GB 23200.64-2016
基本信息
标准号： GB 23200.64-2016
中文名称：食品安全国家标准 食品中吡丙醚残留量的测定 液相色谱-质谱 质谱法
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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相关标签： 食品安全 国家标准 食品 吡丙醚 残留量 测定 色谱 质谱 质谱法
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标准简介
GB 23200.64-2016 食品安全国家标准 食品中吡丙醚残留量的测定 液相色谱-质谱 质谱法
GB23200.64-2016
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GB23200.642016
代替SN/T2623—2010
食品安全国家标准
食品中吡丙醚残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
National food safety standards-DeterminationofpyriproxyfenresidueinfoodsLiquid chromatography-mass spectrometry2016-12-18发布
2017-06-18实施
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会中华人民共和国农业部
国家食品药品监督管理总局
GB23200.642016
本标准代替SN/T2623-2010《进出口食品中吡丙醚残留量的检测方法液相色谱一质谱/质谱法》。本标准与SN/T2623-2010相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准名称中“进出口食品”改为“食品”；一标准范围中增加“其它食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：—SN/T2623-2010。
1范围
食品安全国家标准
GB23200.642016
食品中吡丙残留量的测定液相色谱一质谱/质谱法本标准规定了食品中吡丙醚残留量的制样和测定方法。本标准适用于大米、大豆、菠菜、柠檬、茶叶、蘑菇、牛肉、猪肝和牛奶中吡丙醚残留量的检测，其它食品可参照执行。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
试样中残留的吡丙醚在醋酸钠缓冲剂作用下用酸性乙睛提取，再用PSA填料净化，液相色谱-质谱进行测定，外标法定量。
4试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水。4.1试剂
4.1.1无水硫酸镁（MgSO4）。
4.1.2无水乙酸钠（C2H3O2Na）
4.1.3乙酸（C2H4O2）：色谱级。4.1.4乙睛（C2H,N）：色谱级。4.1.5N-丙基乙二胺（PSA）填料：50μm，色谱级。4.1.6甲酸（CH2O2）：色谱级。4.1.7乙酸铵（CHNO2）。
4.2溶液配制
4.2.10.025%甲酸水溶液（含5mmol/L乙酸铵）：准确吸取0.25mL甲酸和称取0.386g乙酸铵于1L容量瓶中，用水溶解并稀释定容至1L。4.2.21%乙酸乙腈溶液。
4.3标准品
4.3.1吡丙醚标准品（Pyriproxyfen，C2HigNO3，CAS：95737-68-1）：纯度>99%。4.4：标准溶液配制
4.4.1吡丙醚标准储备液：准确称取适量的吡丙醚标准品，用乙睛溶解并稀释配制成100μg/mL的标准储备液，4℃以下保存。
4.4.2吡丙醚标准工作液：根据需要，用10%乙睛水溶液稀释成适当浓度的标准工作液，4℃以下保存。
4.5材料
4.5.1微孔滤膜：0.2μm，有机相型。5仪器和设备
5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾（ESI）离子源。5.2离心机：4000r/min
5.3分析天平：感量0.0001g和0.01g。5.4具塞聚丙稀离心管：2mL和50mL。1
5.5粉碎机。
6试样制备与保存
6.1大米、大豆、菠菜、柠檬、茶叶、蘑菇、牛肉、猪肝GB23200.642016
取有代表性样品约500g，用组织捣碎机充分捣碎混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内作为试样。密封，并标明标记。将试样置于-18℃冷冻避光保存。6.2牛奶
取有代表性样品约500g，充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内作为试样，密封，并标明标记。将试样置于低于4℃冷藏避光保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。注：以上样品取样部位按GB2763附录A执行。7分析步骤
7.1提取
7.1.1茶叶、大豆、蘑菇、大米样品称取上述样品5g（精确至0.01g）于50mL聚丙烯塑料离心管中，加10mL水，混匀，静置30min。将离心管置于冰浴中，然后加6g无水硫酸镁和1.5g无水乙酸钠，恢复至室温后，准确加入15.0mL1%乙酸乙腈溶液，振荡提取4min，4000r/min离心5min。7.1.2菠菜、柠檬和牛奶样品
称取15g（精确至0.01g）于预先称有6g无水硫酸镁和1.5g无水乙酸钠的50mL聚丙烯塑料离心管中，将离心管置于冰浴中，恢复至室温后，准确加入15.0mL1%乙酸乙睛溶液，振荡提取4min，4000r/min离心5min。
7.1.3牛肉、猪肝样品
称取15g（精确至0.01g）于50mL聚丙烯塑料离心管中，准确加入15mL1%乙酸乙腈溶液，振荡提取4min，4000r/min离心5min。另取称有6g无水硫酸镁和1.5g无水乙酸钠的50mL聚丙烯塑料离心管，加入10mL水，溶解，待水溶液恢复到室温后，再将乙睛提取液转移至其中，振荡4min，4000r/min离心5min。
7.2净化
取1mL上述乙睛提取液于预先称有50mgPSA和150mg无水硫酸镁的2mL聚丙烯塑料离心管中，振荡提取1min，在4000r/min离心5min。准确吸取200μuL上清液用水定容至1mL，混匀后过0.2μm滤膜。滤液供液相色谱-质谱测定。7.3测定
7.3.1高效液相色谱参考条件
a）色谱柱：色谱柱：CAPCELLPAKC18柱，50mm×2.0mm(i.d.)3um或相当者。流动相：A：0.1%甲酸乙腈溶液，B：0.025%甲酸水溶液（含5mmol/L乙酸铵）。b）
流速：300μL/min，梯度洗脱程序见表1。表1梯度洗脱程序表
梯度时间/min
d）柱温：35℃。
进样量：20μL。
7.3.2质谱参考条件
a）离子源：电喷雾ESI，正离子。流动相A/%
流动相B/%/
b）扫描方式：多反应监测（MRM）。c）其它参数条件见附录A。
7.3.3定量测定
GB23200.642016
根据试样中被测物的含量，选取响应值相近的标准工作液同时进行分析。标准工作液和待测液中吡丙醚的响应值均应在仪器线性响应范围内。在上述色谱条件下的吡丙醚的参考保留时间为1.4min，标准溶液的多反应监测色谱图见附录B。7.3.4定性测定
按照液相色谱一质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液，如果检测的质量色谱峰保留时间与标准品一致，定性离子对的相对丰度是用相对于最强离子丰度的强度百分比表示，应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。
表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对丰度（基峰）
允许的相对偏差
空自实验
>20%至50%
除不加试样外，均按上述测定步骤进行。8结果计算和表述
>10%至20%
用色谱数据处理机或按式（1）计算样品中待测药物残留量。计算结果需扣除空白值AxcxV
式中：
A×mx1000
X一试样中吡丙醚的含量，单位为微克每千克（μg/kg）；A一样液中吡丙醚的峰面积；
c一标准溶液中吡丙醚的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)；V一样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；As一标准溶液中吡丙醚的峰面积：m一最终溶液所代表试样的质量，单位为克（g）；注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。9精密度
≤10%
9.1在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。
9.2在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录E的要求。
10定量限和回收率
10.1定量限
本方法菠菜、柠檬、牛肉、猪肝和牛奶中的定量限为5.0μug/kg本方法大豆、大米、蘑菇和茶叶中的定量限为15.0μg/kg。10.2回收率
不同基质中吡丙醚的添加回收率见附录C。1)
附录A
（资料性附录）
API4000液相色谱一四级杆串联质谱仪参数1)监测离子对及电压、气压参数
离子源温度：350°C；
电喷雾电压：5250V；
碰撞压力：34.475kPa（5psi)；气帘气压力：206.85kPa（30psi）雾化气压力：344.75kPa（50psi)；辅助气压力：413.7kPa(60psi);GB23200.642016
吡丙醚定量离子对、定性离子对、去簇电压（DP）、碰撞气能量（CE）和保留时间见表A.1。表A.1
吡丙醚定量离子对、定性离子对、去簇电压（DP）、碰撞气能量（CE）和保留时间组分名称
吡丙醚
定性离子对m/z
322.2-185.0
322.2→227.2
定量离子对m/z
322.2-185.0
去簇电
碰撞气能量
保留时间
非商业性声明：附录表A.1所列参数是在API4000质谱仪完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器s
附录B
（资料性附录）
吡丙醚多反应监测（MRM）色谱图1.39
Time, min
Time, min
图B.1吡丙醚MRM色谱图
GB23200.642016
322.2>185.0
322.2227.2
样品名称
附录C
（资料性附录）
方法添加浓度及回收率范围
表C.1吡丙醚的添加浓度及回收率范围添加浓度（ug/kg）
平均回收率（%）
89.3~107.3
83.5~101.3
86.3~102.1
81.4~101.8
86.2-103.8
79.7~101.3
70.6~100.4
73.8~103.2
80.1~100.2
83.3~101.3
86.8~108.9
79.1-104.8
77.6~101.8
81.5~113.0
77.7~107.2
80.6~99.8
83.5-106.0
80.5~108.2
81.4~99.4
81.5-103.0
78.2~100.8
83.3~104.7
75.8~103.2
84.0~99.0
84.7~104.0
83.1~106.8
82.9~103.1
精密度（%）
GB23200.642016
被测组分含量
>0.001≤0.01
>0.01≤0.1
（规范性附录）
实验室内重复性要求
表D.1实验室内重复性要求
精密度
GB23200.64—2016
被测组分含量
>0.001≤0.01
>0.01≤0.1
（规范性附录）
实验室间再现性要求
表E.1实验室间再现性要求
精密度
GB23200.642016
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GB23200.642016
代替SN/T2623—2010
食品安全国家标准
食品中吡丙醚残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
National food safety standards-DeterminationofpyriproxyfenresidueinfoodsLiquid chromatography-mass spectrometry2016-12-18发布
2017-06-18实施
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会中华人民共和国农业部
国家食品药品监督管理总局
GB23200.642016
本标准代替SN/T2623-2010《进出口食品中吡丙醚残留量的检测方法液相色谱一质谱/质谱法》。本标准与SN/T2623-2010相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准名称中“进出口食品”改为“食品”；一标准范围中增加“其它食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：—SN/T2623-2010。
1范围
食品安全国家标准
GB23200.642016
食品中吡丙残留量的测定液相色谱一质谱/质谱法本标准规定了食品中吡丙醚残留量的制样和测定方法。本标准适用于大米、大豆、菠菜、柠檬、茶叶、蘑菇、牛肉、猪肝和牛奶中吡丙醚残留量的检测，其它食品可参照执行。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
试样中残留的吡丙醚在醋酸钠缓冲剂作用下用酸性乙睛提取，再用PSA填料净化，液相色谱-质谱进行测定，外标法定量。
4试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水。4.1试剂
4.1.1无水硫酸镁（MgSO4）。
4.1.2无水乙酸钠（C2H3O2Na）
4.1.3乙酸（C2H4O2）：色谱级。4.1.4乙睛（C2H,N）：色谱级。4.1.5N-丙基乙二胺（PSA）填料：50μm，色谱级。4.1.6甲酸（CH2O2）：色谱级。4.1.7乙酸铵（CHNO2）。
4.2溶液配制
4.2.10.025%甲酸水溶液（含5mmol/L乙酸铵）：准确吸取0.25mL甲酸和称取0.386g乙酸铵于1L容量瓶中，用水溶解并稀释定容至1L。4.2.21%乙酸乙腈溶液。
4.3标准品
4.3.1吡丙醚标准品（Pyriproxyfen，C2HigNO3，CAS：95737-68-1）：纯度>99%。4.4：标准溶液配制
4.4.1吡丙醚标准储备液：准确称取适量的吡丙醚标准品，用乙睛溶解并稀释配制成100μg/mL的标准储备液，4℃以下保存。
4.4.2吡丙醚标准工作液：根据需要，用10%乙睛水溶液稀释成适当浓度的标准工作液，4℃以下保存。
4.5材料
4.5.1微孔滤膜：0.2μm，有机相型。5仪器和设备
5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾（ESI）离子源。5.2离心机：4000r/min
5.3分析天平：感量0.0001g和0.01g。5.4具塞聚丙稀离心管：2mL和50mL。1
5.5粉碎机。
6试样制备与保存
6.1大米、大豆、菠菜、柠檬、茶叶、蘑菇、牛肉、猪肝GB23200.642016
取有代表性样品约500g，用组织捣碎机充分捣碎混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内作为试样。密封，并标明标记。将试样置于-18℃冷冻避光保存。6.2牛奶
取有代表性样品约500g，充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内作为试样，密封，并标明标记。将试样置于低于4℃冷藏避光保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。注：以上样品取样部位按GB2763附录A执行。7分析步骤
7.1提取
7.1.1茶叶、大豆、蘑菇、大米样品称取上述样品5g（精确至0.01g）于50mL聚丙烯塑料离心管中，加10mL水，混匀，静置30min。将离心管置于冰浴中，然后加6g无水硫酸镁和1.5g无水乙酸钠，恢复至室温后，准确加入15.0mL1%乙酸乙腈溶液，振荡提取4min，4000r/min离心5min。7.1.2菠菜、柠檬和牛奶样品
称取15g（精确至0.01g）于预先称有6g无水硫酸镁和1.5g无水乙酸钠的50mL聚丙烯塑料离心管中，将离心管置于冰浴中，恢复至室温后，准确加入15.0mL1%乙酸乙睛溶液，振荡提取4min，4000r/min离心5min。
7.1.3牛肉、猪肝样品
称取15g（精确至0.01g）于50mL聚丙烯塑料离心管中，准确加入15mL1%乙酸乙腈溶液，振荡提取4min，4000r/min离心5min。另取称有6g无水硫酸镁和1.5g无水乙酸钠的50mL聚丙烯塑料离心管，加入10mL水，溶解，待水溶液恢复到室温后，再将乙睛提取液转移至其中，振荡4min，4000r/min离心5min。
7.2净化
取1mL上述乙睛提取液于预先称有50mgPSA和150mg无水硫酸镁的2mL聚丙烯塑料离心管中，振荡提取1min，在4000r/min离心5min。准确吸取200μuL上清液用水定容至1mL，混匀后过0.2μm滤膜。滤液供液相色谱-质谱测定。7.3测定
7.3.1高效液相色谱参考条件
a）色谱柱：色谱柱：CAPCELLPAKC18柱，50mm×2.0mm(i.d.)3um或相当者。流动相：A：0.1%甲酸乙腈溶液，B：0.025%甲酸水溶液（含5mmol/L乙酸铵）。b）
流速：300μL/min，梯度洗脱程序见表1。表1梯度洗脱程序表
梯度时间/min
d）柱温：35℃。
进样量：20μL。
7.3.2质谱参考条件
a）离子源：电喷雾ESI，正离子。流动相A/%
流动相B/%/
b）扫描方式：多反应监测（MRM）。c）其它参数条件见附录A。
7.3.3定量测定
GB23200.642016
根据试样中被测物的含量，选取响应值相近的标准工作液同时进行分析。标准工作液和待测液中吡丙醚的响应值均应在仪器线性响应范围内。在上述色谱条件下的吡丙醚的参考保留时间为1.4min，标准溶液的多反应监测色谱图见附录B。7.3.4定性测定
按照液相色谱一质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液，如果检测的质量色谱峰保留时间与标准品一致，定性离子对的相对丰度是用相对于最强离子丰度的强度百分比表示，应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。
表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对丰度（基峰）
允许的相对偏差
空自实验
>20%至50%
除不加试样外，均按上述测定步骤进行。8结果计算和表述
>10%至20%
用色谱数据处理机或按式（1）计算样品中待测药物残留量。计算结果需扣除空白值AxcxV
式中：
A×mx1000
X一试样中吡丙醚的含量，单位为微克每千克（μg/kg）；A一样液中吡丙醚的峰面积；
c一标准溶液中吡丙醚的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)；V一样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；As一标准溶液中吡丙醚的峰面积：m一最终溶液所代表试样的质量，单位为克（g）；注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。9精密度
≤10%
9.1在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。
9.2在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录E的要求。
10定量限和回收率
10.1定量限
本方法菠菜、柠檬、牛肉、猪肝和牛奶中的定量限为5.0μug/kg本方法大豆、大米、蘑菇和茶叶中的定量限为15.0μg/kg。10.2回收率
不同基质中吡丙醚的添加回收率见附录C。1)
附录A
（资料性附录）
API4000液相色谱一四级杆串联质谱仪参数1)监测离子对及电压、气压参数
离子源温度：350°C；
电喷雾电压：5250V；
碰撞压力：34.475kPa（5psi)；气帘气压力：206.85kPa（30psi）雾化气压力：344.75kPa（50psi)；辅助气压力：413.7kPa(60psi);GB23200.642016
吡丙醚定量离子对、定性离子对、去簇电压（DP）、碰撞气能量（CE）和保留时间见表A.1。表A.1
吡丙醚定量离子对、定性离子对、去簇电压（DP）、碰撞气能量（CE）和保留时间组分名称
吡丙醚
定性离子对m/z
322.2-185.0
322.2→227.2
定量离子对m/z
322.2-185.0
去簇电
碰撞气能量
保留时间
非商业性声明：附录表A.1所列参数是在API4000质谱仪完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器s
附录B
（资料性附录）
吡丙醚多反应监测（MRM）色谱图1.39
Time, min
Time, min
图B.1吡丙醚MRM色谱图
GB23200.642016
322.2>185.0
322.2227.2
样品名称
附录C
（资料性附录）
方法添加浓度及回收率范围
表C.1吡丙醚的添加浓度及回收率范围添加浓度（ug/kg）
平均回收率（%）
89.3~107.3
83.5~101.3
86.3~102.1
81.4~101.8
86.2-103.8
79.7~101.3
70.6~100.4
73.8~103.2
80.1~100.2
83.3~101.3
86.8~108.9
79.1-104.8
77.6~101.8
81.5~113.0
77.7~107.2
80.6~99.8
83.5-106.0
80.5~108.2
81.4~99.4
81.5-103.0
78.2~100.8
83.3~104.7
75.8~103.2
84.0~99.0
84.7~104.0
83.1~106.8
82.9~103.1
精密度（%）
GB23200.642016
被测组分含量
>0.001≤0.01
>0.01≤0.1
（规范性附录）
实验室内重复性要求
表D.1实验室内重复性要求
精密度
GB23200.64—2016
被测组分含量
>0.001≤0.01
>0.01≤0.1
（规范性附录）
实验室间再现性要求
表E.1实验室间再现性要求
精密度
GB23200.642016
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