本标准规定了化妆品中氨基酸含量的苟三酮比色测定法。本标准适用于化妆品中蛋白质及其水解液、氨基酸含量的测定。本方法最小检测浓度为0.01%。 QB/T 2409-1998 化妆品中氨基酸含量的测定 QB/T2409-1998 标准下载解压密码：www.bzxz.net

QB/T2409--1998
本标准是按GB/T1.1—1993《标准化工作导则准编写的基本规定》进行编写。言
第1单元：标准的起草与表述规则第1部分：标
本标准是根据氨基酸在一定pH条件下，与节三酮反应生成蓝紫色化合物进行比色定量原理而制定的。
本标准由国家轻工业局行业管理司提出。本标准由全国化妆品标准化中心归口。本标准起草单位：上海市日用化学工业研究所。本标准主要起草人：甘平平、孔佳华、潘海燕、汤智凌。108
1范围
中华人民共和国轻工行业标准
化妆品中氨基酸含量的测定
本标准规定了化妆品中氨基酸含量的节三酮比色测定法。本标准适用于化妆品中蛋白质及其水解液、氨基酸含量的测定。本方法最小检测浓度为 0.01%。2引用标准
QB/T 2409-—1998
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T8170-1987数值修约规则
3原理
蛋白质物质经水解成氨基酸，而氮基酸在定的pH条件下，与三酮反应生成蓝紫色化合物，对其进行比色定量测定，从而计算出相应的氮基酸含量。4试剂
分析中应使用分析纯(AR)试剂，试验用水应为蒸馏水或纯度相当的水。4. 1 2%三酮溶液
称取节三酮(HG3-984)1.0g，溶于一定量热水中，待冷却后定容至50ml。该溶液每隔（2～3)天需重新配制。
4.2磷酸盐缓冲溶液（pH=8.04）4.2.11/15mol/L磷酸二氢钾溶液称取磷酸二氢钾(GB/T 1274)9.070g，溶于水中后定容至 1L。4.2.21/15mol/L磷酸氢二钠溶液称取磷酸氢二钠(GB/T1263)23.876g，溶于水中后定容至1L。4.2.3取4.2.1溶液5.0mL于100mL容量瓶中，用4.2.2溶液稀释至刻度，摇匀。4.3盐酸（GB/T622)6mol/L溶液
4.4氨基酸标准溶液（200μg/mL）准确称取白氨酸（L-Leucine含量不小于98%）0.2000g，用水溶解并定容至100ml，摇勾后再吸取10mL于100mL容量瓶中加水稀释至刻度。4.5蜡块
蜂蜡与石蜡之比为1：9。
5仪器
5.1分光光度计：波长范围400nm～700nm。国家轻工业局1998-11-25批准
TiKAoNniKAca
1999-06-01实施
5.2酸度计：分度值0.02。
5.3电磁搅拌器。
容量瓶：100，1000mL
移液管：1,2,5,10mL。
5.6水浴锅。
试管：30mm×200mm。
5.8分析天平：分度值0.0001g。5.9刻度试管：25，100mL。
烧杯：100ml。
6测定步骤
6.1标准曲线的绘制
QB/T 2409--1998
准确移取氨基酸标准溶液0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL（相当于氨基酸0,40,80120,160,200μg）分别置于25mL刻度试管中，加水补充至4mL，然后各加入2%节三酮溶液和磷酸盐缓冲溶液各1mL，摇勾。置沸水浴中加热15min，取出冷却至室温，加水至刻度，摇匀。静置15min，用分光光度计在570nm波长下以水作参比，用1cm比色血测定试液的吸光度，绘制吸光度对氨基酸含量(μg)的标准曲线。6.2样品前处理
准确称取样品约5g（准确至0.001g）于试管，加人6mol/L盐酸溶液约10ml~~20mL于沸水浴中水解约6h（对乳化体可先将试样置于沸水浴中破乳1h～2h）。加人约1g～2g蜡块约30min后，取出试管冷却。去除蜡块，将溶液移至100mL烧杯中，在酸度计上用碱液调节pH至7.5~8.0,再将溶液移入100mL容量瓶中并加水稀释至刻度，摇匀待用。6.3测定
移取试液（6.2)1mL～4mL置于25mL刻度试管中，以下按6.1测定步骤进行。测得吸光度，通过标准曲线计算氨基酸的含量,同时做一空白样。结果囊示免费标准bzxz.net
样品中氨基酸含量(以白氨酸计)按式(1)进行计算：(C/-C。) X 100/V
氨基酸含量(%)二
mX10°
式中：C—从标准曲线上查得样品的氨基酸的量，g，Co
从标准曲线上查得空白样的数值，ug；-移取样品溶液的量，mL；
一样品量·g。
所得结果按GB/T8170修约用两位小数表示。8精密度
两次平行测定结果之差应不大于其平均值的10%。110
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