GB 1886.299-2018
基本信息
标准号： GB 1886.299-2018
中文名称：食品安全国家标准 食品添加剂 冰结构蛋白
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
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出版信息
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标准简介
GB 1886.299-2018 食品安全国家标准 食品添加剂 冰结构蛋白
GB1886.299-2018
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标准内容
中华人民共和国国家标准
GB1886.299—2018
食品安全国家标准
食品添加剂
2018-06-21发布
冰结构蛋白
2018-12-21实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局
1范围bzxz.net
食品安全国家标准
食品添加剂
冰结构蛋白
GB1886.299-—2018
本标准主要适用于以大豆为原料，经酵母（Saccharomycescerevisiae）发酵培养，再经分离、浓缩、精制得到的食品添加剂冰结构蛋白。技术要求
感官要求
感官要求应符合表1的规定。
表1感官要求
浅棕色
检验方法
将适量试样置于清洁、干燥的烧杯中，在自然光线下，观察其色泽和状态
注：测定各指标前，试样应于4℃下解冻约20h，并搅拌均。理化指标
理化指标应符合表2的规定。
理化指标
冰结构蛋白（ISP)含量/(g/L）
灰分，w/%
铅(Pb)/(mg/L)
注：测定各指标前，试样应于4℃下解冻约20h，并搅拌均。2.3
微生物指标
微生物指标应符合表3的规定。
检验方法
附录A中A.3
附录A中A.4
GB5009.75或GB5009.12
菌落总数/（CFU/mL）
大肠菌群/（CFU/mL）
霉菌和酵母菌/（CFU/mL）
沙门氏菌/25mL
单核细胞增生李斯特氏菌/25mL
蜡样芽孢杆菌/（CFU/mL）
微生物指标
不得检出
不得检出
注：测定各指标前，试样应于4℃下解冻约20h，并搅拌均匀。3
储存条件
产品应在一18℃以下储存
GB1886.299—2018
检验方法
GB 4789.2
GB4789.15
GB4789.30
GB4789.14
A.1一般规定
附录A
检验方法
GB1886.299—2018
本标准所用试剂和水在未注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。试验中所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂和制品在未注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602和GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液A.2鉴别试验
液相色谱法
在冰结构蛋白（ISP)含量测定试验中，试样溶液色谱图的主峰保留时间应和标准溶液色谱图的主峰保留时间相一致，参见附录B中图B.1。A.2.2质谱法
分别配制10mg/L的试样溶液和标准溶液，在附录C参考质谱条件下进行测定，两者的分子量应一致.参见附录B中图B.2。
A.3冰结构蛋白（ISP)含量的测定A.3.1试剂和材料
乙睛：色谱纯。
三氟乙酸：纯度≥98%。
冰结构蛋白对照品：纯度≥10%。仪器和设备
A. 3.2. 1
高效液相色谱仪：带二极管阵列检测器。微量进样器：100.0μL。
A.3.2.30.45μm水相滤膜。
参考色谱条件
数）。
色谱柱：C18反相色谱柱（$4.6mm×15cm），填料直径3.5μm；或其他等效的色谱柱检测波长：214nm。
柱温：室温。
流速：1.0mL/min。
进样量：20.0uL。
流动相A：0.05%三氟乙酸水溶液（体积分数）；流动相B：0.05%三氟乙酸乙睛溶液（体积分A.3.3.7
流动相梯度洗脱参数见表A.1。
时间/min
分析步骤
标准溶液系列的制备
流动相梯度洗脱程序表
流动相A/%
GB1886.299—2018
流动相B/%
称取适量冰结构蛋白对照品溶解于水，分别配制实际浓度为50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L和250mg/L的标准溶液系列，用0.45μm水相滤膜过滤。A.3.4.2
试样溶液的制备
移取搅拌均匀试样0.5mL，用水定容至25mL，用0.45μm水相滤膜过滤。A.3.4.3测定
在A.3.3参考色谱条件下，分别对标准溶液系列和试样溶液进行测定，得到冰结构蛋白标准溶液浓度和响应值（峰高或峰面积）的曲线，在曲线上对应试样溶液色谱图的响应值（峰高或峰面积），得到试样溶液中冰结构蛋白的浓度。同时做空白试验。A.3.5
结果计算
冰结构蛋白(ISP）含量wi，单位为克每升（g/L)，按式（A.1)计算：V,x(c-c)
式中：
试样溶液的体积，单位为毫升（mL）)；....(A.1)
由标准曲线获得的试样溶液中冰结构蛋白的浓度，单位为毫克每升（mg/L)：由标准曲线获得的空白溶液中冰结构蛋白的浓度，单位为毫克每升（mg/L)；1000-—体积换算系数；
原始试样的体积，单位为毫升（mL）。试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的10%。
取适量搅拌均匀试样，用校正好的pH计在室温下直接测定。4
附录B
冰结构蛋白对照品参考谱图
B.1冰结构蛋白对照品参考液相色谱图冰结构蛋白对照品参考液相色谱图见图B.1。0. 18
RT:14.84min
GB1886.299—2018
0. 00 1. 00 2. 00 3. 00 4. 00 6. 00 6. 00 7. 00 8. b0 9. 00 10. 00 11. 00 12. 00 13. 00 11. 00 15. 00 16. 00 17. 00 18. 00 19, 00emin
图B.1冰结构蛋白对照品参考液相色谱图B.2冰结构蛋白对照品参考质谱图冰结构蛋白对照品参考质谱图见图B.2。100—
1 170. 1-
+++++++
1 405.0..
1 176,6
冰结构蛋自对照品参考质谱图
1 1 764. 1
参考质谱条件
参考质谱条件如下：
毛细管电压：3000V；
锥孔电压：30V；
提取电压：1V；
透镜电压：0.1V；
源温：100℃；
脱溶剂温度：300℃；
脱溶剂气流速度：350L/h；
锥孔气流速度：20L/h；
低频分辨率：14.0；
高频分辨率：14.0；
电离方式：电喷雾（ESI)；
离子能量：1.0eV；
检测器倍数：650；
低质量区：m/为500；
高质量区：m/z为2000。
参考质谱条件
GB1886.299—2018
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GB1886.299—2018
食品安全国家标准
食品添加剂
2018-06-21发布
冰结构蛋白
2018-12-21实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局
1范围bzxz.net
食品安全国家标准
食品添加剂
冰结构蛋白
GB1886.299-—2018
本标准主要适用于以大豆为原料，经酵母（Saccharomycescerevisiae）发酵培养，再经分离、浓缩、精制得到的食品添加剂冰结构蛋白。技术要求
感官要求
感官要求应符合表1的规定。
表1感官要求
浅棕色
检验方法
将适量试样置于清洁、干燥的烧杯中，在自然光线下，观察其色泽和状态
注：测定各指标前，试样应于4℃下解冻约20h，并搅拌均。理化指标
理化指标应符合表2的规定。
理化指标
冰结构蛋白（ISP)含量/(g/L）
灰分，w/%
铅(Pb)/(mg/L)
注：测定各指标前，试样应于4℃下解冻约20h，并搅拌均。2.3
微生物指标
微生物指标应符合表3的规定。
检验方法
附录A中A.3
附录A中A.4
GB5009.75或GB5009.12
菌落总数/（CFU/mL）
大肠菌群/（CFU/mL）
霉菌和酵母菌/（CFU/mL）
沙门氏菌/25mL
单核细胞增生李斯特氏菌/25mL
蜡样芽孢杆菌/（CFU/mL）
微生物指标
不得检出
不得检出
注：测定各指标前，试样应于4℃下解冻约20h，并搅拌均匀。3
储存条件
产品应在一18℃以下储存
GB1886.299—2018
检验方法
GB 4789.2
GB4789.15
GB4789.30
GB4789.14
A.1一般规定
附录A
检验方法
GB1886.299—2018
本标准所用试剂和水在未注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。试验中所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂和制品在未注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602和GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液A.2鉴别试验
液相色谱法
在冰结构蛋白（ISP)含量测定试验中，试样溶液色谱图的主峰保留时间应和标准溶液色谱图的主峰保留时间相一致，参见附录B中图B.1。A.2.2质谱法
分别配制10mg/L的试样溶液和标准溶液，在附录C参考质谱条件下进行测定，两者的分子量应一致.参见附录B中图B.2。
A.3冰结构蛋白（ISP)含量的测定A.3.1试剂和材料
乙睛：色谱纯。
三氟乙酸：纯度≥98%。
冰结构蛋白对照品：纯度≥10%。仪器和设备
A. 3.2. 1
高效液相色谱仪：带二极管阵列检测器。微量进样器：100.0μL。
A.3.2.30.45μm水相滤膜。
参考色谱条件
数）。
色谱柱：C18反相色谱柱（$4.6mm×15cm），填料直径3.5μm；或其他等效的色谱柱检测波长：214nm。
柱温：室温。
流速：1.0mL/min。
进样量：20.0uL。
流动相A：0.05%三氟乙酸水溶液（体积分数）；流动相B：0.05%三氟乙酸乙睛溶液（体积分A.3.3.7
流动相梯度洗脱参数见表A.1。
时间/min
分析步骤
标准溶液系列的制备
流动相梯度洗脱程序表
流动相A/%
GB1886.299—2018
流动相B/%
称取适量冰结构蛋白对照品溶解于水，分别配制实际浓度为50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L和250mg/L的标准溶液系列，用0.45μm水相滤膜过滤。A.3.4.2
试样溶液的制备
移取搅拌均匀试样0.5mL，用水定容至25mL，用0.45μm水相滤膜过滤。A.3.4.3测定
在A.3.3参考色谱条件下，分别对标准溶液系列和试样溶液进行测定，得到冰结构蛋白标准溶液浓度和响应值（峰高或峰面积）的曲线，在曲线上对应试样溶液色谱图的响应值（峰高或峰面积），得到试样溶液中冰结构蛋白的浓度。同时做空白试验。A.3.5
结果计算
冰结构蛋白(ISP）含量wi，单位为克每升（g/L)，按式（A.1)计算：V,x(c-c)
式中：
试样溶液的体积，单位为毫升（mL）)；....(A.1)
由标准曲线获得的试样溶液中冰结构蛋白的浓度，单位为毫克每升（mg/L)：由标准曲线获得的空白溶液中冰结构蛋白的浓度，单位为毫克每升（mg/L)；1000-—体积换算系数；
原始试样的体积，单位为毫升（mL）。试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的10%。
取适量搅拌均匀试样，用校正好的pH计在室温下直接测定。4
附录B
冰结构蛋白对照品参考谱图
B.1冰结构蛋白对照品参考液相色谱图冰结构蛋白对照品参考液相色谱图见图B.1。0. 18
RT:14.84min
GB1886.299—2018
0. 00 1. 00 2. 00 3. 00 4. 00 6. 00 6. 00 7. 00 8. b0 9. 00 10. 00 11. 00 12. 00 13. 00 11. 00 15. 00 16. 00 17. 00 18. 00 19, 00emin
图B.1冰结构蛋白对照品参考液相色谱图B.2冰结构蛋白对照品参考质谱图冰结构蛋白对照品参考质谱图见图B.2。100—
1 170. 1-
+++++++
1 405.0..
1 176,6
冰结构蛋自对照品参考质谱图
1 1 764. 1
参考质谱条件
参考质谱条件如下：
毛细管电压：3000V；
锥孔电压：30V；
提取电压：1V；
透镜电压：0.1V；
源温：100℃；
脱溶剂温度：300℃；
脱溶剂气流速度：350L/h；
锥孔气流速度：20L/h；
低频分辨率：14.0；
高频分辨率：14.0；
电离方式：电喷雾（ESI)；
离子能量：1.0eV；
检测器倍数：650；
低质量区：m/为500；
高质量区：m/z为2000。
参考质谱条件
GB1886.299—2018
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