GB/T 40175.3-2021
基本信息
标准号： GB/T 40175.3-2021
中文名称：纺织品生物化学分析方法第3部分:有机磷类农药(酶联免疫法)
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
下载格式：.zip .pdf
下载大小：4142096
相关标签： 纺织品 生物 化学分析 方法 有机磷类 农药 免疫
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
GB/T 40175.3-2021.Textiles- Methods of biochemical analysis- Part 3 :Organophosphorus pesticide ( enzyme-linked immunosorbent assay).
1范围
GB/T 40175.3规定了纺织品中甲基对硫磷、甲基对氧磷、杀螟硫磷、倍硫磷四种有机磷类农药残留量的酶联免疫检测方法。
GB/T 40175.3适用于各种纺织品。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
试样中的有机磷类农药与试剂盒中已包被在酶标板上的有机磷类农药抗原竞争性结合有机磷类农药抗体,再加人酶标二抗,在酶标板上形成抗原-一抗-酶标二抗复合物。复合物与显色剂发生反应,用酶标仪测定吸光度值。吸光度值与试样中的农药残留量呈负相关。
5试剂与材料
所用试剂应均为分析纯,水为符合GB/T 6682规定的三级水。
5.1有机磷类农药测定酶联免疫试剂盒:附录A给出了一种有机磷类农药酶联免疫试剂盒示例，试剂盒组成如下:
a) 酶标板。
b) 有机磷类抗体工作溶液。
c) 酶标二抗。
1范围
GB/T 40175.3规定了纺织品中甲基对硫磷、甲基对氧磷、杀螟硫磷、倍硫磷四种有机磷类农药残留量的酶联免疫检测方法。
GB/T 40175.3适用于各种纺织品。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
试样中的有机磷类农药与试剂盒中已包被在酶标板上的有机磷类农药抗原竞争性结合有机磷类农药抗体,再加人酶标二抗,在酶标板上形成抗原-一抗-酶标二抗复合物。复合物与显色剂发生反应,用酶标仪测定吸光度值。吸光度值与试样中的农药残留量呈负相关。
5试剂与材料
所用试剂应均为分析纯,水为符合GB/T 6682规定的三级水。
5.1有机磷类农药测定酶联免疫试剂盒:附录A给出了一种有机磷类农药酶联免疫试剂盒示例，试剂盒组成如下:
a) 酶标板。
b) 有机磷类抗体工作溶液。
c) 酶标二抗。
标准图片预览
标准内容
ICS 59.080.01
CCS W 04
中华人民共和国国家标准
GB/T40175.3—2021
纺织品生物化学分析方法
第3部分：有机磷类农药（酶联免疫法）TextilesMethods of biochemical analysis-Part 3 :Organophosphoruspesticide (enzyme-linked immunosorbent assay)2021-05-21发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-12-01实施
GB/T40175.3—2021
本文件按照GB/T1.12020%标准化工作导则厂第1部分：标准化文件的结构利起草规则》的规定起草。
本文件是GB/140175%纺织品
生物化学分析方法》的第3部分。GB/T40175已经发布了以下部分：
第1部分：镉和铅(胶体金法)；
第2部分：拟除虫菊酯类农药（酶联免疫法）：第3部分：有机磷类农药(酶联免疫法)。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承扭识别专利的责任。本文件由中国纺织工业联合会提出，本文件山全国纺织品标准化技术委员会（SAC/TC209)口：本文件起草单位：南京海关工业产品检测中心、江南大学、中纺标(深圳)检测有限公司、南京帅范人学南京海关动植食产品检测中心、上海天祥质量技术服务有限公司、江苏省检验检疫科学技术研充院，普江中纺标检测有限公司、纺织1业标准化研究所本文件主要起草人：昊丽娜、压华、唐泰山、周静珠、刘丽强、周佳、斯颚、主建平、繁建和I
rrKaeerkAca-
纺织品生物化学分析方法
第3部分：有机磷类农药（酶联免疫法GB/T40175.3—2021
警示：使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验，本文件并未指出所有可能的安全问题使用者有责任采取适当的安全和健康措施.并保证符合国家有关法规规定的条件1范围
本文件期定了纺织品山中基对硫磷、中基对氧磷，杀感硫磷、倍硫磷四种有磷类农药残留量的施联免疫检测方法。
本文件适用于各种纺织品。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的舰范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，注口期的引用文件，仅该口期对应的版本适用于本文件：不注口期的引用文件，其最新版本（包括所有的修收单）适用于本文件
GB6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义
本文件没有需要界定的术语利定义。4原理
试样中的有机磷类农药与试剂盒中已包被在酶标板上的有机磷类农药抗原竞争性结合有机磷类农药抗体，再加人酶标一抗，在酶标板上形成抗原-一抗-酶标一抗复合物。复合物与显色剂发生反应.用酶标仪测定吸光度值。吸光度值与试样中的农药残留量品负相关5试剂与材料
所用试剂均为分析纯.水为符合GB/6682规定的三级水5.1有机磷类农纳测定酶联免疫试剂盒：附录A给出了一种有机磷类农纳酶联免疫试剂盒示例，试剂盒组成如下：
a）骗标板：
b）有机磷类抗体作溶液，
莓标二抗。
中基对硫磷标准下作溶液：可使用试剂盒小提供的标准工作溶液，也可按如下方法配制准确称取50.0mg中基对硫磷标准品（CAS号298-00-0.纯度99不）置于100ml容量瓶加人少基币醇（5.6)溶解后，用甲醇定容至刻度.浓度为500.0mg/L。然盾根据需要的系列标1
rKaeerkAca-
GB/T40175.3—2021
准溶液工作浓度进行稀释。
底物A液：每升包含13.6%醋酸钠、1.6%柠檬酸、0.3mL过氧化氢（30不）的水济液底物B液：每升包含13.6g酷酸钠、1.6g柠檬酸、0.2g3,3°5.5'-四甲基联苯胺的水溶液。终止液：每包含54.3mL浓硫酸（98%）的水溶液。浓缩洗涤液：10倍浓缩，每升包含0.5g磷酸二氢钠、6.0g磷酸氢二钠、16.0g氯化钠、0.5mL吐h
温-20的水溶液。
2洗涤液：使用前将浓缩洗涤液5.1h)按照体积比1：9加水稀释（1份浓缩洗涤液19份水）。5.2
5.3显色液：使用前将底物A液5.1e)和底物B液5.1「)按体积比1：1混合。5.4正己烧。
5.5乙酸乙酯。
5.6中醇。
5.7磷酸盐缓冲溶液（0.01mol/L）：在800mL去离子水中溶解8.0g氯化钠0.2g氯化钾、1.44g磷酸氢二钠利0.248磷酸二氧钾，用0.0m01/[盐酸调节溶液的H值至7.4，加水定穿至1000m[5.8中醇磷酸盐缓冲溶液：按照体积比1：4将中醇与缓冲溶液（5.7)混匀：6设备仪器和器血
6.1翰标仪：波长450nm
天平：感量0.1g和0.0001g：
6.3微量可调移液器及配套吸头：50叫l.100ml.、1000叫l.。6.4可控溢的超声波浴：1作额率为40kHz.控温精度为士5℃。6.5
氮吹仪，
6.6烘箱：控温精度为上1℃
6.7pH计：配备玻璃电极.测量精度至少精确到0.1，试验步骤
7.1试样前处理
称收5g代表性的试样，剪碎至5mm×5mm以下，混勾，从混合样中称收1.0g试样：置了50ml.带旋盖的离心管中。准确加人20ml.体积比为1：1的止已烷（5.1)和乙酸乙酯（5.5)混合溶剂，置于45的超声波（6.4)巾状取30min，取1ml.萃取液，氮气吹干，用100ul.中醇-磷酸盐缓冲溶液(5.8）复溶，待测，
7.2酶联免疫检测
7.2.1测试前需要将所有试剂放置至室温（20~25)后方可使用。7.2.2取系列中基对硫磷标准T作溶液5.1d)和待测样品溶液(7.1)各50以1.分别加人至相应的酶标板5.1a)孔中，每个溶液平行测试2个.然后再分别加入50uL有机磷类抗休工作溶液5.1b），在烘箱（6.6）37下反应30min。
7.2.3弃去孔中液体，并将酶标板5.1a)剩余残液在吸水纸上拍十：每孔注满洗涤液（5.2）.轻轻振荡：放置2 min，弃去孔中液体，升在吸水纸上拍下重复洗涤4次。7.2.4在每孔中加入50ml.邮标二抗5.1c），在烘箱（6.6）巾于37℃下反应30mim7.2.5充去孔中的液体，并将酶标板剩余残液在吸水纸上拍，每孔注满洗涤液（5.2)，轻轻振荡.放置2mi.弃去孔液体，并在吸水纸上拍干，重复洗涤4次。2
-riKaeerKAca-
GB/T 40175.3—2021
7.2.6在每孔中加人50L显色液（5.3），在烘箱（6.6)巾于37℃下避光显色15mim7.2.7在每孔中加人50叫l.终止液5.1g)以终止反应，于10min内用波长450mm的酶标仪（6.1)测定吸光度值。
7.3空白试验
在不加试样的情况下，按上述步骤进行试验。8结果计算与表达
8.1相对吸光度值的计算
分别计算标准溶液和样品溶液的平均吸光度值，按公式（1)计算标准溶液或样品溶液的相对吸光度值。
式中：
相对吸光度值：
系列标准工作溶液或样品溶液的平均吸光度值；B.
0rg/I.标准工作溶液的平均吸光度值8.2绘制标准工作曲线
以相对吸光度值为纵坐标（义）.标准1作浴液浓度（\g/L)的对数值为横坐标.绘制标准1作曲线：每次试验均应绘制标准工作川线。8.3有机磷类农药浓度的计算和结果表达从8.2中绘制的标准工作曲线上，读样品溶液相对吸光度值所对应的有机麟类农药浓度，按公式(2)计算试样中的有机磷类农药的含量。式中：
X_20×e×V
试样中有机磷类农药的含量，单位为微克每千克(ng/kg)；从标准工作山线上得倒的试样中有机磷类农药浓度，单位为微克每升（u/)：V
复溶后样品溶液体积，单位为毫（ml.）：试样质量，单位为克（g)。
订算果应扣除空，精确至一位小数。-(2)
如被测试样中有机磷类农药含量小于2.0ug/kg，则结果表示为术检山，如含量超过或等丁2.0ag/kg，则结果为实测值，宜使用GB/18412.3中规定的方法或其他仪器分析方法再进行检测。9检出限
以甲基对硫磷计.检出限为2.0 g/kg，10试验报告
试验报告至少应给出下述内容：3
-rKaeerkca-
GB/T 40175.3—2021
本文件的编号：
样品来源及捕述
测试结果；
试验日期：
任何偏离本文件的细节
-riKacerKAca-
试剂盒组成
试剂盒组成如下：
酶标板96孔
有机磷类抗试剂（一抗）
石机磷类酶标物（二抗）
(资料性）
有机磷类农药酶联免疫试剂盒示例GB/T40175.3—2021
甲基对硫磷标雅液(0ug/L.lμg/L、5μg/L.50μg/L100μg/L、1000ug/L)底物液A液
底物液B液
终止液
浓缩洗涤液（10倍浓缩）
稀释液
A.2试剂盒的保存
本试剂盒在一2℃～8℃的温度下储存.有效期为1年。如果超过3个月不使用试剂盒.将一抗和二抗放置一20℃保存。
试剂盒交叉反应性
见表 A,1。
试剂盒交叉反应性
农药名称
甲基对硫磷
甲基对氧磷
系蜓硫磷
倍硫碑
CAS号
208-C0-0
950356
122145
55-S8-8
-rKaeerkca-
交叉反应率/%
GB/T40175.3—2021
I1F GB/T 18412.8wwW.bzxz.Net
纺织品
参考文献
农药残留量的测定
第3部分：有机磷农药
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CCS W 04
中华人民共和国国家标准
GB/T40175.3—2021
纺织品生物化学分析方法
第3部分：有机磷类农药（酶联免疫法）TextilesMethods of biochemical analysis-Part 3 :Organophosphoruspesticide (enzyme-linked immunosorbent assay)2021-05-21发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-12-01实施
GB/T40175.3—2021
本文件按照GB/T1.12020%标准化工作导则厂第1部分：标准化文件的结构利起草规则》的规定起草。
本文件是GB/140175%纺织品
生物化学分析方法》的第3部分。GB/T40175已经发布了以下部分：
第1部分：镉和铅(胶体金法)；
第2部分：拟除虫菊酯类农药（酶联免疫法）：第3部分：有机磷类农药(酶联免疫法)。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承扭识别专利的责任。本文件由中国纺织工业联合会提出，本文件山全国纺织品标准化技术委员会（SAC/TC209)口：本文件起草单位：南京海关工业产品检测中心、江南大学、中纺标(深圳)检测有限公司、南京帅范人学南京海关动植食产品检测中心、上海天祥质量技术服务有限公司、江苏省检验检疫科学技术研充院，普江中纺标检测有限公司、纺织1业标准化研究所本文件主要起草人：昊丽娜、压华、唐泰山、周静珠、刘丽强、周佳、斯颚、主建平、繁建和I
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纺织品生物化学分析方法
第3部分：有机磷类农药（酶联免疫法GB/T40175.3—2021
警示：使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验，本文件并未指出所有可能的安全问题使用者有责任采取适当的安全和健康措施.并保证符合国家有关法规规定的条件1范围
本文件期定了纺织品山中基对硫磷、中基对氧磷，杀感硫磷、倍硫磷四种有磷类农药残留量的施联免疫检测方法。
本文件适用于各种纺织品。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的舰范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，注口期的引用文件，仅该口期对应的版本适用于本文件：不注口期的引用文件，其最新版本（包括所有的修收单）适用于本文件
GB6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义
本文件没有需要界定的术语利定义。4原理
试样中的有机磷类农药与试剂盒中已包被在酶标板上的有机磷类农药抗原竞争性结合有机磷类农药抗体，再加人酶标一抗，在酶标板上形成抗原-一抗-酶标一抗复合物。复合物与显色剂发生反应.用酶标仪测定吸光度值。吸光度值与试样中的农药残留量品负相关5试剂与材料
所用试剂均为分析纯.水为符合GB/6682规定的三级水5.1有机磷类农纳测定酶联免疫试剂盒：附录A给出了一种有机磷类农纳酶联免疫试剂盒示例，试剂盒组成如下：
a）骗标板：
b）有机磷类抗体作溶液，
莓标二抗。
中基对硫磷标准下作溶液：可使用试剂盒小提供的标准工作溶液，也可按如下方法配制准确称取50.0mg中基对硫磷标准品（CAS号298-00-0.纯度99不）置于100ml容量瓶加人少基币醇（5.6)溶解后，用甲醇定容至刻度.浓度为500.0mg/L。然盾根据需要的系列标1
rKaeerkAca-
GB/T40175.3—2021
准溶液工作浓度进行稀释。
底物A液：每升包含13.6%醋酸钠、1.6%柠檬酸、0.3mL过氧化氢（30不）的水济液底物B液：每升包含13.6g酷酸钠、1.6g柠檬酸、0.2g3,3°5.5'-四甲基联苯胺的水溶液。终止液：每包含54.3mL浓硫酸（98%）的水溶液。浓缩洗涤液：10倍浓缩，每升包含0.5g磷酸二氢钠、6.0g磷酸氢二钠、16.0g氯化钠、0.5mL吐h
温-20的水溶液。
2洗涤液：使用前将浓缩洗涤液5.1h)按照体积比1：9加水稀释（1份浓缩洗涤液19份水）。5.2
5.3显色液：使用前将底物A液5.1e)和底物B液5.1「)按体积比1：1混合。5.4正己烧。
5.5乙酸乙酯。
5.6中醇。
5.7磷酸盐缓冲溶液（0.01mol/L）：在800mL去离子水中溶解8.0g氯化钠0.2g氯化钾、1.44g磷酸氢二钠利0.248磷酸二氧钾，用0.0m01/[盐酸调节溶液的H值至7.4，加水定穿至1000m[5.8中醇磷酸盐缓冲溶液：按照体积比1：4将中醇与缓冲溶液（5.7)混匀：6设备仪器和器血
6.1翰标仪：波长450nm
天平：感量0.1g和0.0001g：
6.3微量可调移液器及配套吸头：50叫l.100ml.、1000叫l.。6.4可控溢的超声波浴：1作额率为40kHz.控温精度为士5℃。6.5
氮吹仪，
6.6烘箱：控温精度为上1℃
6.7pH计：配备玻璃电极.测量精度至少精确到0.1，试验步骤
7.1试样前处理
称收5g代表性的试样，剪碎至5mm×5mm以下，混勾，从混合样中称收1.0g试样：置了50ml.带旋盖的离心管中。准确加人20ml.体积比为1：1的止已烷（5.1)和乙酸乙酯（5.5)混合溶剂，置于45的超声波（6.4)巾状取30min，取1ml.萃取液，氮气吹干，用100ul.中醇-磷酸盐缓冲溶液(5.8）复溶，待测，
7.2酶联免疫检测
7.2.1测试前需要将所有试剂放置至室温（20~25)后方可使用。7.2.2取系列中基对硫磷标准T作溶液5.1d)和待测样品溶液(7.1)各50以1.分别加人至相应的酶标板5.1a)孔中，每个溶液平行测试2个.然后再分别加入50uL有机磷类抗休工作溶液5.1b），在烘箱（6.6）37下反应30min。
7.2.3弃去孔中液体，并将酶标板5.1a)剩余残液在吸水纸上拍十：每孔注满洗涤液（5.2）.轻轻振荡：放置2 min，弃去孔中液体，升在吸水纸上拍下重复洗涤4次。7.2.4在每孔中加入50ml.邮标二抗5.1c），在烘箱（6.6）巾于37℃下反应30mim7.2.5充去孔中的液体，并将酶标板剩余残液在吸水纸上拍，每孔注满洗涤液（5.2)，轻轻振荡.放置2mi.弃去孔液体，并在吸水纸上拍干，重复洗涤4次。2
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GB/T 40175.3—2021
7.2.6在每孔中加人50L显色液（5.3），在烘箱（6.6)巾于37℃下避光显色15mim7.2.7在每孔中加人50叫l.终止液5.1g)以终止反应，于10min内用波长450mm的酶标仪（6.1)测定吸光度值。
7.3空白试验
在不加试样的情况下，按上述步骤进行试验。8结果计算与表达
8.1相对吸光度值的计算
分别计算标准溶液和样品溶液的平均吸光度值，按公式（1)计算标准溶液或样品溶液的相对吸光度值。
式中：
相对吸光度值：
系列标准工作溶液或样品溶液的平均吸光度值；B.
0rg/I.标准工作溶液的平均吸光度值8.2绘制标准工作曲线
以相对吸光度值为纵坐标（义）.标准1作浴液浓度（\g/L)的对数值为横坐标.绘制标准1作曲线：每次试验均应绘制标准工作川线。8.3有机磷类农药浓度的计算和结果表达从8.2中绘制的标准工作曲线上，读样品溶液相对吸光度值所对应的有机麟类农药浓度，按公式(2)计算试样中的有机磷类农药的含量。式中：
X_20×e×V
试样中有机磷类农药的含量，单位为微克每千克(ng/kg)；从标准工作山线上得倒的试样中有机磷类农药浓度，单位为微克每升（u/)：V
复溶后样品溶液体积，单位为毫（ml.）：试样质量，单位为克（g)。
订算果应扣除空，精确至一位小数。-(2)
如被测试样中有机磷类农药含量小于2.0ug/kg，则结果表示为术检山，如含量超过或等丁2.0ag/kg，则结果为实测值，宜使用GB/18412.3中规定的方法或其他仪器分析方法再进行检测。9检出限
以甲基对硫磷计.检出限为2.0 g/kg，10试验报告
试验报告至少应给出下述内容：3
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GB/T 40175.3—2021
本文件的编号：
样品来源及捕述
测试结果；
试验日期：
任何偏离本文件的细节
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试剂盒组成
试剂盒组成如下：
酶标板96孔
有机磷类抗试剂（一抗）
石机磷类酶标物（二抗）
(资料性）
有机磷类农药酶联免疫试剂盒示例GB/T40175.3—2021
甲基对硫磷标雅液(0ug/L.lμg/L、5μg/L.50μg/L100μg/L、1000ug/L)底物液A液
底物液B液
终止液
浓缩洗涤液（10倍浓缩）
稀释液
A.2试剂盒的保存
本试剂盒在一2℃～8℃的温度下储存.有效期为1年。如果超过3个月不使用试剂盒.将一抗和二抗放置一20℃保存。
试剂盒交叉反应性
见表 A,1。
试剂盒交叉反应性
农药名称
甲基对硫磷
甲基对氧磷
系蜓硫磷
倍硫碑
CAS号
208-C0-0
950356
122145
55-S8-8
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交叉反应率/%
GB/T40175.3—2021
I1F GB/T 18412.8wwW.bzxz.Net
纺织品
参考文献
农药残留量的测定
第3部分：有机磷农药
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