QB/T 4481-2013 β-葡聚糖酶制剂 QB/T4481-2013 标准压缩包解压密码：www.bzxz.net

[CS 67.180.20
分类号：X69
备案号：41607-2013
中华人民共和国轻工行业标准
QB/T4481—2013
β-葡聚糖酶制剂
β- glucanase preparations
2013-07-22发布
中华人民共和国工业和信息化部2013-12-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给山的规则起草。本标准由中国轻工业联含会提而。本标准由全国食品.I业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口。QB/T4481-2013
本标主要起草单位：湖南鸿鹰祥生物「.程股份有限公司、口银赛诺牛物科技有限公司、岛蔚蓝生物集团有限公司、武汉新华扬生物股份有限公司、山东隆大生物工程有限公司、诺维信（中国）生物技术有限公可、人连「业人学、合肥学院、中国生物发酵产业协会。本标雅主要起草人：杜车、李晓燕、樊淳红、俞峰、陈亮珍、詹连牛、郭庆文、麟智津、李宪臻、张洁、刘捷、土永兰。
1范围
β-葡聚糖酶制剂
QB/T4481-2013
本标准规定了β-葡聚糖酶制剂的术讲和定义、产品分类、要求，试验方法，检验规则及标志，包装、运输、购存：
本标准适用于以凝粉质或糖匾为主要原料，经液体深层发酵，提取精制制得的工业用β-葡聚糖醛制剂。
2规范性引用文件
下列文件对于本,文件的应用是必不可少的。凡是注乃期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，甚最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志（GR/T191-2008，1SO780:1997，MOD）GB/I6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682—2008，1SO3696：1987，MOD）GB7718食品安全国家标准预包装食品标签通则GB/T23527蛋酵制剂
GB25594食品安全国家标准食品工业用酶制剂3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
B-葡聚糖酶 β-gluranase
能水解β-葡聚糖的β-1,3和β-1,4葡萄糖苷键，产生低聚糖及葡萄糖的酶。3. 2
B-葡聚糖酶活力activityofp-glucanase一定时问内，催化β-葡聚糖溶液降解释放还原糖的能力。注：1 g固体酶（或1 mL液体酶），于50 C、pH4.8条件下，1 miu从浓度4 mg/mL的β-葡聚糖溶液中降解释放1 μmo让原糖，即为1个酶活力单位，单位为u/g或u/mL。4：产品分类
4.1按产品形态分为固体剂型和液体剂型，4.2按产品等级分为优等品和一等品。5要求
5.1感官要求
5.1.1 固体剂型
色均勺，粉状或颖粒状。无爵变、潮解、结块现象，有特殊发酵气味，尤异味。5. 1.2液体剂型
淡黄色空深褐色液体，可有少量凝聚物，有特殊发酵气味，无异味。5.2理化要求
应符合表1的规定。
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酶活力/[wg（或u/mL）
干燥失重/%
细度（60日标准筛通过率）/%
表1理化要求
固体剂型
优等品
，如有特殊要求，可按供需双方合周规定的酶活力规格执行5.3卫生
优等品应符合GB25594的规定。
6试验方法
本标准所用试剂和水除另有注明外，6.1
称取样10g（或10ml
酶活力
按附录A规定的方法进行测定。
干燥失重
按GB/T23527规定的方法进行测定6.4细度
按GB/T23527规定的方法
检验规则
7.1批次的确定
一等品
用分标纯试剂和GB/T6682
以同一次投料生产、同一规格、同一品种的均一质量的产品为7.2取样规则和样本量
优等品
液体剂型
规定的水
7.2.1取样应均匀分布在整个灌装过程中，或均匀分布于灌装后的成品中。等品
7.2.2取样时应采用适宜的方法保证取样具有代表性，保证取样部位和取样瓶的清洁。对用于微生物检验的取样，应使用无菌操作。7.2.3成品抽样的样本量见表2。取样的样本量可按照估计的批量参照表2执行，或由生产企业和（或）批取样量不应小于300g（或300mL），不足按照比例适相关方确定。
重当加取。
表2成品抽样的样
批量人桶或箱
51~500
量（桶或袋）
注：批量是指批中所包含的单位断品数，单位为桶或箱，样本最是指样本中所包含的样本单位数，单位为桶或袋。2
7.3出厂检验
7.3.1每批产品应经企业质检部门检验合格并附合格证后方可出厂。QB/T4481-2013
7.3.2优等品出厂检验的检验项目为：感官、酶活力、干燥失重（固体）、细度（固体）、菌落总数、大肠菌群。一等品出厂捡验项目为：感官、酶活力、干燥失重（固体）、细度（固体）。7.4型式检验
型式检验的检验项目为本标准要求中规定的全部项目。一般情况下，型式检验半年进行1次。有下列情况之一时，亦应进行型式检验：a）原辅材料有较大变化时
b）更改关键工艺革
或设备时
c）新试制的产品或正常生产
产的产品停产3个月后，重新恢复生产时；d）出厂检验与上次型式检验结果有较大差异时e）国家质量监督机构按有关规定需要抽检时。7.5判定规则
7.5.1标志、包装不
合格，可整改后复踏1次，以复检结果为准7.5.2感官、理化若有1项不合格，可加倍抽样进行复验，以复检结果为准。卫生若有1项
不合格，则该批次产品为
8标志、包装、运输、贮存
8.1标志
不合格
8.1.1包装容器外标签应注明产品名称、生产厂厂名、厂址、酶活力、生产日期、批号、保质期、执行的标准编号。优等品应符合GB7718的规定。8.1.2包装储运图示标志按GB/T1918.2包装
产品的内包装和（或）包装容器的内涂料应采用国家批准的材料。优等品的包装，应采用符合相应车器卫生标准的材料
的食品包装用/食品容
8.3运输
产品在运箱
有害、有腐蚀
过程中应轻拿轻放，严防雨淋和暴晒。运输工具应清洁、无毒、无污染严禁与有毒、
混装、混运。
性的物质
8.4购存
产品应
存在阴京、洁净、
于燥的地方，不应与有害、有毒及有腐蚀性等物质混存。3
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A.1原理
附录A
（规范性附录）
酶活力的测定
β-葡聚糖酶能将(-葡聚糖降解成低聚糖和单糖。具有还原性末端的低聚糖和有还原基因的单糖在沸水浴条件下可以！j3.5-二硝基水杨酸（DNS）试剂发生显色反应。反应液颜色的强度与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成虽又与反应额中β-葡聚糖醇的活力成正比。固此，迹过分光比色测定反应液颜色的强度，可以计算反应液中β-葡策糖酶的活力。A. 2 试剂与溶液
除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合(B汀6682中规定的三级水。A.2.1商葡糖溶液c：（C.Hi20g）为10.0 mg/mL称取烘干恒重的无水葡萄1（精确至0.0001g），加水溶解，：定容至100mL。A.2. 2磷酸氢二钠溶液（Na,HPO[2H,0）标记为0.2 mol/L磷酸氢二钠准确称取358.05g磷酸氢二钠落于4000mL新沸放冷的蒸馏水中，定容至5000mL。A.2.3柠檬酸溶液c（C.H,O,H0）标记为0.ImolL柠檬酸准确称取105.05g柠檬酸溶下4000mL新沸放冷的蒸馏水中，定容至5000mL。A.2.4氢氧化钠溶滋（Na0OH）为20KIg/L称取氢氧化钠20.0g，加水解：定容至100mL。A.2.5酸性缓冲溶液（pH=4.80）量取2465mL、0.2mol/L磷酸氢二钠和2535ml、0.1mol/L的柠檬酸，混合摇匀，用精密pH计测定其pH，必要时用0.2mol/L麟酸氢二钠或0.1mol/L的柠檬酸调pH至4.80，摇勺后标记为酸性缓冲液，同时标记pH-4.80及配制日期，并在4C下保存，A.2.6B-葡聚糖溶液8mg/ml
称取β-葡聚糖l（97%，黏度310）0.2g，加入1.5mL～2mL无水乙醇，润湿β-葡聚瓣，置丁冰箱中阴干，再旭入20㎡L酸性缓冲溶液（A.2.5）。磁力搅拌，同时缓慢加热，直至β-葡聚精完仑溶解（在搅拌加热的过程中可补加适量的缓冲液。但落液的总体积不应超过25mL）。然后停止加热，继续搅拌至冷却，用酸性缓冲溶液（A.2.5）定容至25ml.。β-葡聚糖溶液能立即使用，使用前适当摇匀。4℃避光探存，有效期为24b。
A.2.7DNS试剂
称取3,5-二硝基水杨酸3.15，加水500mL，搅拌5s，水浴至45它。然后逐步加入100mL氢氧化钠辫液（A.2.4），同时不断搅，直到溶没清澈透明，注意在训入氢氧化钠过程中，溶滩温度不应趣过48℃再逐步加入四水酒凸酸钾钠91.0g、苯酚2.50g和无水亚硫酸钠2.50g。继续45℃水浴加热，同时补加水300 mL，不断搅拌，直到加入的物质完全溶解。停止加热，冷却至室温后，用水定容至1000ml。用滤纸过滤，取滤液储存在棕色瓶中，避光保存。室温下存放了人后可使用，有效期为6个月。1）如果其产品能行相同的效果，则可使川这些等效的产品，参患货号为PS-EA.小
A.3仪器与设备
实验室用样品粉碎机或砸钵。
A. 3. 2分样筛：孔价为0.25 mm（60H)。A.3.3，分析天平：感量0.000１BpH计：精确至0.01。
磁力搅拌器：附加热功能，
电磁振荡器。
恒温水浴锅：温度控制范围个30℃-60℃之间，精度为0.1℃。A.3.7
A.3.8秒表：每小时误鉴不超过5sA.3.9分光光度计：能检测350mm~-800nm的吸光度范。A.3.10移液器：精度为μL。
A.4标准曲线的绘制
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吸取酸性缓冲液（A.2.5）2.0mL，加入DNS试剂（A.2.7）2.5mL，沸水浴加热5min。用自来水冷即至室温，用水定容至12.StmL，制成标准空白样，分别吸取萄糖溶液A.2.[）1.00ml、2.00mL、3.00mL4.00mL、5.00ml、6.00mL和7.00mL，分别用酸性缓冲液（A.2.5）定容至100ml，配制成浓度为0.10mg/mL~0.70mg/ml葡萄糖标准溶液。分别吸取上述浓度系列的葡萄糖标准溶液各1.00m（做两个平行），分别加入到刻度试管中，再分别加入1mL水和2.5mLDNS试剂（.A.2.7）：据匀，沸水加热5min。然后用自米水冷却到室温，再用水定容至12.5mL，以标准空白样为对照调零，在540nm处测定吸光度OD值：以葡葡糖浓度为y轴、吸光度OD值为x轴，绘制标准曲线，每次新配削DNS试剂均需重新绘制标准曲线。R不小于0.999。
A5试样溶液的制备
固体试样应粉碎或充分碾碎，然店过60日筛（孔径为0.25mm），称取或吸取试样两份，精矿至0.00lg。入100mL酸性缓冲溶液（A.2.5）。搅拌30min。吸收适量上清液再用酸性缓冲溶液（A.2.5）做一次稀释（稀释后的待测酶液中，简聚糖酶活力应控制在0.04u/mL～0.08/ml之间）wwW.bzxz.Net
液体试样可直接酸性缓冲溶液（A2.5）进行稀释，定容（稀释后的酶液中酶活万宜控制在0.(4u/mlL0.08u/mL之间）。如果稀释后酶液的pH偏离4.80，需用磷酸氢二钠溶液（A.2.2）或柠像酸溶液（A,2.3）调节、校正允4.80，然后冉用酸性缓冲溶液（A.2.5）做适当定容，A.6测定步骤
分别吸取10mL-葡聚糖溶液和酶液，50℃水浴保温平衡5min，吸取1.00mL经过适当稀释的酶液（已经过50℃平衡），加入到刻度试管中，再加入2.5mLDNS试剂（A,2.7），挤匀。然后加入1.0 mLβ-简聚糖溶液（A.2.6），50C保温30 min，辨水加热5 min。用自来水冷知至室温，加水定穿卒12.5mL，摇匀。以标准空户样为空白对照，在$40nm处测定吸光度Am吸取1.0mL经过适当稀释的酶液（已经过50℃平衡），川入到刻度试管中，再加入1.0mLβ-葡聚糖落液（A.2.6）（已经过50平衡），电磁振满35，50C精确保温3门min加入2.5mLDNS试剂（A.2.7）探勺。沸水浴加热5min：用自来水冷却至审温，加水定容至12.5mL，摇勾。以标准空自样为空白对照，在.540nm处汉定吸光度Ag
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结果计算
试样的荀聚糖活力接公式（A,1计算。X = × n× 1000
式中：
充许差
试样的β-葡聚糖活力，单位为ug（或u/mL）；稀释倍数：
还原糖浓度，单位为毫克每毫片（mg/mL）「报据吸光度在标准曲线1查征（或计算出）的还原糖量，单位为毫克（mg）]：葡萄糊的率尔质量，M（CsH120g）-180.2g/mol；酶解反时问，单位为分钟（min)；转化因子，1mmol-1000umol.
实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。平行测定结果的绝对差值不应超过8%。QB/T 4481-2013
中华人民共和国
轻工行业标准
B-葡聚糖酶制剂
QB/T 4481- 2013
中国轻工业出版社出版发行
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