GB/T 13086-2020
基本信息
标准号： GB/T 13086-2020
中文名称：饲料中游离棉酚的测定方法
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
GB/T 13086-2020.Method for determination of free gossypol in feeds.
1范围
GB/T 13086规定了饲料中游离棉酚的分光光度测定方法。
GB/T 13086适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料.棉籽、棉籽饼粕以及含有棉籽、棉籽饼粕成分的其他饲料原料(棉籽油除外)中游离棉卧的测定。
本标准定量限为20 mg/kg。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注有期的版本适用于本文件。凡是不注用期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 682 2008.ISO 3696.1987,MOD)
GB/T 20195动物饲料试样的制备(GB/T 20195-2066 ,ISO 6498: 1998,ID1D
3原理
试样中的游棉酚用含3氨基1丙醇的异丙醇正已烧混合溶刹提取。用苯胺使棉酚转化为苯胺棉酚,在波长40 nm处测量其吸光度值。
4试剂或材米
除非另有规定:仅使用分析纯试剂。
4.1水:GB/T 6682二级。
4.2苯胺:应满足空白济液bo吸光度值不超过0.022。若超过,则在茶胺中加入锌粉进行蒸馏,弃去头尾各10% ,将其余馏出部分收集于棕色玻璃瓶内,0℃~4℃贮存,有效期45天。
4.3异丙醇- 正已烷混合溶液:异丙醇十正已烷=6+4。
4.4溶剂 A:量取约500 mL异丙醇正己烧混合溶液(4.39、2 mL3-氨基-1-丙醇、8 mL冰乙酸和50 mL水于1 000 mL容量瓶中,再用异丙醇正已烷混合溶液(4.3)定容至刻度。室温保存,有效期7天。
5仪器设备
5.1分光光度计:带1cm比色皿,可在440nm处测定吸光度。
5.2分析天平 :感量0.0001 g和0.01g。
5.3振荡器;可放置 250 mL三角瓶,往复式,不低于120次/min。
5.4水浴锅。
5.5 具塞三角瓶:100 mL、250 mL。
5.6棕色容量瓶:25 mL、50 mL。
1范围
GB/T 13086规定了饲料中游离棉酚的分光光度测定方法。
GB/T 13086适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料.棉籽、棉籽饼粕以及含有棉籽、棉籽饼粕成分的其他饲料原料(棉籽油除外)中游离棉卧的测定。
本标准定量限为20 mg/kg。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注有期的版本适用于本文件。凡是不注用期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 682 2008.ISO 3696.1987,MOD)
GB/T 20195动物饲料试样的制备(GB/T 20195-2066 ,ISO 6498: 1998,ID1D
3原理
试样中的游棉酚用含3氨基1丙醇的异丙醇正已烧混合溶刹提取。用苯胺使棉酚转化为苯胺棉酚,在波长40 nm处测量其吸光度值。
4试剂或材米
除非另有规定:仅使用分析纯试剂。
4.1水:GB/T 6682二级。
4.2苯胺:应满足空白济液bo吸光度值不超过0.022。若超过,则在茶胺中加入锌粉进行蒸馏,弃去头尾各10% ,将其余馏出部分收集于棕色玻璃瓶内,0℃~4℃贮存,有效期45天。
4.3异丙醇- 正已烷混合溶液:异丙醇十正已烷=6+4。
4.4溶剂 A:量取约500 mL异丙醇正己烧混合溶液(4.39、2 mL3-氨基-1-丙醇、8 mL冰乙酸和50 mL水于1 000 mL容量瓶中,再用异丙醇正已烷混合溶液(4.3)定容至刻度。室温保存,有效期7天。
5仪器设备
5.1分光光度计:带1cm比色皿,可在440nm处测定吸光度。
5.2分析天平 :感量0.0001 g和0.01g。
5.3振荡器;可放置 250 mL三角瓶,往复式,不低于120次/min。
5.4水浴锅。
5.5 具塞三角瓶:100 mL、250 mL。
5.6棕色容量瓶:25 mL、50 mL。
标准图片预览
标准内容
ICS65.120
中华人民共和国国家标准
GB/T13086—2020
代替GB/T13086—1991
饲料中游离棉酚的测定方法
Method for determination of free gossypol in feeds(ISO6866:1985,Animal feeding stuffs-Determination of free and total gossypol,MOD)2020-11-19发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-06-01实施
中华人民共和国
国家标准
饲料中游离棉酚的测定方法
GB/T13086—2020
中国标准出版社出版发行
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）网址spc.net.cn
总编室：（010)68533533发行中心：（010)51780238读者服务部：（010)68523946
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销
开本880X12301/16
印张0.5字数12千字
2020年11月第一版
2020年11月第一次印刷
书号：155066：1-65877
如有印装差错
由本社发行中心调换
版权专有
侵权必究
举报电话：（010)68510107
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准代替GB/T13086—1991《饲料中游离棉酚的测定方法》。本标准与GB/T130861991相比，除编辑性修改外，主要技术变化如下：修改了适用范围（见第1章，1991年版的第1章）；增加了定量限（见第1章)；
删除了仅用于配制的市售形式的试剂（见1991年版的第3章）；增加了苯胺和溶剂A的有效期（见4.2）；修改了仪器设备中的恒温水浴为水浴锅（见第5章，1991年版的第5章）；增加了棉籽样品制备方法（见第6章）；修改了称样量（见7.1，1991年版的6.1）；增加了校正吸光度的计算公式（见8.1）；修改了样品中游离棉酚含量的计算公式（见8.2，1991年版的7.1)；增加了棉籽中游离棉酚结果的计算公式（见8.2）；修改了测定结果有效数字（见第8章，1991年版的7.2）；修改了精密度规定（见第9章，1991年版的7.3）；增加了资料性附录A（见附录A）。GB/T13086—2020
本标准使用重新起草法修改采用国际标准ISO6866：1985《动物饲料游离棉酚和总棉酚的测定》。
本标准与ISO6866：1985相比在结构上有较大调整，附录A中列出了本标准与ISO6866：1985章条编号对照一览表。
本标准与ISO6866：1985的技术性差异及其原因如下关于规范性引用文件，本标准做了具有技术性差异的调整，以适应我国的技术条件，调整的情况技术反映在第2章“规范性引用文件”中，具体调整如下：删除了ISO6866：1985中的引用文件ISO6497；·用等同采用国际标准的GB/T20195代替了ISO6498·增加引用了GB/T6682。
吸光度值的测量波长由\最大吸收波长处（435nm~445nm）”修改为“波长440nm处”（见第3章，7.3,ISO6866:1985的8.3.1.8)；删除了总棉酚的测定相关内容（见ISO68661985的8.3.2）；增加了校正吸光度的计算公式[见公式（1)]；删除了总棉酚计算的相关内容（见ISO6866：1985的9.1)；修改了样品中游离棉酚含量的计算公式[见公式（2），ISO6866：1985的9.1]；增加了棉籽中游离棉酚结果的计算公式[见公式（3）删除了试验报告内容（见ISO6866：1985的第10章）。本标准还做了下列编辑性修改：修改了标准名称，删除了总棉酚测定，适用于我国采标目的请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出并归口。I
GB/T13086—2020
本标准起草单位：江西省兽药伺料监察所、中国饲料工业协会，本标准主要起草人：杨琳芬、符金华、徐田放、王黎文、周伟良、徐国茂、刘安南、兰轶、胡翊炜、郭丽丽、刘志成、刘景湖、卢坚雯。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T13086—1991。
1范围
饲料中游离棉酚的测定方法
本标准规定了饲料中游离棉酚的分光光度测定方法。GB/T13086—2020
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料，棉籽、棉籽饼粘以及含有棉籽、棉籽饼粕成分的其他饲料原料（棉籽油除外）中游离棉酚的测定。本标准定量限为20mg/kg
2规范性引用文件
下列文件对手本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注自期的版本适用于本文件。凡是不注期的引用文件，其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
GB/T6682
GB/T20195
3原理
分析实验室用水规格和试验方法（GB工6682--2008.1SO3696：1987，1OD)动物饲料
试样的制备CB/T20195-
2006.ISO.6498.1998.IDT
两醇的异内醇-正已烷混合溶剂提取，用兼胺使棉酚转化为苯胺棉试样中的游离棉酚用含
酚，在波长410n处测量其吸光度值4试剂或材料
除非另有规是，仅使用分析纯试剂。二级。
4.1水：GB/T6682
4.2苯胺：应满足空白落液b吸光度值不超过0.022。若超过，则在举胺中加人锌粉进行蒸馏，弃去头尾各10%，将其余馏出部分收集于棕色玻璃瓶内，0℃～4℃购存，有效期45天4.3异丙醇-正已烷混合溶液：异丙两醇十正已烷=6十4。4.4溶剂A：量取约500mL异丙醇-正已烷混合落减（3）2mL3-氨基-1-丙醇、8mL冰乙酸和50mL水于1000mL容量瓶中，再用异丙醇-正已烷混合溶液（4.3）定容至刻度。室温保存，有效期7天。5
仪器设备
分光光度计：带1cm比色血，可在440nm处测定吸光度。5.2分析天平：感量0.0001g和0.01g。5.3振荡器，可放置250mL三角瓶，往复式，不低于120次/min。5.4水浴锅。
5.5具塞三角瓶：100mL、250mL。5.6
棕色容量瓶：25mL、50mL。
GB/T13086—2020
6样品
6.1棉籽
称取样品约200g，粉碎，过6.0mm分析筛，将筛上物（棉绒）和筛下物分别称重，将筛下物进一步研磨，全部过1.0mm分析筛。将筛上棉绒和粉碎后的棉籽仁壳试样分别装人密闭容器中，备用。6.2其他产品
按照GB/T20195规定制备试样，至少200g，粉碎使其全部过1.0mm孔径分析筛，混合均勾，装入密闭容器中，备用。
7试验步骤
试样溶液提取
7.1.1试样称量
平行做两份试验。不同试验的称样量如下：棉籽：分别称取棉绒和棉籽仁壳各1g，精确至0.0001g；棉籽饼粕：称取1g，精确至0.0001g；其他试样：称取5g，精确至0.01g。7.1.2游离棉酚的提取
试样置于250mL具塞三角瓶中，加人玻璃珠20粒，准确加人50mL溶剂A，于室温下120次/min振荡提取1h。用滤纸过滤，过滤时在漏斗上加盖玻璃表面皿。弃去初滤液5mL，其余滤液全部收集至100mL具塞三角瓶，备用。棉籽试样应将棉绒和棉籽壳仁分别置于不同的三角瓶中，其余操作同上。7.2试样溶液制备
7.2.1用移液管准确移取双等份滤液（7.1.2)5mL~10mL（每份滤液约含50μg~100ug游离棉酚），分别置于两个25mL棕色容量瓶a和b中，若不足10mL，用溶剂A补充至10mL。7.2.2用异丙醇-正已烷混合溶液（4.3）稀释a至刻度，摇匀，该溶液用作试样测定溶液的参比溶液。7.2.3用移液管移取两份10mL的溶剂A分别至两个25mL棕色容量瓶a。和b。中。7.2.4用异丙醇-正已烷混合溶液（4.3）稀释ao至刻度，摇勾，该溶液用作空白测定溶液的参比溶液。7.2.5加2.0mL苯胺（4.2于b和b。中，于沸水浴上加热30min后取出，冷却至室温，用异丙醇-正已烷混合溶液（4.3）定容，摇勾，室温静置1h。7.3测定
用1cm比色血，于波长440nm处，用分光光度计以ao为参比溶液测定空白溶液b的吸光度值Ai，以a为参比溶液测定试样溶液b的吸光度值A2。8试验数据处理
校正吸光度值A
试样溶液的校正吸光度值A接照公式（1)计算：2
式中：
A—试样溶液的吸光度值；
A,—空白溶液的吸光度值。
8.2游离棉酚含量
GB/T13086—2020
样品中游离棉酚的含量以质量分数计，单位以毫克每千克（mg/g）表示，按公式（2）计算：AX1250X1000
式中：
试样溶液校正吸光度值；
样品稀释倍数：
aXmxVxl
质量吸收系数，游离棉酚为62.5cm-1.g-1.L；试样质量，单位为克（g）；
测定用滤液的体积，单位为毫升（mL）；比色皿光径长度，单位为厘米（cm）。棉籽样品中游离棉酚的含量由棉绒和棉籽仁壳的含量加权获得，按公式（3)计算：w棉粉wwW.bzxz.Net
W棉號
m棉城
榴籽仁壳
m棉籽仁克
棉然Xm棉能+W相杯七壳m稳样仁充m棉绒十m棉籽仁壳
m热缆十m榈籽仁壳
棉绒试样中游离棉酚的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；制备棉籽试样中棉绒的质量，单位为克（g)；棉籽仁壳试样中游离棉酚的含量，单位为毫克每千克（mg/kg)；制备棉籽试样中棉籽仁壳的质量，单位为克（g）。测定结果以平行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。9精密度
（2）
在重复性条件下，两次独立测定结果之间的绝对差值，在游离棉酚含量小于500mg/kg时，不得超过其算术平均值的15%；在游离棉酚含量不小于500mg/kg且不大于750mg/kg时，不得超过75mg/kg；在游离棉酚含量大于750mg/kg时，不得超过其算术平均值的10%。GB/T13086—2020
附录A
（资料性附录）
本标准与ISO6866：1985相比的结构变化情况本标准与ISO6866：1985相比在结构上有调整，具体章条编号对照情况见表A1。表A.1本标准与ISO6866：1985的章条编号对照情况本标准章条编号
附录A
GB/T13086-2020
ISO6866：1985章条编号
8.2.8.3.1
版权专有侵权必究
书号：1550661-65877
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中华人民共和国国家标准
GB/T13086—2020
代替GB/T13086—1991
饲料中游离棉酚的测定方法
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国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-06-01实施
中华人民共和国
国家标准
饲料中游离棉酚的测定方法
GB/T13086—2020
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开本880X12301/16
印张0.5字数12千字
2020年11月第一版
2020年11月第一次印刷
书号：155066：1-65877
如有印装差错
由本社发行中心调换
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侵权必究
举报电话：（010)68510107
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准代替GB/T13086—1991《饲料中游离棉酚的测定方法》。本标准与GB/T130861991相比，除编辑性修改外，主要技术变化如下：修改了适用范围（见第1章，1991年版的第1章）；增加了定量限（见第1章)；
删除了仅用于配制的市售形式的试剂（见1991年版的第3章）；增加了苯胺和溶剂A的有效期（见4.2）；修改了仪器设备中的恒温水浴为水浴锅（见第5章，1991年版的第5章）；增加了棉籽样品制备方法（见第6章）；修改了称样量（见7.1，1991年版的6.1）；增加了校正吸光度的计算公式（见8.1）；修改了样品中游离棉酚含量的计算公式（见8.2，1991年版的7.1)；增加了棉籽中游离棉酚结果的计算公式（见8.2）；修改了测定结果有效数字（见第8章，1991年版的7.2）；修改了精密度规定（见第9章，1991年版的7.3）；增加了资料性附录A（见附录A）。GB/T13086—2020
本标准使用重新起草法修改采用国际标准ISO6866：1985《动物饲料游离棉酚和总棉酚的测定》。
本标准与ISO6866：1985相比在结构上有较大调整，附录A中列出了本标准与ISO6866：1985章条编号对照一览表。
本标准与ISO6866：1985的技术性差异及其原因如下关于规范性引用文件，本标准做了具有技术性差异的调整，以适应我国的技术条件，调整的情况技术反映在第2章“规范性引用文件”中，具体调整如下：删除了ISO6866：1985中的引用文件ISO6497；·用等同采用国际标准的GB/T20195代替了ISO6498·增加引用了GB/T6682。
吸光度值的测量波长由\最大吸收波长处（435nm~445nm）”修改为“波长440nm处”（见第3章，7.3,ISO6866:1985的8.3.1.8)；删除了总棉酚的测定相关内容（见ISO68661985的8.3.2）；增加了校正吸光度的计算公式[见公式（1)]；删除了总棉酚计算的相关内容（见ISO6866：1985的9.1)；修改了样品中游离棉酚含量的计算公式[见公式（2），ISO6866：1985的9.1]；增加了棉籽中游离棉酚结果的计算公式[见公式（3）删除了试验报告内容（见ISO6866：1985的第10章）。本标准还做了下列编辑性修改：修改了标准名称，删除了总棉酚测定，适用于我国采标目的请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出并归口。I
GB/T13086—2020
本标准起草单位：江西省兽药伺料监察所、中国饲料工业协会，本标准主要起草人：杨琳芬、符金华、徐田放、王黎文、周伟良、徐国茂、刘安南、兰轶、胡翊炜、郭丽丽、刘志成、刘景湖、卢坚雯。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T13086—1991。
1范围
饲料中游离棉酚的测定方法
本标准规定了饲料中游离棉酚的分光光度测定方法。GB/T13086—2020
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料，棉籽、棉籽饼粘以及含有棉籽、棉籽饼粕成分的其他饲料原料（棉籽油除外）中游离棉酚的测定。本标准定量限为20mg/kg
2规范性引用文件
下列文件对手本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注自期的版本适用于本文件。凡是不注期的引用文件，其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
GB/T6682
GB/T20195
3原理
分析实验室用水规格和试验方法（GB工6682--2008.1SO3696：1987，1OD)动物饲料
试样的制备CB/T20195-
2006.ISO.6498.1998.IDT
两醇的异内醇-正已烷混合溶剂提取，用兼胺使棉酚转化为苯胺棉试样中的游离棉酚用含
酚，在波长410n处测量其吸光度值4试剂或材料
除非另有规是，仅使用分析纯试剂。二级。
4.1水：GB/T6682
4.2苯胺：应满足空白落液b吸光度值不超过0.022。若超过，则在举胺中加人锌粉进行蒸馏，弃去头尾各10%，将其余馏出部分收集于棕色玻璃瓶内，0℃～4℃购存，有效期45天4.3异丙醇-正已烷混合溶液：异丙两醇十正已烷=6十4。4.4溶剂A：量取约500mL异丙醇-正已烷混合落减（3）2mL3-氨基-1-丙醇、8mL冰乙酸和50mL水于1000mL容量瓶中，再用异丙醇-正已烷混合溶液（4.3）定容至刻度。室温保存，有效期7天。5
仪器设备
分光光度计：带1cm比色血，可在440nm处测定吸光度。5.2分析天平：感量0.0001g和0.01g。5.3振荡器，可放置250mL三角瓶，往复式，不低于120次/min。5.4水浴锅。
5.5具塞三角瓶：100mL、250mL。5.6
棕色容量瓶：25mL、50mL。
GB/T13086—2020
6样品
6.1棉籽
称取样品约200g，粉碎，过6.0mm分析筛，将筛上物（棉绒）和筛下物分别称重，将筛下物进一步研磨，全部过1.0mm分析筛。将筛上棉绒和粉碎后的棉籽仁壳试样分别装人密闭容器中，备用。6.2其他产品
按照GB/T20195规定制备试样，至少200g，粉碎使其全部过1.0mm孔径分析筛，混合均勾，装入密闭容器中，备用。
7试验步骤
试样溶液提取
7.1.1试样称量
平行做两份试验。不同试验的称样量如下：棉籽：分别称取棉绒和棉籽仁壳各1g，精确至0.0001g；棉籽饼粕：称取1g，精确至0.0001g；其他试样：称取5g，精确至0.01g。7.1.2游离棉酚的提取
试样置于250mL具塞三角瓶中，加人玻璃珠20粒，准确加人50mL溶剂A，于室温下120次/min振荡提取1h。用滤纸过滤，过滤时在漏斗上加盖玻璃表面皿。弃去初滤液5mL，其余滤液全部收集至100mL具塞三角瓶，备用。棉籽试样应将棉绒和棉籽壳仁分别置于不同的三角瓶中，其余操作同上。7.2试样溶液制备
7.2.1用移液管准确移取双等份滤液（7.1.2)5mL~10mL（每份滤液约含50μg~100ug游离棉酚），分别置于两个25mL棕色容量瓶a和b中，若不足10mL，用溶剂A补充至10mL。7.2.2用异丙醇-正已烷混合溶液（4.3）稀释a至刻度，摇匀，该溶液用作试样测定溶液的参比溶液。7.2.3用移液管移取两份10mL的溶剂A分别至两个25mL棕色容量瓶a。和b。中。7.2.4用异丙醇-正已烷混合溶液（4.3）稀释ao至刻度，摇勾，该溶液用作空白测定溶液的参比溶液。7.2.5加2.0mL苯胺（4.2于b和b。中，于沸水浴上加热30min后取出，冷却至室温，用异丙醇-正已烷混合溶液（4.3）定容，摇勾，室温静置1h。7.3测定
用1cm比色血，于波长440nm处，用分光光度计以ao为参比溶液测定空白溶液b的吸光度值Ai，以a为参比溶液测定试样溶液b的吸光度值A2。8试验数据处理
校正吸光度值A
试样溶液的校正吸光度值A接照公式（1)计算：2
式中：
A—试样溶液的吸光度值；
A,—空白溶液的吸光度值。
8.2游离棉酚含量
GB/T13086—2020
样品中游离棉酚的含量以质量分数计，单位以毫克每千克（mg/g）表示，按公式（2）计算：AX1250X1000
式中：
试样溶液校正吸光度值；
样品稀释倍数：
aXmxVxl
质量吸收系数，游离棉酚为62.5cm-1.g-1.L；试样质量，单位为克（g）；
测定用滤液的体积，单位为毫升（mL）；比色皿光径长度，单位为厘米（cm）。棉籽样品中游离棉酚的含量由棉绒和棉籽仁壳的含量加权获得，按公式（3)计算：w棉粉wwW.bzxz.Net
W棉號
m棉城
榴籽仁壳
m棉籽仁克
棉然Xm棉能+W相杯七壳m稳样仁充m棉绒十m棉籽仁壳
m热缆十m榈籽仁壳
棉绒试样中游离棉酚的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；制备棉籽试样中棉绒的质量，单位为克（g)；棉籽仁壳试样中游离棉酚的含量，单位为毫克每千克（mg/kg)；制备棉籽试样中棉籽仁壳的质量，单位为克（g）。测定结果以平行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。9精密度
（2）
在重复性条件下，两次独立测定结果之间的绝对差值，在游离棉酚含量小于500mg/kg时，不得超过其算术平均值的15%；在游离棉酚含量不小于500mg/kg且不大于750mg/kg时，不得超过75mg/kg；在游离棉酚含量大于750mg/kg时，不得超过其算术平均值的10%。GB/T13086—2020
附录A
（资料性附录）
本标准与ISO6866：1985相比的结构变化情况本标准与ISO6866：1985相比在结构上有调整，具体章条编号对照情况见表A1。表A.1本标准与ISO6866：1985的章条编号对照情况本标准章条编号
附录A
GB/T13086-2020
ISO6866：1985章条编号
8.2.8.3.1
版权专有侵权必究
书号：1550661-65877
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