SN/T 3678—2013 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 碱茅腥黑粉菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Tilletia puccinelliae Carris, Castl. & G. Huang. 2013-08-30 发布 2014-03-01 实施 前言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。请注意，本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：刘跃庭、罗加凤、蔡国瑞、黄国明、廖芳。 1 范围 本标准规定了碱茅腥黑粉菌（Tilletia puccinelliae Carris, Castl. & G. Huang.）菌瘦检查、冬孢子形态测定、萌发实验等的步骤和方法。本标准适用于碱茅种子中碱茅腥黑粉菌的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 18085—2000 植物检疫 小麦矮化握黑穗病菌检疫鉴定方法 3 碱茅腥黑粉菌基本信息 学名：Tilletia puccinelliae Carris, Castl. & G. Huang. 中文名称：碱茅腥黑粉菌 分类地位：碱茅腥黑粉菌属 真菌界（Fungi），担子菌门（Basidiomycota），黑粉菌纲（Ustilaginomycetes），外担子菌亚纲（Exobasidiomycetidae），腥黑粉菌目（Tilletiales），腥黑粉菌科（Tilletiaceae），腥黑粉菌属（Tilletia）。 寄主：碱茅 Puccinellia distans (L.) Parl. 分布：美国 4 方法原理 病菌菌瘦及冬孢子形态特征、冬孢子萌发生理特性（参见附录 A）为碱茅腥黑粉菌的检疫鉴定依据。 5 器材和试剂 5.1 仪器设备 放大镜、灭菌培养皿（直径 9cm）、三角瓶、离心管、离心管（1.5mL）、镊子、酒精灯、载玻片、盖玻片等。 低速离心机、往复式振荡器、涡旋振荡器、体视显微镜、生物显微镜、超净工作台、生物培养箱、电子天平（感量 0.01g）、高压灭菌锅等。 5.2 试剂和培养基 吐温-20（Tween-20）、席尔氏浮载剂（见 GB/T 18085—2000 中附录 A 席尔氏浮载剂配制方法）、琼脂、0.25% 次氯酸钠 (NaClO)、无水乙醇、3% 水琼脂培养基。 附录 A（资料性附录） 碱茅腥黑粉菌菌瘘特征及冬孢子形态、萌发特征 图 A.1 碱茅腥黑粉菌菌瘦和健康种子 图 A.2 碱茅腥黑粉冬孢子形态特征（标尺 = 10μm） 说明： a) 孢子剖面观，示冬孢子刺状网脊及无色不孕孢； b) 孢子表面观，示冬孢子细密的网目。 图 A.3 碱茅腥黑粉菌冬孢子萌发特征 说明： a) 丝状初生担子和腊肠形次生担子；初生担子间“H”型融合。 参考文献 [1] 黄国明, 罗加风, 廖芳, 等. 进境碱茅上黑粉菌新记录的初步研究. 植物检疫, 2008, 22(1). [2] Xiaodong B, Carris L M, Guoming Huang, Jiafeng Luo, et al. Tilletia puccinelliae, a new species of reticulate-spored bunt fungus infecting Puccinellia distans. Mycologia, 2010, 102: 613-623. [3] Duran R, Fischer G W. The Genus Tilletia. Pullman: Washington State University Press, 1961. [4] Vanky K. Carpathian Ustilaginales. Symb. Bot. Upsal. 24: 129-144, 1985. [5] Vanky K. European smut fungi. Gustav Fisher Verlag, Stuttgart, 1994. [6] Vanky K. Taxonomic studies on Ustilaginomycetes-27. Mycotaxon 99: 1-70, 2007. [7] Matsumoto T, Bell T. 1989.