GB/T 40175.2-2021
基本信息
标准号： GB/T 40175.2-2021
中文名称：纺织品生物化学分析方法第2部分:拟除虫菊酯类农药(酶联免疫法)
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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相关标签： 纺织品 生物 化学分析 方法 除虫菊 酯类 农药 免疫
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
GB/T 40175.2-2021.Texiles-Metheds of biochemical analysis-Part 2:Pyrethroid pesticides (enxyme-linked imunesorbent assay).
纺织品 生物化学分析方法
第2部分:拟除虫菊酯类农药(酶联免疫法)
警示:使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关法规规定的条件。
1范围
本文件规定了纺织品中甲氰菊酯、溴氰菊酯、氣氰菊酯、高效氯氰菊酯、氟氣氰菊酯、氯丙菊酯、苯醚氰菊酯七种拟除虫菊酯类农药残留量的酶联免疫检测方法。
GB/T 40175.2纺织品生物化学分析方法第2部分:拟除虫菊酯类农药(酶联免疫法)适用于各种纺织品。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
试样中的拟除虫菊酯类农药与试剂盒中已包被在微孔板上的拟除虫菊酯类农药抗原竞争性结合拟除虫菊酯类农药抗体，再加人酶标二抗,在微孔板上形成抗原-一抗-酶标二抗复合物。复合物与显色剂发生反应,用酶标仪测定吸光度值。吸光度值与试样中的农药残留量呈负相关。
5试剂与材料
所用试剂应均为分析纯水为符合GB/T 6682规定的三级水。
5.1拟除虫菊酯类农药测定酶联免疫试剂盒:附录A给出了一种拟除虫菊酯类农药测定酶联免疫试剂盒示例,试剂盒组成如下:
a)酶标板。
b)拟除虫菊酯类抗体工作溶液。
c)酶标二抗。
纺织品 生物化学分析方法
第2部分:拟除虫菊酯类农药(酶联免疫法)
警示:使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关法规规定的条件。
1范围
本文件规定了纺织品中甲氰菊酯、溴氰菊酯、氣氰菊酯、高效氯氰菊酯、氟氣氰菊酯、氯丙菊酯、苯醚氰菊酯七种拟除虫菊酯类农药残留量的酶联免疫检测方法。
GB/T 40175.2纺织品生物化学分析方法第2部分:拟除虫菊酯类农药(酶联免疫法)适用于各种纺织品。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
试样中的拟除虫菊酯类农药与试剂盒中已包被在微孔板上的拟除虫菊酯类农药抗原竞争性结合拟除虫菊酯类农药抗体，再加人酶标二抗,在微孔板上形成抗原-一抗-酶标二抗复合物。复合物与显色剂发生反应,用酶标仪测定吸光度值。吸光度值与试样中的农药残留量呈负相关。
5试剂与材料
所用试剂应均为分析纯水为符合GB/T 6682规定的三级水。
5.1拟除虫菊酯类农药测定酶联免疫试剂盒:附录A给出了一种拟除虫菊酯类农药测定酶联免疫试剂盒示例,试剂盒组成如下:
a)酶标板。
b)拟除虫菊酯类抗体工作溶液。
c)酶标二抗。
标准图片预览
标准内容
ICS59.080.01
CCS W 04
中华人民共和国国家标准
GB/T 40175.2—2021
纺织品
生物化学分析方法
第2部分：拟除虫菊酯类农药（酶联免疫法）Textiles-Methods of biochemical analysis-Part 2: Pyrethroid pesticides (enzyme-linked immunosorbent assay)2021-05-21发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-12-01实施
GB/T40175.2—2021
本文件按照GB/T1.12020%标准化工作导则厂第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。
本文件是GB/140175%纺织品
生物化学分析方法》的第2部分。GB/140175已经发布了以下部分：
第1部分：镉和钳（胶体金法）；第2部分：拟除虫菊酯类农药（酶联免疫法)：第3部分：有机磷类农（酶联免疫法）。本文件由中国纺织业联合会提出。本文件由全国纺织品标准化技术委员会（SAC/TC209)归口：本义件起草单位：江南大学、上海天祥质量技术服务有限公司、南京海关1业产品检测中心、纺织1业标准化研究所、南京师范人学、南京海关动植食产品检测中心，江苏省检验检疫科学技术研究院、晋江中纺标检测有限公司。
本文件主要起草人：胥传来、1建平、侯建军、斯颖、章辉、刘丽强、吴丽娜、唐泰山、蔡建和，I
rrKaeerkAca-
纺织品生物化学分析方法
GB/T40175.2—2021
第2部分：拟除虫菊酯类农药（酶联免疫法）警示：使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验，本文件并未指出所有可能的安全问题使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件！1范围
本文件观定了纺织品叶中氙菊酯、溴式菊酯、氯菊酯、高效氯氨菊酯、氟氯乱菊酯、氯丙菊酯、米醚氰菊酷七种拟除虫菊酯类农药戏留量的酶联免疫检测方法。本文件适用于各种纺织品
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。共中.注日期的引用文件.仅该口期对应的版本适用于本义件：不注口期的引用文件，其最新版本(包括所有的修收单)适用于本文件
GB/6682分析实验牢用水规格和试验方法3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义，4原理
试样中的拟除虫翁酯类农药与试剂盒中已包被在微孔板上的拟除虫菊酯类农药抗原竞争性结合拟除虫菊酷类农药抗体，再加人酶标二抗，在微孔板上形成抗原-抗酶标二抗复合物。复合物与显色剂发生度监，用酶标仪测定吸光度值，吸光度值与试样中的农药残留基呈负相关：5试剂与材料
所用试剂应均为分析纯，水为符合GB/6682规定的级水。5.1拟除虫菊酯类农药测定酶联免疫试剂盒：附录A给出了-种拟除虫菊酯类农药测定酶联免疫试剂盒示例，试剂盒纠成如下：
a）梅标板。
b）拟除虫酯类抗体工作溶液，
翰标二抗,
）甲氙菊酯标准工作溶液：可使用试剂盒中提供的标准工作溶液，也可按如下方法配制。准确称收50.0mg中氙菊酯标准物质（CAS号：61257-81-7.纯度99%）丁100mL容量瓶中，加人少量中婷（5.6）溶解后，用中醇定容至刻度，浓度为500.01%/1.然后根据需要的系列标准溶液工作浓度进行稀释。
底物A液：每升包个13.6酷酸钠、1.6*柠檬酸、0.3mL过氧化氢（30%)的水溶液e
底物B液：每升包含13.6g酷酸钠.1.6g柠檬酸、0.2g3.3.5,5°-四甲基联苯胺的水溶液1
rKaeerkAca-
GB/T40175.2—2021
终止液：每升包含31.3ml浓硫酸（98%）的水溶液。h）浓缩洗涤液：10倍浓缩，每升包含0.5g磷酸二氢钠、6.0g磷酸氢二钠、16.0g氯化钠、0.5mL叫温20的水溶液。
5.2洗涤液：使用前将浓缩洗涤液5.1h)按照体积比1：9加水稀释(1份浓缩洗涤液－9份水）。5.3显色液：将底物A液5.1）和底物B液5.1使用前按体积比1：1混合。5.4正己烷。
5.5石汕醚，
甲醇，
5.7磷酸盐缓冲溶液（0.01m0l/1.)：在800tml.去离子水小溶解8.0g氯化钠、0.2g氯化钾、1.44g磷酸氢二钠和0.24g磷酸二氢钾，用0.0lmo1/L盐酸调节溶液的pH值至7.4，加水定容至1000mL5.8甲醇-磷酸盐缓冲溶液：按照体积比1：4将甲醇与缓冲溶液（5.7)混列。6设备仪器和器血
6.1酶标仪：波长450mm。
天平：感量0.1g和0.0001g
6.3微量可调移液器及配套吸头：50μ、100L，1000μ6.4可控温的超声波浴：工作频率为40kHz.控温精度为士5℃.。6.5氮吹仪
烘箱：控温精度为土1。
pl1计：配备玻破璃电极，测量精度至少精确到0.1：6.7
7试验步骤
7.1试样前处理
称取5g代表性的试样，剪辨至5mm入5mm以下.泥勾：从混合样中称取约1.0g试样.皆于50ml带旋盖的离心市。准确加入20ml.体积比为1：1的正已烷（5.4）和石油醚（5.5）混合溶剂，置于45℃的超声波浴（6.4)中苯取30mi，取1mL萃取液，氮气吹十，用100μL中醇磷酸盐缓冲济液(5.8)复溶，待测。
7.2酶联免疫检测
7.2.1测试前需要将所有试剂放置至室温(20℃~25)后方可使用7.2.2取系列中菊酯标准工作溶液5.1d)和得测样品溶液（7.1）各50M1.分别加人至相应的酶标板5.1a)孔中，每个溶液平行测试2个，然后再分别加人50L拟除页翁类抗体T作溶液3.1b），在烘箱(6.6)37C反应30minl
7.2.3个去孔中液休，并将酶标板5.1a)剩余残液在吸水纸上拍1，每孔注满洗涤液（5.2）.轻轻振荡放置2tmin.弃去孔中液体，并在吸水纸拍干，重复洗涤4次。7.2.4在每孔中加入50μL酶标抗5.1c)，在烘箱（6.6)中丁37℃下反应30min.7.2.5弃去孔中的液体，并将酶标板剩余残液在吸水纸上拍干，每孔注满稀洗涤液（5.2).轻轻振荡，放置2 min.充去孔中液休，并在吸水纸上拍下.重复洗涤4次。7.2.6在每孔中加入50uL显色液（5.3），在烘箱（6.6)中于37C下避光显色15mim7.2.7在每孔中加入50L.终止液5.1g)以终止反应，」10min内用波长450nm的酶标仪(6.1)测定吸光度值。
7.3空白试验
在不加试样的情况下，按上述步骤进行试验2
-riKacerKAca-
8结果计算与表达
8.1相对吸光度值的计算
GB/T40175.2—2021
分别计算标准溶液和样品溶液的平均吸光度值。按公式（1)计算标准溶液或样品济液的机对吸光度值。
式中：
相对吸光度值；
系列标准作溶液或样品济液的平均吸光度值；0g/I.标准工作溶液的平均吸光度值。8.2绘制标准工作曲线
以和对吸光度值为纵坐标（关），标准1作济液浓度（u/L)的对数值为横坐标，绘制标准1作曲线每次试验均应绘制标准工作曲线。8.3结果计算
从7.2绘制的标准曲线上读取样品溶液相对吸光度值所对应的拟除虫菊酯类农药浓度。按公式(2)计算试样中的拟除虫菊酯类农药的含量。X=20xeXv
式中：
试样中拟除虫菊酯类农药的含量单位为微克每千克(g/kg)：从标雅1.作曲线上得到的试样中拟除虫箱酷类农药浓度，单位为微克每升（/L）：复溶后样品溶液体积，单位为毫升（ml)；试样质量，单位为克（g）。
计算结果应扣除空口,精确至，-位小数。如被测试样中拟除虫菊酯类农药个量小丁0/k名·则结果表示为末检山：如个量超过或等丁10μg/kg，则结果为实测值，宜使用GB/T18112.1中规定的方法或其他仪器分析方法再进行检测。9检出限
以中氛菊酯计.检出限为10 ug/kg.10试验报告
试验报告至少应给出下述内容：）本文件的编号：
b）样品来源及述：
(）测试结果：
d）试验口期：
任何偏离木文件的细节，
-rKaeerkAca-
GB/T40175.2—2021
试剂盒组成
试剂盒纠成如下：
酶标板96孔
附录A
（资料性）
拟除虫菊酯类农药酶联免疫试剂盒示例拟除虫菊酯类抗试剂（一抗）
拟除虫菊酯类酶标物（抗)
-甲氙菊酯标准液(0mg/11ug/1..5μg/l、50ug/1.100ug/1.1000pg/[)底物液A液
—底物液B液
终止液
浓缩洗涤液（10倍浓缩）
试剂盒的保存
本试剂盒在一2℃～8℃的温度下储存,有效期为1年。如果超过3个月不使用试剂盒将抗利
二抗放置20℃保存，
试剂盒交叉反应性
见表A.1
试剂盒交叉反应性
农药名称
甲菊脂
浪尔菊脂
氯京菊酯
高效氯鼠菊酯
激煮氰菊脂bzxZ.net
氨内菊酯
苯酸鼠菊酯
CAS号
84257-847
52318635
52315-017-8
85731-81-2
68359375
103833-18-7
38a1a-40-7
-rrKaeerKAca-
交反应率/%
GB/-18412.4
纺织品
参考文献
GB/T40175.2—2021
第4部分：拟除虫菊酯农药
农药残留量的测定
-rKaeerkca-
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CCS W 04
中华人民共和国国家标准
GB/T 40175.2—2021
纺织品
生物化学分析方法
第2部分：拟除虫菊酯类农药（酶联免疫法）Textiles-Methods of biochemical analysis-Part 2: Pyrethroid pesticides (enzyme-linked immunosorbent assay)2021-05-21发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-12-01实施
GB/T40175.2—2021
本文件按照GB/T1.12020%标准化工作导则厂第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。
本文件是GB/140175%纺织品
生物化学分析方法》的第2部分。GB/140175已经发布了以下部分：
第1部分：镉和钳（胶体金法）；第2部分：拟除虫菊酯类农药（酶联免疫法)：第3部分：有机磷类农（酶联免疫法）。本文件由中国纺织业联合会提出。本文件由全国纺织品标准化技术委员会（SAC/TC209)归口：本义件起草单位：江南大学、上海天祥质量技术服务有限公司、南京海关1业产品检测中心、纺织1业标准化研究所、南京师范人学、南京海关动植食产品检测中心，江苏省检验检疫科学技术研究院、晋江中纺标检测有限公司。
本文件主要起草人：胥传来、1建平、侯建军、斯颖、章辉、刘丽强、吴丽娜、唐泰山、蔡建和，I
rrKaeerkAca-
纺织品生物化学分析方法
GB/T40175.2—2021
第2部分：拟除虫菊酯类农药（酶联免疫法）警示：使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验，本文件并未指出所有可能的安全问题使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件！1范围
本文件观定了纺织品叶中氙菊酯、溴式菊酯、氯菊酯、高效氯氨菊酯、氟氯乱菊酯、氯丙菊酯、米醚氰菊酷七种拟除虫菊酯类农药戏留量的酶联免疫检测方法。本文件适用于各种纺织品
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。共中.注日期的引用文件.仅该口期对应的版本适用于本义件：不注口期的引用文件，其最新版本(包括所有的修收单)适用于本文件
GB/6682分析实验牢用水规格和试验方法3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义，4原理
试样中的拟除虫翁酯类农药与试剂盒中已包被在微孔板上的拟除虫菊酯类农药抗原竞争性结合拟除虫菊酷类农药抗体，再加人酶标二抗，在微孔板上形成抗原-抗酶标二抗复合物。复合物与显色剂发生度监，用酶标仪测定吸光度值，吸光度值与试样中的农药残留基呈负相关：5试剂与材料
所用试剂应均为分析纯，水为符合GB/6682规定的级水。5.1拟除虫菊酯类农药测定酶联免疫试剂盒：附录A给出了-种拟除虫菊酯类农药测定酶联免疫试剂盒示例，试剂盒纠成如下：
a）梅标板。
b）拟除虫酯类抗体工作溶液，
翰标二抗,
）甲氙菊酯标准工作溶液：可使用试剂盒中提供的标准工作溶液，也可按如下方法配制。准确称收50.0mg中氙菊酯标准物质（CAS号：61257-81-7.纯度99%）丁100mL容量瓶中，加人少量中婷（5.6）溶解后，用中醇定容至刻度，浓度为500.01%/1.然后根据需要的系列标准溶液工作浓度进行稀释。
底物A液：每升包个13.6酷酸钠、1.6*柠檬酸、0.3mL过氧化氢（30%)的水溶液e
底物B液：每升包含13.6g酷酸钠.1.6g柠檬酸、0.2g3.3.5,5°-四甲基联苯胺的水溶液1
rKaeerkAca-
GB/T40175.2—2021
终止液：每升包含31.3ml浓硫酸（98%）的水溶液。h）浓缩洗涤液：10倍浓缩，每升包含0.5g磷酸二氢钠、6.0g磷酸氢二钠、16.0g氯化钠、0.5mL叫温20的水溶液。
5.2洗涤液：使用前将浓缩洗涤液5.1h)按照体积比1：9加水稀释(1份浓缩洗涤液－9份水）。5.3显色液：将底物A液5.1）和底物B液5.1使用前按体积比1：1混合。5.4正己烷。
5.5石汕醚，
甲醇，
5.7磷酸盐缓冲溶液（0.01m0l/1.)：在800tml.去离子水小溶解8.0g氯化钠、0.2g氯化钾、1.44g磷酸氢二钠和0.24g磷酸二氢钾，用0.0lmo1/L盐酸调节溶液的pH值至7.4，加水定容至1000mL5.8甲醇-磷酸盐缓冲溶液：按照体积比1：4将甲醇与缓冲溶液（5.7)混列。6设备仪器和器血
6.1酶标仪：波长450mm。
天平：感量0.1g和0.0001g
6.3微量可调移液器及配套吸头：50μ、100L，1000μ6.4可控温的超声波浴：工作频率为40kHz.控温精度为士5℃.。6.5氮吹仪
烘箱：控温精度为土1。
pl1计：配备玻破璃电极，测量精度至少精确到0.1：6.7
7试验步骤
7.1试样前处理
称取5g代表性的试样，剪辨至5mm入5mm以下.泥勾：从混合样中称取约1.0g试样.皆于50ml带旋盖的离心市。准确加入20ml.体积比为1：1的正已烷（5.4）和石油醚（5.5）混合溶剂，置于45℃的超声波浴（6.4)中苯取30mi，取1mL萃取液，氮气吹十，用100μL中醇磷酸盐缓冲济液(5.8)复溶，待测。
7.2酶联免疫检测
7.2.1测试前需要将所有试剂放置至室温(20℃~25)后方可使用7.2.2取系列中菊酯标准工作溶液5.1d)和得测样品溶液（7.1）各50M1.分别加人至相应的酶标板5.1a)孔中，每个溶液平行测试2个，然后再分别加人50L拟除页翁类抗体T作溶液3.1b），在烘箱(6.6)37C反应30minl
7.2.3个去孔中液休，并将酶标板5.1a)剩余残液在吸水纸上拍1，每孔注满洗涤液（5.2）.轻轻振荡放置2tmin.弃去孔中液体，并在吸水纸拍干，重复洗涤4次。7.2.4在每孔中加入50μL酶标抗5.1c)，在烘箱（6.6)中丁37℃下反应30min.7.2.5弃去孔中的液体，并将酶标板剩余残液在吸水纸上拍干，每孔注满稀洗涤液（5.2).轻轻振荡，放置2 min.充去孔中液休，并在吸水纸上拍下.重复洗涤4次。7.2.6在每孔中加入50uL显色液（5.3），在烘箱（6.6)中于37C下避光显色15mim7.2.7在每孔中加入50L.终止液5.1g)以终止反应，」10min内用波长450nm的酶标仪(6.1)测定吸光度值。
7.3空白试验
在不加试样的情况下，按上述步骤进行试验2
-riKacerKAca-
8结果计算与表达
8.1相对吸光度值的计算
GB/T40175.2—2021
分别计算标准溶液和样品溶液的平均吸光度值。按公式（1)计算标准溶液或样品济液的机对吸光度值。
式中：
相对吸光度值；
系列标准作溶液或样品济液的平均吸光度值；0g/I.标准工作溶液的平均吸光度值。8.2绘制标准工作曲线
以和对吸光度值为纵坐标（关），标准1作济液浓度（u/L)的对数值为横坐标，绘制标准1作曲线每次试验均应绘制标准工作曲线。8.3结果计算
从7.2绘制的标准曲线上读取样品溶液相对吸光度值所对应的拟除虫菊酯类农药浓度。按公式(2)计算试样中的拟除虫菊酯类农药的含量。X=20xeXv
式中：
试样中拟除虫菊酯类农药的含量单位为微克每千克(g/kg)：从标雅1.作曲线上得到的试样中拟除虫箱酷类农药浓度，单位为微克每升（/L）：复溶后样品溶液体积，单位为毫升（ml)；试样质量，单位为克（g）。
计算结果应扣除空口,精确至，-位小数。如被测试样中拟除虫菊酯类农药个量小丁0/k名·则结果表示为末检山：如个量超过或等丁10μg/kg，则结果为实测值，宜使用GB/T18112.1中规定的方法或其他仪器分析方法再进行检测。9检出限
以中氛菊酯计.检出限为10 ug/kg.10试验报告
试验报告至少应给出下述内容：）本文件的编号：
b）样品来源及述：
(）测试结果：
d）试验口期：
任何偏离木文件的细节，
-rKaeerkAca-
GB/T40175.2—2021
试剂盒组成
试剂盒纠成如下：
酶标板96孔
附录A
（资料性）
拟除虫菊酯类农药酶联免疫试剂盒示例拟除虫菊酯类抗试剂（一抗）
拟除虫菊酯类酶标物（抗)
-甲氙菊酯标准液(0mg/11ug/1..5μg/l、50ug/1.100ug/1.1000pg/[)底物液A液
—底物液B液
终止液
浓缩洗涤液（10倍浓缩）
试剂盒的保存
本试剂盒在一2℃～8℃的温度下储存,有效期为1年。如果超过3个月不使用试剂盒将抗利
二抗放置20℃保存，
试剂盒交叉反应性
见表A.1
试剂盒交叉反应性
农药名称
甲菊脂
浪尔菊脂
氯京菊酯
高效氯鼠菊酯
激煮氰菊脂bzxZ.net
氨内菊酯
苯酸鼠菊酯
CAS号
84257-847
52318635
52315-017-8
85731-81-2
68359375
103833-18-7
38a1a-40-7
-rrKaeerKAca-
交反应率/%
GB/-18412.4
纺织品
参考文献
GB/T40175.2—2021
第4部分：拟除虫菊酯农药
农药残留量的测定
-rKaeerkca-
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