食品中水分的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-2008ISO3696：1987，MOD）GB7718食品安全国家标准预包装食品标签通则GB25594 食品安全国家标准 食品工业用酶制剂GB/T23527蛋白酶制剂
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
xylanase
木聚糖酶
能破坏植物的纤维组织，将木聚糖分解成木糖的酶3.2
木聚糖酶活力activityofxylanase一定时间内，催化木聚糖溶液降解释放还原糖的能力。注：1g固体酶（或1mL液体酶），于50C、一定pH条件下（酸性木聚糖酶制剂pH为4.8：中性木紧糖酶制剂pH为6.0：碱性木聚糖酶制剂pH为9.0），1min从浓魔Smg/mL木聚糖溶液中，降解释放1μmol还原糖，即为一个酶活力单位，以“u/g（u/mL）”表示。
4产品分类
4.1按产品形态分为固体剂型和液体剂型。4.2按产品等级分为优等品和一等品。4. 3按产品的作用（pH范围）分为酸性木聚糖酶制剂、中性木聚糖酶制剂和碱性木聚糖酶制剂。5要求
5.1感官要求
固体剂型：粉状、微囊状或颗粒状，粒度均匀，色泽一致，无惩变、潮解、结块现象，有特殊发酵气味，无异味。
液体剂型：淡黄色至深褐色液体，可有少量凝聚物，有特殊发醇气味，无异味。5.2理化要求
应符合表1的规定。
QB/T4483-2013
酶活力·/wg（或u/mL）
干燥失重/%
细度（40自标准端通连率）
可接供器
一如有特要求，
53卫生要求
优等品应行合GB25
试验方法
本标准所用试剂和水
6.1感官
称取样品10g（或10
6.2酶活力
定的醇活力规格执行
用分析线
体制型
中规定的
酸性木聚糖酶制剂、中性木聚糖酶制剂和碱性木聚糖酶制剂分别按阴录A、附录B方法进行测定
63干燥失重
按GB5009.3-2010中第一法进行测定6.4细度
按GB/T23527规定的方法进
检验规则
批次的确定
以同一次投
7.2取样规则
7.21取样应
72.2取样
检验的取样
7.23成品
相关方确定
现格，同一品种的均一质量的产品为生整个灌装过程中，或均匀分布于灌装后的宣的方法保征取样具有代表性，保证取样部位制型
一等品
RC规定的
洁。对用干微生物
菌操作。
主量见表2.取样的样本量可按服估计的批量参照表不应小于30ng（或300mL）不足接照比例适表2成品抽样的样本
由生产企业和（或）
执·城
注：批量是指批中所包合的单位商品数，单位为桶或箱，样本最是指杆本中所包香的样本单位数，单位为精成袋。7.3出厂检验
7.3.1每批产品应经
部门检验合格
培格让
7.3.2出厂检验项目为：
感官、酶活力、干燥失
7.4型式检验
7.41下列情况之一时
a）正常生产半年
b）停产3个月以
G）主要原料及工艺
d)国家质量监督机
e）出厂检验结果点
7.4.2型式检验的检验
7.5判定规则
7.5.1标志标签，包装
感官，理化有
7.5.3卫生有1项不合
标志，包装、运输
型式检验
变时：
出或客户要求时：
检验结果有较大差，
本标准的全部技术享
可整改后复验
可加信电样进行堡
可出厂
结果为准
给用准
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8.1标志
8.1.1产品的包装上应粘贴有牢固的标签，标签内容应包括：产品名称，产地、厂名、生产日期、批号及保质期等。优等品应符合GB7718的要求8.1.2包装储运图示标志按GB/T191执行8.2包装
产品的内包装和（或）包#
应的食品包装用/食品容服
8.3运输
产品运输过程
施，搬运、装卸
8.4购存
产品含
存：防受热
精品产品
降有害及其他污染物品混贮，运输工专清洁。干燥，韧质，光线，温度，湿度易引起失活，应手干燥、通风
（醇活力）
免用特合相
、防晒设
避光处临wwW.bzxz.Net
QB/T4483-2013
A1原理
附录A
（规范性附录）
中性木聚糖酶制剂活力的测定
木聚糖酶能将木聚糖降解成嘉糖和单糖。还原性寡糖和单糖在沸水浴条件下可与3.5-二硝基水杨酸DNS）试剂发生显色反应。反应液颜色的强度与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中木聚糖酶的活力成正比。因此，通过分光比色测定反应液颜色的强度，可计算反应液中木聚糖酶的活力。
A2试剂与溶液
除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合GB/T6682中规定的二级水。A.2.1柠檬酸溶液（浓度为005mol/L）称取一水柠檬酸1.06g溶于80mL水中，搅拌，用水定容至100mLA.2.2磷酸氢二钠溶液（浓度为0.1mol/L）称取磷酸氢二钠l42g，溶于80mL水中，搅拌，用水定容至100mLA.2.3磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液pH为6.0）称取一水柠檬酸7.75g：无水磷酸氢二销17.93g：再加水溶解，定容至2000mL，测定其pH。如果PH偏离6.0，再用柠檬酸溶液（A.2.1）或磷酸氧二钠溶液（A.2.2）调节至6.0A2.4氢氧化钠溶液（浓度为200g/L）称取氢氧化钠20.0g：加水溶解，定容至100mLA2.5木糖溶液（C，H0g）（浓度为10.0mg/mL）称取无水木糖1g（精确至0.0001g），加磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液（A.2.3）溶解，定容至100mL。A2.6木聚糖溶液（浓度为10mg/mL）称取木聚糖（SigmaX0627）1.00g，加入0.32g氢氧化销，再加入90mL水，磁力搅拌，同时缓慢加热（25min），直至木聚糖完全溶解。然后停止加热，继续搅拌30min至室温，测定其pH。如果pH为6.0，用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液（A.2.3）定容至100mL，如果pH偏高6.0，再用柠檬酸溶液（A.2.1）或磷酸氧二钠溶液（A.2.2）调节至6.0，然后再用磷酸氢二钙-柠檬橡酸缓冲溶液（A.2.3）定容至100mL。使用前适当摇匀。4C避光保存，有效期为12h。A.2.7DNS试剂
称取3.5-二硝基水杨酸3.15g，加水500mL。搅拌3s~5s，水浴至45C。然后逐步加入100mL氢氧化钠溶液（A.2.4)，同时不断揽拌，直到溶液清激透明，注意：在加入氢氧化钠过程中，溶液温度不应超过48℃。再逐步加入四水酒石钾钠91.0g、苯酚2.50g和无水亚硫酸钠2.50g继续45C水浴加热。同时补加水300mL，不断揽拌，直到加入的物质完全溶解。停止加热，冷却至室温后，用水定容至1000mLl用烧结玻璃过滤器过滤，取滤液，储存在棕色瓶中，避光保存。室温下存放7d后可使用，有效期为60d警告；处理酸碱和配制 DNS 试剂时。应在通风概或通风良好的房间进行，截上保护眼使和乳胶手妻、一旦皮肤或眼睛接触了上述物质，及时用大量的水冲洗.Sigmax0627是商品名，给出这一信息是为了给本标准的使用者一个相对标准。如果其他产品能有相同的效案。则可使用这能筛效的产品
A.3仪器与设备
分析天平：感量0.0001g：
PH计：精确至0.01：
磁力搅拌器：附加热功能：
电磁振荡器：
烧结玻璃过滤器：孔径为0.45μm离心机：最大离心加速度不小于2000×g：温度计：精度0.1C：
恒温水浴锅：温度控制范围在30℃～80℃之间，精度为0.1℃：秒表：每h误差不超过5S：
分光光度计：能检测350nm~800mm的吸光度范围：移液器：精度为1山
A.4绘制标准曲线
QB/T4483-2013
A.4.1吸取磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液CA2.3）2.0mL，加入DNS试剂（A.2.7）2.5mL，沸水浴加热5min用自来水冷却至室温，用水定容至12.5mL，制成标准空白样。A.4.2分别吸取木糖溶液（A.2.6）1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL和7.00mL分别用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液（A.2.3）定容至100mL，配制成浓度为0.10mg/mL、0.2mg/mL0.30mg/mL0.40mg/mL、0.50mg/mL、0.60mg/mL和0.70mg/mL的木糖标准溶液。A.4.3分别吸取上述浓度系列的木糖标准溶液各1.00mL（做两个平行），分别加入到刻度试管中，再分别加入1mL水和2.5mLDNS试剂（A.2.7）。电磁振荡3s，沸水浴加热5min。然后用自来水冷却到室温，再用水定容至12.5mL。以标准空白样为对照调零，在540nm处测定吸光度OD值。A.4.4以木糖浓度为y轴、吸光度OD值为x轴，绘制标准曲线。每次新配制DNS试剂均需要重新绘制标准曲线。
A.5反应用酶液的制备
A.5.1固体样品的反应用酶液制备称取试样两份，精确至0.0001g加入100mL磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液（A.2.3），搅拌30min，再用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液（A.2.3）做二次稀释（稀释后的待测酶液中木聚糖酶制剂活力应控制在0.05wmL～0.09u/mL之间）。
A.5.2液体样品的反应用酶液制备液体试样可直接用磷酸氢二钠-片模酸缓冲溶液（A.2.3）进行稀释、定容（稀释后的酶液中木聚糖酶制剂活力宜控制在0.05/mL~0.0%w/mL之间）.如果稀释后酶液的pH偏离6.0.需用柠模酸溶液（A.2.1)）或磷酸氢二钠溶液（A.2.2）调节至6.0，然后再用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液（A.2.3）做适当定容。A.6测定步骤
吸取10mL木聚糖溶液（A.2.6），50C水浴保温平衡5min吸取10mL经过适当稀释的醒液（A.5.1或A.5.2），50C水浴保温平衡5min。吸取1.0mL经过适当稀释的酶液（已经过50C平衡），加入到刺度试管中，再加入2.5mLDNS试剂CA2.7），电磁振荡35。然后加入1.0mL木聚精溶液（已经过50C平衡），50C保温30min后取出，QB/T4483-2013
沸水浴加热5min
空白对照，在540mm
吸取1.00mL经过适
（已经过50C平衡）
3s，以终止酶解反应。
标准空白样（A.4.1）为
A7结果计算
稀释的酶液（已经过50
蓝摄荡3s#50C精确保温
盟热：min，
用自来水酒
在540nm处测定吸
试样稀释液中的木商耐割
式中：
试样稀释
酶反应液
酶空白样
标准曲线
活力按公式CA.1)
（-4）x
唐酶制剂活力，u/g
标准曲线的做典
木糖的摩尔质量，M（C.HoO）=150.2g/mol：降解反应时间，单位为分钟（min）：转化因子，1mmol=1000umol。
加入到刻度试管
加入2.5mLDNS试，
：加水定容至12.5
空白样（A5.1）为
1.0mL木聚糖
，电磁报荡
摄满荡3s。以
.....CA.)
Xp值应控制在0.05u/g~0.09u/g（或wmL）之间如果不在这个范国内，应重新选书液的稀释
度，再进行分析测定
校正后试样稀释液中的木形
（A2)
所得结果
AB允许差
择液中的本聚糖酶制剂活力，wg（或择倍数
的定结果的策术平均值为准。平行测定结果的绝对实验结单社中#
美值不蹈过8%
除下述与“附录A”
布通果
B.1试剂与溶液
除特殊说明外，所用
B.1.1乙酸溶液C浓度
吸取冰乙度0.6mL，
B.12乙酸钠溶液（浓压
称取三水酸钠136
B.1.3乙酸钠乙酸缓冲
称取三水乙酸销8.02
C观英性带
酸性木聚糖酶利们活为的
QB/T4483-2013
吸计算方法等同“附策A
有所改动外，其他者作零情
5682中规定的二级才
为分析纯，水均为符
定容至100mL
mL水中，搅择，用
务1饼
离4.8，再用乙酸落液B
B.1.4木糖溶液（CHOs）（浓度为10.0mg/mL）100mL
如果pH偏
称取无水大糖Yg（精确至0.0001g），加乙酸钠-乙酸缓冲液（B.1.3）溶解，定容至B.1.5木聚糖滴（浓度为10m/ml）mL
称取木聚糖（SigmaX0627）1.00g，加入0.32g氢氧化钠，再加入90mL水，磁力搅拌，同时缓慢加热（25min），直至木聚糖完全溶解然后停止加热，继续搅拌30min，测定其pH，如果p8.用乙
酸钠-Z酸级冲浴液CB13）定容至10调节至4.8，然后再用乙酸钠
有效期为12h。
饰系扫车容L
藏（B.11）或
当播摇多
光保存
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附录C
（规范性附录）
碱性木聚糖酶制剂活力的测定
除下述与“附录A”在溶液上有所改动外，其他操作步骤及计算方法等同“附录A\。试剂与溶液
除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合GB/T6682中规定的二级水。C.1.1甘氨酸溶液（浓度为0.2mo1/）称取甘氨酸1.5g，用水溶解，定容至100mL。C.1.2氢氧化钠溶液（浓度为0.2mol/L）称取氢氧化钠8.0g。加水溶解，定容至1000mL，混匀备用C.1.3甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液（pH为9.0）取44mL氢氧化钠溶液（C.12）和250mL甘氨酸（C.1.1）溶液混合后，用去离子水定容至L，于4℃冰箱内保存备用
C.1.4木糖液（C,HiaO）（浓度为10.0g/mL）称取无水木糖1.000g，加甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（C.1.3）溶解，定容至100mL。C.1.5木聚糖溶液（浓度为10mg/mL）称取木聚糖（SigmaX0627）1.00g，加入0.035g氢氧化钠，再加入70mL水，磁力搅拌，同时缓慢加热（25min），直至木聚糖完全溶解。然后停止加热，继续搅拌30min，测定其pH。如果pH为9.0.用甘氨酸一氢氧化钠缓冲溶液（C.1.3）定容至100mL。如果pH偏离9.0，再用甘氨酸溶液（C.1.1）或氢氧化钠溶液（C.1.2）调节至9.0，然后再用甘氢酸-氢氧化钠缓冲溶液（C.1.3）定容至100mL。使用前适当摇匀。4℃避光保存，有效期为12h。
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