GB 7300.203-2020.Feed additive-Part 2: Vitamins, provitamins and chemically well-defined substances having similar effect-Betaine.
1范围
GB 7300的本部分规定了饲料添加剂甜菜碱的要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输、贮存和保质期。
GB 7300.203适用于由甜菜糖蜜分离、加工而成的天然甜菜碱产品,以及由氯乙酸钠盐和三甲胺化学合成的饲料添加剂甜菜碱产品。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 601化学试剂标准滴定溶液的制备
GB/T 602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备
GB/T 603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB 10648饲料标签
GB/T 13079-2006饲料中总砷的测定
GB/T 14699.1饲料采样
4要求
4.1外观性状
天然甜菜碱为白色、类白色或微黄色至淡褐色结晶性粉末;合成甜菜碱为白色、类白色或微黄色结晶性粉末。
4.2技术 指标
饲料添加剂甜菜碱产品分为天然甜菜碱和合成甜菜碱,合成甜菜碱按含量分为I型和II型两种规格,技术指标应符合表1的要求。
5试验方法
除非另有说明,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T 6682 规定的三级水，色谱用水为符合GB/T 6682规定的一级水。分析中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时,均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定制备。
5.1 外观性状
取适量样品于白瓷盘中,在自然光下目视检验其色泽与形态。
5.2鉴 别试验
5.2.1 试剂
5.2.1.1 盐酸溶液:盐酸+水=1 +4(体积比)。
5.2.1.2碘化铋钾溶液:取0.85 g碱式硝酸铋溶于10 mL乙酸中,加40 mL水。取40 g碘化钾,用水溶解并定容至100mL。将上述两种溶液等体积混合,棕色玻璃容器贮存。
5.2.1.3 碘化铋钾盐酸溶液:取碘化铋钾溶液(5.2.1.2)1 mL,加盐酸溶液(5.2.1.1)2 mL,加水至10 mL(现用现配)。

ICS65.120
中华人民共和国国家标准
GB7300.203—2020
代替GB/T21515—2008
饲料添加剂
第2部分：
维生素及类维生素
甜菜碱
Feed additive--Part 2: Vitamins,provitamins and chemically well-definedsubstanceshaving similareffectBetaine2020-05-29发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2020-12-01实施
本部分的第1章、第4章和第6章为强制性的，其余为推荐性的。GB7300《饲料添加剂》按产品分为若干部分。本部分为GB7300的第203部分。
本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草本部分代替GB/T215152008《饲料添加剂天然甜菜碱》。本部分与GB/T21515—2008相比主要技术差异如下：适用范围增加了合成甜菜碱（见第1章）；增加了合成甜菜碱技术指标（见4.2）；天然甜菜碱增加了游离胺技术指标（见4.2）；删除了抗结块剂技术指标（见4.2.2008年版的3.2）；甜菜碱含量测定标准品改为甜菜碱（见5.3.1，2008年版的4.3.1)；增加了总游离胺/氨检测方法（见5.8）一合成甜菜碱增加了氯化钠检测方法（见5.9.1）；一补充了甜菜碱标准溶液色谱图（见附录A）。本部分由中华人民共和国农业农村部提出并归口GB7300.203—2020
本部分起草单位：山东省饲料质量检验所、中国饲料工业协会、宜兴市天石饲料有限公司本部分主要起草人：张芸、宫玲玲、李竞前、孙延军、李俊玲、邹益东。本部分所代替标准的历次版本发布情况为：-GB/T21515-—2008.
1范围
饲料添加剂第2部分：
维生素及类维生素
甜菜碱
GB7300.203-—2020
GB7300的本部分规定了饲料添加剂甜菜碱的要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输、贮存和保质期。
本部分适用于由甜菜糖蜜分离、加工而成的天然甜菜碱产品，以及由氯乙酸钠盐和三甲胺化学合成的饲料添加剂甜菜碱产品。
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB/T601
GB/T602
GB/T603
GB/T6682
化学试剂标准滴定溶液的制备
化学试剂杂质测定用标准溶液的制备化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备分析实验室用水规格和试验方法GB10648饲料标签
GB/T13079—2006饲料中总神的测定GB/T14699.1饲料采样
化学名称、分子式、相对分子质量和结构式3
化学名称：三甲基甘氨酸
分子式：CH.NO2
相对分子质量：117.15（按2016年国际相对原子质量）结构式：
4要求
4.1外观性状
天然甜菜碱为白色、类白色或微黄色至淡褐色结晶性粉末；合成甜菜碱为白色、类白色或微黄色结晶性粉末。
4.2技术指标
饲料添加剂甜菜碱产品分为天然甜菜碱和合成甜菜碱，合成甜菜碱按含量分为I型和Ⅱ型两种规格，技术指标应符合表1的要求
GB7300.203—2020
甜菜碱（以干基计)/%
干燥失重/%
灼烧残渣/%
重金属（以Pb计）/（mg/kg）
总砷（以As计）/（mg/kg）
氯化钠(NaC)/%
总游离胺/氨[以（CH，),N计]/（mg/kg）硫酸盐（以SO计)/%
5试验方法
甜菜碱技术指标
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的三级水，色谱用水为符合GB/T6682规定的一级水。分析中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。5.1
外观性状
取适量样品于白瓷盘中，在自然光下目视检验其色泽与形态。鉴别试验
5.2.1试剂
5.2.1.1盐酸溶液：盐酸+水=1十4（体积比）。5.2.1.2碘化铋钾溶液：取0.85g碱式硝酸铋溶于10mL乙酸中，加40mL水。取40g碘化钾，用水溶解并定容至100mL。将上述两种溶液等体积混合，棕色玻璃容器贮存。5.2.1.3碘化铋钾盐酸溶液：取碘化铋钾溶液（5.2.1.2)1mL，加盐酸溶液（5.2.1.1)2mL，加水至10mL（现用现配）。
鉴别方法
沉淀。
称取试样0.5g，加1mL水溶解，加人2mL碘化铋钾盐酸溶液（5.2.1.3）。振摇，产生橙红色取5.3.1.4.1的溶液，按5.3.1.4.3.3上机测定，保留时间与标准溶液一致5.3
甜菜碱含量的测定
5.3.1离子色谱法（仲裁法）
5.3.1.1方法原理
用水溶解试样，将溶液稀释至合适的浓度，用阳离子交换柱和非抑制型电导检测器分离测定。外标2
法定量。
5.3.1.2试剂和材料
5.3.1.2.1甜菜碱标准品（99%）。GB7300.203-—2020
5.3.1.2.2甲基磺酸储备液：准确移取2mL甲基磺酸于100mL容量瓶中，用水定容摇匀。浓度为300mmol/L。
5.3.1.2.3流动相：准确移取10mL甲基磺酸储备液（5.3.1.2.2）于1000mL容量中，用水定容摇匀，浓度为3.0mmol/L。超声脱气5min~10min。现用现配。5.3.1.2.4甜菜碱标准储备液：称取于105℃土2℃烘干4h的甜菜碱标准品（5.3.1.2.1)0.10g（精确至0.0001g），于100mL容量瓶中，用水定容，摇匀。该溶液浓度为1000μg/mL。5.3.1.2.5滤膜：0.45μm，水系。5.3.1.3仪器设备
离子色谱仪：具有阳离子交换分析柱或性能相当的其他分析柱和电导检测器5.3.1.3.1
分析天平：感量0.1mg。
5.3.1.3.2
5.3.1.3.3电热干燥箱：温度可控制为105℃土2℃。5.3.1.4分析步骤
5.3.1.4.1提取
称取预先在105℃烘箱干燥至恒重的试样约0.25g（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，加人约70mL的水，待试样溶解后定容。取2mL至50mL容量瓶定容，摇匀，过0.45μm滤膜，待测。5.3.1.4.2标准系列溶液制备
准确吸取甜菜碱标准储备液（5.3.1.2.4）1.00mL、5.00mL、10.00mL、20.00mL、50.00mL分别置于100mL容量瓶中，用水定容后摇匀。此标准系列的浓度为10.0μg/mL50.0μg/mL、100.0pg/mL、200.0μg/mL、500.0μg/mL。现用现配。5.3.1.4.3测定
5.3.1.4.3.1离子色谱参考条件
色谱柱：阳离子交换分析柱，内径4mm.长250mm.填料粒径4.5um；或性能相当的其他色谱柱。流速：1.0mL/min。
柱温：40℃。
检测器：电导检测器。
进样量：20μL。
5.3.1.4.3.2标准曲线的绘制
待仪器稳定后，将上述标准系列（5.3.1.4.2)分别注人离子色谱仪，以甜菜碱的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制工作曲线，或计算回归方程。甜菜碱标准溶液色谱图参见附录A。5.3.1.4.3.3试样测定
取试样溶液（5.3.1.4.1）注人离子色谱仪，以峰面积定量GB7300.203—2020
5.3.1.5试验数据处理
试样中甜菜碱的含量w以质量分数（%）表示，按式（1)计算：wr
式中：
erVX25
mi×1000x1000
试样色谱峰面积对应的甜菜碱的质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；V——定容体积，单位为毫升（mL)；试样的质量，单位为克（g）。
结果表示
测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。5.3.1.7重复性
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的3%。5.3.2高氯酸滴定法
5.3.2.1方法原理
干燥至恒重的试样用冰乙酸溶解，以高氯酸为标准滴定溶液，结晶紫为指示剂进行滴定，由紫色变为蓝绿色为滴定终点。
试剂或材料
5.3.2.2.1
5.3.2.2.2
5.3.2.2.3
5.3.2.2.4
冰乙酸。
乙酸酐。
结晶紫指示液：5g/L。
高氯酸标准滴定溶液：c（HCIO,）=0.1mol/L。仪器设备
5.3.2.3.1
5.3.2.3.2
酸式滴定管：25mL。
分析天平：感量0.1mg。
5.3.2.4试验步骤
称取预先在105℃烘箱干燥至恒重的试样约0.2g（精确至0.0001g），加20mL冰乙酸（5.3.2.2.1）溶解，加10mL乙酸酐（5.3.2.2.2）摇匀后，再加结晶紫指示液（5.3.2.2.3）2滴，用高氯酸标准滴定溶液(5.3.2.2.4)滴定至溶液呈蓝绿色，同时做空白试验。5.3.2.5
试验数据处理
试样中甜菜碱的含量w2以质量分数（%）表示，按式（2)计算2
式中：
C2(V, -V20)M2
m2×1000
高氯酸标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）；滴定试样时消耗高氯酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升（mL)；（2)
V2。—一空白试验消耗高氯酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；m2
试样的质量，单位为克（g）；
甜菜碱的摩尔质量，单位为克每摩尔（g/mol)（M=117.15）。5.3.2.6
结果表示
测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。5.3.2.7
重复性
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.2%5.4干燥失重
5.4.1仪器设备
5.4.1.1电热干燥箱：温度可控制为105℃土2℃。5.4.1.2干燥器：用氯化钙或变色硅胶作干燥剂。5.4.2测定步骤
GB7300.203—2020
称取试样约1g（精确至0.0001g）于已恒重的称样血中，放入105℃土2℃电热干燥箱（5.4.1.1）中，打开称样血盖，干燥3h。取出后盖好，放人干燥器中（5.4.1.2），冷却至室温，称重。再重复干燥1h，称量至恒重。
5.4.3试验数据处理
试样的干燥失重w3以质量分数（%）表示，按式（3）计算：m3o-m2×100
式中：
干燥前试样的质量，单位为克（g）；m30
于燥后试样的质量，单位为克（g）。5.4.4结果表示
测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。5.4.5重复性
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.2%。5.5
灼烧残渣
5.5.1仪器设备
5.5.1.1：瓷质，容积50mL。
2高温炉：可控温度550℃士20℃。5.5.1.3
干燥器：用氯化钙或变色硅胶作干燥剂。5.5.2测定步骤
·（3)
在灼烧至恒重的璃（5.5.1.1）中，称取试样约1g（精确至0.0001g），在电炉上小心炭化至无黑烟5
GB7300.203—2020
再移入高温炉（5.5.1.2）于550℃土20℃灼烧3h~4h，取出后冷却1min再放入干燥器（5.5.1.3）内，冷却至室温，称量残渣及埚的重量。再重复灼烧1h，并称量至恒重。5.5.3试验数据处理
试样的灼烧残渣w以质量分数（%）表示，按式（4)计算：m41-m40
式中：
试样的质量，单位为克（g）；
空埚灼烧后的质量，单位为克（g）；m4
灼烧后埚和灼烧残渣的质量，单位为克（g）。5.5.4结果表示
测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。5.5.5重复性
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.1%。5总砷（以As计）含量的测定
按GB/T13079—2006中5.4.1.3的规定执行。5.7重金属（以Pb计）含量的测定5.7.1原理
重金属离子与负二价硫离子在弱酸介质中生成有色硫化物沉淀。重金属元素含量较低时，形成稳定的棕褐色悬浮液，可用于重金属的目视比色法测定。5.7.2试剂或材料
5.7.2.1盐酸。
硝酸。
乙酸铵。
丙三醇。
硫代乙酰胺。
氨水。
硝酸铅。
酚酸指示液：10g/L。
盐酸溶液：7mol/L。
氮试液：取氨水400mL，加水定容至1000mL。乙酸盐缓冲溶液（pH3.5）：取乙酸铵（5.7.2.3)25g，加水25mL溶解后，加7mol/L盐酸溶液（5.7.2.9)38mL，调节pH至3.5.加水定容至1000mL。5.7.2.12
氢氧化钠溶液：c(NaOH)=1mol/L。硫代乙酰胺试液：称取硫代乙酰胺（5.7.2.5）4g，加水使溶解成100mL，置于冰箱中冷藏保存。临用前取1.0mL加入混合液[由氢氧化钠溶液（5.7.2.12)15mL、水5.0mL及丙三醇（5.7.2.4）6
20mL组成5.0mL，置于水浴上加热20s.冷却，立即使用、GB7300.203-—2020
5.7.2.14：铅标准储备液：称取硝酸铅（5.7.2.7)0.160g置1000mL的容量瓶中，加硝酸（5.7.2.2)5mL与水50mL溶解后，用水稀释至刻度，摇匀。该溶液浓度为100μg/mL。密封后2℃～8℃保存，有效期3个月。或直接购买浓度为100μg/mL的铅标准溶液。5.7.2.15铅标准工作液：准确移取10mL铅标准储备液（5.7.2.14）于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。该溶液浓度为10μg/mL。现用现配，5.7.3试验步骤
5.7.3.1试液的制备
称取试样1.00g土0.01g于埚中，在电炉上小心碳化，再放人高温炉于550℃下灼烧3h。冷却后加硝酸0.5mL，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷.加盐酸2mL，置水浴上蒸干后加水15mL，滴加2滴酚酰指示液（5.7.2.8），再滴加氨试液（5.7.2.10）至对酚酰指示液显中性，加乙酸盐缓冲液（pH3.5）（5.7.2.11)2mL.微热溶解。
5.7.3.2测定
将试液过滤并转移至纳氏比色管中，加水稀释至25mL，再加入硫代乙酰胺试液（5.7.2.13）2mL，摇匀，于暗处放置2min，自上而下透视，试验溶液的颜色不得深于标准比色溶液标准比色溶液：移取1.00mL铅标准工作液，与试样同时同样处理。5.8总游离胺/氨[以（CH3）3N计]含量的测定5.8.1方法原理
试样中的游离胺/氨经碱化蒸馏使氨逸出，用过量的盐酸溶液吸收后，以甲基红-亚甲基蓝混合指示液为指示剂，用氢氧化钠标准滴定溶液反滴定，计算总游离胺/氨的含量。5.8.2试剂或材料
5.8.2.1硫酸溶液：硫酸十水=1十8（体积比）。2氢氧化钠溶液：400g/L。
氢氧化钠标准滴定溶液：c（NaOH)=0.02mol/L。5.8.2.4
4盐酸标准滴定溶液：c(HCI)=0.02mol/L。5.8.2.5
甲基红-亚甲基蓝混合指示液：取0.1%甲基红的乙醇溶液20mL，加0.2%亚甲基蓝溶液8mL，摇匀，即得。
5.8.3仪器设备
凯氏蒸馏装置：常量直接蒸留式。蒸馏仪器示意图见图1。2分析天平：感量0.1mg。
GB7300.203—2020
说明：
圆底烧瓶，容积为1L；
水蒸气发生瓶.容积为1L；
单球防溅球管；
柱形滴液斗：顶端开口，容积为100mL；5
阿里因式冷凝管：七球泡型，容积为100mL，导出管上端有一扩大的球泡，下端为出口；接收器。
图1蒸馏仪器示意图
5.8.4试验步骤
称取试样约10g（精确至0.0001g）于圆底烧瓶中，加水约300mL振荡使试样溶解。准确量取25mL盐酸标准滴定溶液（5.8.2.4），置于接收器中，加人2滴甲基红-亚甲基蓝混合指示液，并使冷凝管的下端插人液面之下，必要时加水调节。加20mL氢氧化钠溶液（5.8.2.2)于柱形滴液漏斗中，开启漏斗活塞，加氢氧化钠溶液于圆底烧瓶中，当漏斗中氢氧化钠溶液剩余约2 mL时，关闭活塞。向水蒸气发生瓶中加水至总容积的三分之二处，加2mL硫酸溶液（5.8.2.1)，使溶液呈酸性。开启水蒸气发生瓶的加热装置，用调压器控制加热速度，加热至沸，水蒸气通人圆底烧瓶内，调节水蒸气进人量，使圆底烧瓶中的内容物保持微沸，当蒸馏液收集至约100mL时，稍稍移动接收器，使导出管靠在接收器壁上，用广泛PH试纸检验馏出液，罐出液呈中性时，移去热源，用水冲洗冷凝管及其扩大的球泡洗涤液收集在接收器中，用氢氧化钠标准滴定溶液（5.8.2.3)滴定至灰绿色为终点。同时.做空白试验。
5.8.5试验数据处理
GB7300.203-—2020
试样中总游离胺/氨[以（CH，）N计的含量，以质量分数表示，单位为毫克每千克（mg/kg），按式（5)计算：
c(V50-Vs)M,X1000
式中：
氢氧化钠标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L)；Vo
空白消耗的氢氧化钠标准溶液的体积，单位为毫升（mL)；Vs1——试样消耗的氢氧化钠标准溶液的体积，单位为毫升（mL)；M——三甲胺的摩尔质量，单位为克每摩尔（g/mol)（M，=59.1)；ms
试样的质量，单位为克（g）。
5.8.6结果表示
测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。5.8.7重复性
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于30mg/kg。5.9氯化钠（NaCI)含量的测定
5.9.1合成甜菜碱
5.9.1.1方法原理
·（5)
试样中的氯离子溶解于水溶液中，加人硝酸银标准溶液使氮化物生成氯化银沉淀，过量的硝酸银溶液用硫氰酸铵或硫氰酸钾标准溶液滴定。5.9.1.2
2试剂或材料
5.9.1.2.1
硝酸。
5.9.1.2.2
5.9.1.2.3bzxZ.net
5.9.1.2.4
硫酸铁铵饱和溶液：用硫酸铁铵[NH,Fe(SO4)2·12H,O]制备硝酸银标准滴定溶液：c（AgNO：）=0.1mol/L。硫氰酸铵或硫氰酸钾标准滴定溶液：c（NH,SCN)=0.1mol/L，c（KSCN)=0.1mol/L5.9.1.3
仪器设备
分析天平：感量0.1mg。
5.9.1.3.1
5.9.1.3.2
酸式滴定管：25mL
5.9.1.4试验步骤
称取预先在105℃烘箱干燥至恒重的试样约10g（精确至0.0001g）于锥形瓶中，用100mL水溶解。加5mL硝酸（5.9.1.2.1）.2mL硫酸铁铵饱和溶液（5.9.1.2.2），并从加满硫氰酸铵或硫氰酸钾标准滴定溶液（5.9.1.2.4）至0刻度的滴定管中滴加2滴硫氰酸铵或硫氰酸钾标准滴定溶液，用硝酸银标准滴定溶液（5.9.1.2.3）滴定直至红棕色消失，再加人5mL过量的硝酸银滴定溶液（5.9.1.2.3），剧烈摇动使沉淀凝聚。用硫氰酸铵或硫氰酸钾标准滴定溶液（5.9.1.2.4）滴定过量的硝酸银溶液，直至产生红棕色能保持30s不褪色9
GB7300.203—2020
同时，做空白试验。
5.9.1.5试验数据处理
试样中氯化钠(NaCI)的含量w，以质量分数（%）表示，按式（6)计算：M。×[(V.-Va)Xc.-(V.-V)×cl×1006
式中：
mX1000
M。一—氯化钠的摩尔质量，单位为克每摩尔（g/mol)（M=58.44）Vs—一试样溶液滴加硝酸银溶液体积，单位为毫升（mL）；V.—空白溶液滴加硝酸银溶液体积，单位为毫升（mL)；C
硝酸银标准溶液浓度，单位为摩尔每升（mol/L）：Vu
试样溶液滴加硫氰酸铵或硫氰酸钾溶液体积，单位为毫升（mL）；Va
空白溶液滴加硫氰酸铵或硫氰酸钾溶液体积，单位为毫升（mL）；C
硫氰酸铵或硫氰酸钾溶液浓度，单位为摩尔每升（mol/L)；试样的质量，单位为克（g)。
结果表示
测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。5.9.1.7重复性
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.1%。5.9.2天然甜菜碱
5.9.2.1仪器设备
分析天平：感量0.1mg。
5.9.2.1.1
5.9.2.2试剂
......(6)
5.9.2.2.1氯化物储备液（1mL溶液含有0.1mgCl-）：称取0.165g于500℃～600℃灼烧至恒重的氯化钠，溶于超纯水，并定容至1000mL。5.9.2.2.2氯化物标准溶液（1mL溶液含有0.01mgCl-）：准确移取氯化物储备液（5.9.2.2.1）10mL于100mL容量瓶中，用超纯水稀释并定容。5.9.2.2.3硝酸溶液：25%。量取308mL硝酸，用超纯水稀释至1000mL。5.9.2.2.4硝酸银溶液：17g/L。称取1.7g硝酸银，用超纯水溶解并定容至100mL。5.9.2.3试验步骤
称取试样5g（精确至0.01g）于烧杯中，用超纯水溶解并定容至100mL。过滤，取滤液10mL于25mL纳氏比色管中。
准确移取5mL氯化物标准溶液（5.9.2.2.2）于另一支25mL纳氏比色管中在上述两支钠氏比色管中，分别加入1mL硝酸溶液（5.9.2.2.3）和1mL硝酸银溶液（5.9.2.2.4），加超纯水定容至25mL。摇匀，静置10min。试样溶液所呈浊度不得于标准溶液10
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