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GB/T 25172-2020

基本信息

标准号: GB/T 25172-2020

中文名称:猪常温精液生产与保存技术规范

标准类别:国家标准(GB)

标准状态:现行

出版语种:简体中文

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相关标签: 常温 生产 保存 技术规范

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出版信息

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标准简介

GB/T 25172-2020.Technical specification for production and preservation of fresh boar semen.
1范围
GB/T 25172规定了猪常温精液生产与保存的基本要求和技术要求,描述了对应的试验方法,给出了保存和运输的内容。
GB/T 25172适用于猪的常温精液生产与保存。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分 析实验室用水规格和试验方法
GB 23238种猪常温精液
3术 语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
原精液 raw semen
采集后未经稀释的精液。
3.2
常温精液 fresh semen
经稀释后在16℃~18℃下保存,仍具有受精能力的精液。
注:改写GB 23238-2009,定 义3.2。
3.3
精子活力 sperm motility
在37℃下呈直线前进运动的精子占总精子数的百分率。
3.4
精子密度 sperm concentration
单位体积精液中的精子数。
3.5
精子畸形率 abnormal sperm percentage
畸形精子占总精子数的百分率。
4基本要求
4.1种公猪
应健康且达到种用要求。成年公猪宜每周采精二次至三次,青年公猪宜每周一次至二次。
4.2采精员
应经过专业培训,工作时应着洁净工作衣、帽,穿长胶鞋,戴无毒塑料手套。
4.3采精室
应设置采精区和安全区。采精区设置假台猪,地面防滑,并保持清洁、安静和避光。
4.4 精液处理室
应设置精液检查、稀释和分装区,温度宜控制在22℃~25℃,避免太阳光直射或紫外灯照射。配备仪器和用品参见附录A。

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标准内容

ICS65.020.30
中华人民共和国国家标准
GB/T25172—2020
代替GB/T25172—2010
猪常温精液生产与保存技术规范Technical specification for production and preservation of fresh boar semen2020-11-19发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-06-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草GB/T25172—2020
本标准代替GB/T25172—2010《猪常温精液生产与保存技术规范》,与GB/T25172—2010相比主要变化如下:
增加了“GB23238”和\GB/T6682”(见第2章);-增加了“宜用设备采精法,按使用说明书操作”(见5.1.2.3);—将精于畸形率由“≤18%”修改为“20%”(见5.2.2,2010年版的5.2);删除了“细菌菌落数”(见5.2,2010年版的5.2);精子活力证实方法增加了“使用自动分析仪器应按其检测方法操作”(见5.2.3.2):——将稀释液pH值“6.47.2”修改为“6.87.2”(见4.5.4,2010年版的6.1.3);一将稀释后精液“每头份剂量”“总精子数”修改为“剂量、每剂量中直线前进运动精子数应符合GB23238的规定。”(见5.4.1,2010年版的6.2.5);将“精液产品质量(见表2)”修改为“常温精液产品质量和标志应符合GB23238的规定。”(见5.6.4,2010年版的8.4)。
本标准由中华人民共和国农业农村部提出本标准由全国畜牧业标准化技术委员会(SAC/TC274)归口。本标准起草单位:青岛市畜牧兽医研究所、华南农业大学、北京养猪育种中心、黄岛区家畜改良站。本标准主要起草人:戈新、张守全、王建华、周海深、张宝珣、李培培、刘玉华、程明、孟庆利。Sz
1范围
猪常温精液生产与保存技术规范GB/T25172—2020
本标准规定了猪常温精液生产与保存的基本要求和技术要求,描述了对应的试验方法,给出了保存和运输的内容
本标准适用于猪的常温精液生产与保存。规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB23238种猪常温精液
术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
原精液
rawsemen
采集后未经稀释的精液。
常温精液
freshsemen
经稀释后在16℃~18℃下保存,仍具有受精能力的精液注:改写GB23238—2009,定义3.2。3.3
精子活力
spermmotility
在37℃下呈直线前进运动的精子占总精子数的百分率3.4
精子密度
spermconcentration
单位体积精液中的精子数。
精子畸形率
abnormalspermpercentage
畸形精子占总精子数的百分率。基本要求
种公猪
应健康且达到种用要求。成年公猪宜每周采精二次至三次,青年公猪宜每周一次至二次1
GB/T25172—2020
2采精员
应经过专业培训,工作时应着洁净工作衣、帽,穿长胶鞋,戴无毒塑料手套。4.3
3采精室
应设置采精区和安全区。采精区设置假台猪,地面防滑,并保持清洁、安静和避光4.4精液处理室
应设置精液检查、稀释和分装区,温度宜控制在22℃~25℃,避免太阳光直射或紫外灯照射。配备仪器和用品参见附录A。
稀释液
配制用水应符合GB/T6682中二级水或三级水的要求。4.5.1
4.5.2商品稀释剂按说明书使用。不得使用过期或变质稀释剂。4.5.3自配稀释液所用试剂应为分析纯,稀释液配方参见附录B。4.5.4稀释液pH值应为6.8~7.2。4.5.5
使用前1h配制,配制后应及时贴上标签,标明品名、配制日期和时间、经手人。4.5.6
稀释液应密封后置于冰箱中0℃~4℃冷藏,保存时间不应超过24h。5技术要求
5.1精液采集
5.1.1采精前准备
5.1.1.1集精杯或保温杯(内置无毒塑料袋并覆盖四层纱布或一层精液过滤纸)、载玻片、盖玻片、精液处理器血应预热至37℃。
5.1.1.2显微镜载物台恒温板应预热至37℃。精子密度仪使用前应预热。5.1.2采精
5.1.2.1应剪去公猪包皮部长毛,清洁体表,擦干水渍。5.1.2.2应挤净包皮积液,先用0.1%高锰酸钾溶液清洗腹部和包皮,再用温水清洗后擦干。5.1.2.3宜用设备采精法,按使用说明书操作。手握法采精时,应一只手戴双层无毒聚乙烯手套,按摩公猪包皮部,待公猪爬跨假台猪并伸出阴茎,脱去外层手套,握紧龟头,使其不能旋转,顺势将阴茎的“S”状弯曲延直。另一只手持集精杯或保温杯,弃去最初射出的少量精液,收集精液至射精完毕。5.1.2.4采精完毕后,应标记公猪耳号,送至精液处理室5.2精液检验
5.2.1检验项目
外观、气味、采精量、精子活力、精子密度和精子畸形率。5.2.2原精液质量
应符合表1的规定,其中任何一项不符合要求的则废弃。2
证实方法
采精量
采精蛋/mL
精子活力/%
精子密度/(10°个/mL)
精子畸形率/%
原精液质量
呈乳白色,均匀一致
略带腥味,无异味
采用称量法计算采精量,1g相当于1mL。5.2.3.2
精子活力
GB/T25172—2020
证实方法
见5.2.3.1
见5.2.3.2
见5.2.3.3
见5.2.3.4
取中层精液10μL~15μL,在200倍~400倍显微镜下检查。每份精液取样二次,每个样观察三个视野,计算平均值。使用自动分析仪器应按其检测方法操作。5.2.3.3精子密度
采用精子密度仪测定。应定期用血细胞计数板法校正精子畸形率
采用伊红或姬姆萨染色法检查时,在200倍~400倍显微镜下观察左、中、右三个视野中不少于200个精子。也可采用相差显微镜直接观察。每二个月抽检一次。5.3精液稀释
5.3.1精液采集后应尽快稀释,放置时间不宜超过15min。5.3.2采用等温稀释。精液与稀释液温差不得超过1℃,根据精液温度调节稀释液温度,不得反向操作。
5.3.3将稀释液沿杯壁缓慢加入精液中,轻轻摇动或沿一个方向搅拌,混合均匀。高倍稀释时,先低倍稀释(1:1)~(1:2),30s后再加人余下的稀释液。5.3.4稀释液总量以体积V计,数值以毫升(mL)表示,按式(1)计算:Uixc
式中:
采精量,单位为毫升(mL);
精子密度,单位为10°个每毫升(10°个/mL);每剂量中直线前进运动精子数,单位为10°个;s
剂量,单位为毫升(mL)。
5.3.5精液稀释后应静置5min,按5.2.3.2检测精子活力,活力不得低于70%。.
GB/T25172—2020
精液分装
5.4.1剂量、每剂量中直线前进运动精子数应符合GB23238的规定。5.4.2可采用袋装或瓶装,应使用对精子无毒害作用且灭菌的一次性塑料或硅胶制品5.4.3分装完毕,应排出空气后密封5.5
应及时将精液检验、精液稀释、精液分装的处理和结果填人精液质量检测登记表,登记表见附录C。5.6
6精液保存和运输
5.6.1精液应置于22℃~25℃下1h~2h后,平放人16℃~18℃恒温箱内避光保存;也可用12层15层纱布(或干毛巾)包严直接放入恒温箱内。5.6.2保存的精液每隔4h~8h摇动一次并记录,摇动时应轻缓均匀5.6.3每批精液应留样备查。同批号的精液在有效期内应抽样检查并记录,常温精液保存登记表见附录 D。
5.6.4常温精液产品质量和标志应符合GB23238的规定5.6.5精液应置于16℃~18℃的恒温箱内避光运输,运输过程中避免强烈震动和碰撞4
附录A
(资料性附录)
精液处理室配备仪器和用品
精液处理室配备仪器和用品见表A,1。表A.1
精液处理室配备仪器和用品
电子秤
显微镜
显微镜恒温板
精子密度仪
恒温箱
干燥箱
电子天平
恒温水浴锅
恒温磁力搅拌器
血球计数板
计数器
微量移液器
微量移液器
三角瓶
储水瓶
热封口机
分装架
载玻片
盖玻片
擦镜纸
移液枪吸嘴
稀释剂
规格(技术参数)
3000g/1g,6000g/2g
40×~1600X
室温~50℃(可调),工作面温差≤0.5℃50mill/mL~1400mill/mL
测量范围0.0~14.0,精度±0.1
16℃~18℃
室温+5℃~250℃,波动度<±2℃冷藏室0℃~4℃
200g/0.01g
双孔或四孔
0℃~99℃,容量<500mL
25×16
100μL~200μL
100 μL~1000 μL
1000mL±5mL
1000mL
1000mL.2000mL
200μL
称蛋精液、稀释液
GB/T25172—2020
观测精子数、活力和畸形率
载玻片、盖玻片恒温预热
测定精子密度
测定精液、稀释液的pH
保存精液
预热器血和消毒用品
保存试剂和剩余稀释液bzxz.net
称量化学试剂(选用)
等温精液与稀释液
稀释液搅拌、加热
测定精子密度
精子计数
精液取样或稀释
精液取样或稀释
量取液体
配制稀释液
盛放配制用水
精液稀释
袋装精液封口
分装精液
精子活力的测定
精子活力的测定
擦拭显微镜镜头
精液取样或稀释
配制精液稀释液
GB/T25172—2020
精液袋、瓶
温度计
玻璃棒
标签纸
0℃~60℃
表A.1(续)
规格(技术参数)
分装及保存精液
测蛋精液、稀释液等温度
稀释液配制或精液稀释
精液、稀释液标签
附录B
(资料性附录)
常见常温精液稀释液配方
常见常温精液稀释液配方见表B.1表B.1
保存时间/d
D-葡萄糖
柠檬酸三钠
EDTA钠盐
碳酸氢钠
氯化钾
青莓素钠
硫酸链霉素
聚乙烯醇(PVPTypeI)
三羧甲基氨基甲烷(Tris)
柠檬酸
半胱氨酸
海藻糖
林肯霉素
注:单位为克每升。
配方一
常见常温精液稀释液配方
配方=
配方三
GB/T25172—2020
配方四
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