SN/T 3292-2012
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SN/T 3292-2012.Detection and identification of Atropellis piniphila (Weir) Lohman et Cash.
1范围
SN/T 3292规定了植物检疫中嗜松枝干溃疡病菌Atropellis piniphila ( Weir) Lohman et Cash的检疫鉴定方法。
SN/T 3292适用于来自嗜松枝干溃疡病菌发生国家和地区的松属寄主植物(参见附录A)的苗木、木材.及木质包装的检疫鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T 2122进 出境植物及植物产品检疫抽样
3原理
3.1 分类地位
英文名:Branch and trunk cankerof pine, Twig blight
学名:Atropellis piniphila (Weir) Lahman et Cash
异名:Cenangipm piniphilpm Weir,At ropelis arizonicaLohman & Cash
嗜松枝干溃疡病菌隶属真菌界(Fungi),子囊菌亚门( Asconycotim),柔膜菌目( Helotiales),黑皮柔膜菌属(Atropellis)。
3.2传播途径
嗜松枝干溃疡病菌近距离主要通过子囊孢子随风流进行传播，远距离主要通过携带该病菌的苗木、木材及木质包装进行传播。
3.3 鉴定原理
嗜松枝干溃疡病菌的形态特征(参见附录B)是其检疫鉴定的主要依据,同时参考该病菌的发生国家和地区、寄主范围、传播途径以及危害症状。
1范围
SN/T 3292规定了植物检疫中嗜松枝干溃疡病菌Atropellis piniphila ( Weir) Lohman et Cash的检疫鉴定方法。
SN/T 3292适用于来自嗜松枝干溃疡病菌发生国家和地区的松属寄主植物(参见附录A)的苗木、木材.及木质包装的检疫鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T 2122进 出境植物及植物产品检疫抽样
3原理
3.1 分类地位
英文名:Branch and trunk cankerof pine, Twig blight
学名:Atropellis piniphila (Weir) Lahman et Cash
异名:Cenangipm piniphilpm Weir,At ropelis arizonicaLohman & Cash
嗜松枝干溃疡病菌隶属真菌界(Fungi),子囊菌亚门( Asconycotim),柔膜菌目( Helotiales),黑皮柔膜菌属(Atropellis)。
3.2传播途径
嗜松枝干溃疡病菌近距离主要通过子囊孢子随风流进行传播，远距离主要通过携带该病菌的苗木、木材及木质包装进行传播。
3.3 鉴定原理
嗜松枝干溃疡病菌的形态特征(参见附录B)是其检疫鉴定的主要依据,同时参考该病菌的发生国家和地区、寄主范围、传播途径以及危害症状。
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标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T3292—2012
嗜松枝干溃疡病菌检疫鉴定方法Detection and identification of Atropellis piniphila (Weir) Lohman et Cash2012-10-23发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2013-05-01实施
本标准按照GB/T 1.1一2009给出的规则起节SN/T3292—2012
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准国家认证认可监督管理委员会提出并归口本标准起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局本标准主要起草人：李百胜、纪睿、廖太林、安榆林、吴翠萍。1范围
嗜松枝干溃疡病菌检疫鉴定方法SN/T3292—2012
本标准规定了植物检疫中嗜松枝干溃疡病菌Atropeltispiniphita（Weir）LohmanetCash的检疫鉴定方法
本标准适用于来自嗜松枝干溃疡病菌发生国家和地区的松属寄主植物（参见附录A）的苗木、木材及木质包装的检疫鉴定。
2规范性引用文件
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文下列文件对于本文件的应用是必不可少的。件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2122进出境植物及植物产品检疫抽样3原理
3.1分类地位
英文名：Branchandtrunkcankerpine,Twie blighi
学名：Atropellispiniphila（Win）io异名：CenangiumpiniphiluneWeir.嗜松枝干溃疡病菌秉属真菌
柔膜菌属（Atropellis）。
3.2传播途径
amantCush
roperifsare
），子囊菌亚门
Ascomydotin
a），柔膜菌目（Helotiales），黑皮嗜松枝干溃疡病菌近距离主要通过子诞拖子随气流进行传插播，远距离主要通过携带该病菌的苗木木材及木质包装进行传播，
3.3鉴定原理
嗜松枝干溃疡病菌的形态特征（参见附录B）是其检疫鉴定的主要依据，同时参考该病菌的发生国家和地区，寄主范围，传播途径以及危害症状。4仪器和用具
4.1仪器
光学显微镜（具油镜和测微尺）、电子天平、超净工作台、光照培养箱、高压灭菌锅。4.2用具
培养皿、烧杯，三角瓶、试管、镊子、剪刀、载玻片、盖玻片，量筒，吸管、酒精灯。SN/T 3292—2012
5试剂和培养基
5.1试剂
麦芽糖、蛋门陈、琼脂、无菌水、75%酒精、1.25%次氛酸钠、氨氧化钾。5.2培养基
麦朱糖琼脂培养基（参见附录（）。6检疫鉴定方法
6.1抽样
按SN/T 2122进行袖样。
6.2现场查验
抽取的苗木、木材，木质包装，仔细观察针叶是香褪色，衣面有无流脂.溃疡斑，溃疡斑内有无黑褐色的子实体（子毫盘，用弃子，锯于或刀片分别横向、纵向划开，仔细观祭溃暢斑下面的不质部比是香有特征性的些黑色污渍（在蓝黑色区域的边缘，木质部通常呈红色或色），将可疑症状样本带回实验室作进一步检验。
6.3实验室检验
6.3.1切片检验
将氮似发病样品选取病健交界处或带有黑点部分的组织切片，置于载玻片上，以无菌水作为浮载剂·在显缴镜下逃行规察，或进行保湿培养后再做镜检。6.3.2保湿培养
6. 3.2. 1 苗木
取发病苗木的主根和侧根.用75%酒精消毒1min，用无菌水冲洗3次，切取根部病健交界处3mm~5mn大小的组织置丁垫三层灭菌壶滤纸的培养血中，在2C培养箱中培养，黑暗和光照各12 h 交替,培养 7 d-~10 d
6. 3, 2. 2 术材,木质包装
取发病树枝，千或具疡斑木质部的病健交界处，用75%酒精消毒1min，无菌水冲洗3次，切取3mm～5mm大小的组织置丁艳三层灭菌湿滤纸的培养Ⅲ，在20℃培养箱中培养，黑暗和光照各12h交替,培养7 d-10 d。
6. 3.3分离培养
培养7--10后，观察种子表面或植物组织表面是古有菌丝生长，如有，挑取少量谢丝转到麦芽糖琼脂培养基，在20培养箱中，黑暗和光照各12h交替培养，直至产生病菌繁殖器官。在显微镜下观察有性繁殖器官，如子囊盘、子龚和了衰孢子等。2
KAONIKAca
7鉴定特征
SN/T3292—2012
嗜松枝于溃疡病菌侵染奇主植物，使寄主植物针叶褪色、表面流脂、产生溃疡斑，溃疡斑内常产牛熙褐色的了实体，溃疡斑下面的木质部上具有特征性的蓝黑色污溃，在蓝黑色区域的边缘，木质部通常呈红色或褐色。病菌子粪盘突出，黑褐色，不规则圆盘形，具短中轴，直径2mm~5mm、了袭（85μm~90μum）×160uml。子孢子透明：椭圆形至拟纺锤形，无隔或具单隔膜（极少数具3个隔膜），大小（14μm~-32μm)×（4μm~8μm）。分生孢子壁极薄，透明.无隔膜，圆柱形、端部圆形.具粘性外壳，大小(3,5μm~8.3μm）×(0.7±m-~1.7μm)。嗜松梭干溃疡病菌与近似种的区别参见附录D。8结果判定
如病菌在寄主上的症状和形态特征与第7章描述的相符,即可判定为检出嗜松枝「溃疡病菌Atropetlis piniphita(Weir)Iohman et Cash.9样品,菌种保存
分离菌转接在培养基斜面「·待斜面表面长满菌丝后，貿于4保存，定期（每隔612个月)转接有条件可进行冷冻干燥保存。
检出病菌的样品妥善保存，保存期限为不少于12个月，保存期满灭活处理。itKAoNiiKAca
SN/T3292—2012
A.1分布
美国，加拿大
A.2寄主
附录A
（资料性附录）
嗜松枝干溃疡病菌分布和寄主
扭叶松（Pinuscontorta）、美国自皮松（Palbicael)、北美短叶松（P.banksiana）、黑材松（P.jeffreyi）、加州山松（P.monticola）、西黄松（P.ponderosa）火炬松（P.taeda）、矮松（P.virginiana）S
TTKAoNIKAca
a）成熟的子囊盘
附录B
（资料性附录）
嗜松枝干溃疡病菌形态特征
SN/T3292—2012
b）未开放的子囊盘
嗜松枝干溃疡病菌形态特征（引自ReidJ&FunkA.Mycologia1966.58：417-439）图B.1
TKAONKAca
SN/T3292-2012
发芽糖
蛋白陈
无菌水
附录C
(资料性附录）
麦茅糖琼脂培养基
1 oco ml.
将上述成分加热溶解，分装在三角顺或试管中.121℃高压蒸汽灭南[5min～20min。KAONIKAca
附录D
（资料性附录）
嗜松枝干溃疡病菌与近似种的区别表D.1睹松枝干溃疡病菌与近似种的区别Arropellis. piniphila
子衰盘浸人 5%的 KOH
颤色反应溶液中,KOH 溶液变为
蓝绿色
子囊形子不尺细尖，子囊
疤子捕圆形至拟纺锤形，
无隔膜或具1个隔膜(被
子囊孢子
生长温度
少数具 3个厢膜),
(14 μ~ 32 μm） ×
(4μm~ μm);子囊
(85 μm- 90 μm） ×
160μm
在变朱琼脂培养基上培
养,30 ℃,病菌尘长微弱
A.pinicotat
A. tingens
子囊盘浸人5%的 K(H子囊盘浸人 5%的 KOH溶液中,KOH 溶液变为」溶液中,KOIH 溶液变为蓝绿色
子囊袍了不其细尖，了囊
饱子丝状,针状至摔状,
透明，1至6个细胞，大小
<32μm~63μm）×
(1. 5 μm~3. 5 μm);可囊
(74 μm ~ 178 μm) ×
(8 μm--13 μm)
在麦茅琼脂培养基土培
养,25 ,病菌生长即受
蓝绿色
了囊孢子不具尖，子囊
孢子细长纺锤形，透明;
1 至 4 个细胞(少数 5 或
6个细胞)（20 μI ~
46 μm)X(2 μm--4. D μm);
子囊（70μm130μm）×
(8μm~14 μm)
在麦芽琼脂培养基土培
养,30 ℃，病菌生长受
SN/T 3292—2012
A.dpicutata
子囊盐浸人 5%的
KOH 溶液中,KOH
溶液变为巧克力免费标准bzxz.net
子暴独子具明显的
细尖,子囊孢子拟纺
睡形，1~2个细胞
少数3个细胞，
(20 μm-- 24 μm) ×
(48um~6.5μm)
SN/T:3292—2012
發考文献
Lu] Anon,Atropellia canker of pine. In: Internationally dangcrous forest trc diseases. Miscellancous Publication of the Fornsi Service, US Departinent of Agriculiure. 1963,No. 939,84-85.i2i Baranyay J A,Saabu T, Hunt K. Effect f Atropelli: cankel on growth and unilizasion uflodgcpole pine.Informatian ReportForestry Service,1973,Canadla No.BC-X-86.[3] Diller J D, Diferentiation of three Atropellis spccics,bazel on gross cultural characteristics.Phytopathology.1962,52:1217.1218.[4] Hopikins J C. Atrupellis canker ol lodgepole pine. Etiology,sytrupluns and canker growthrale. Canadian Journal of Bolany.1963,4l.1535-1545._5: Reid J.Funk A. The genus Atropellis, and a new genus af the Ilelotiales assouialed withbranch cankers of wes1trn Herulock. Mycologia 1966,58 :417-439.6JEPPO,Atrupettisspp.http://cppo.org/QCARANTINE/fungi/Atropellis..pinicola/ATRPsP_dls.pdr,2009.
「7游应天等.中国+要外来树种引进裁培.北京科技出版社，1991，[8」中国森林编辑委员会，中国森林（第1卷）.中国林业出版社，1997.L9中国森林编轩委员会，中国森林（第2卷).中国林业出版社,1997L10」廖太林,李胜,叶建仁等.近境木质材料携带松树脂溃疡病的可能性及风险分析.南京林业大学学报（白然科学版）,2004，28（6)：1014，
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嗜松枝干溃疡病菌检疫鉴定方法Detection and identification of Atropellis piniphila (Weir) Lohman et Cash2012-10-23发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2013-05-01实施
本标准按照GB/T 1.1一2009给出的规则起节SN/T3292—2012
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准国家认证认可监督管理委员会提出并归口本标准起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局本标准主要起草人：李百胜、纪睿、廖太林、安榆林、吴翠萍。1范围
嗜松枝干溃疡病菌检疫鉴定方法SN/T3292—2012
本标准规定了植物检疫中嗜松枝干溃疡病菌Atropeltispiniphita（Weir）LohmanetCash的检疫鉴定方法
本标准适用于来自嗜松枝干溃疡病菌发生国家和地区的松属寄主植物（参见附录A）的苗木、木材及木质包装的检疫鉴定。
2规范性引用文件
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文下列文件对于本文件的应用是必不可少的。件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2122进出境植物及植物产品检疫抽样3原理
3.1分类地位
英文名：Branchandtrunkcankerpine,Twie blighi
学名：Atropellispiniphila（Win）io异名：CenangiumpiniphiluneWeir.嗜松枝干溃疡病菌秉属真菌
柔膜菌属（Atropellis）。
3.2传播途径
amantCush
roperifsare
），子囊菌亚门
Ascomydotin
a），柔膜菌目（Helotiales），黑皮嗜松枝干溃疡病菌近距离主要通过子诞拖子随气流进行传插播，远距离主要通过携带该病菌的苗木木材及木质包装进行传播，
3.3鉴定原理
嗜松枝干溃疡病菌的形态特征（参见附录B）是其检疫鉴定的主要依据，同时参考该病菌的发生国家和地区，寄主范围，传播途径以及危害症状。4仪器和用具
4.1仪器
光学显微镜（具油镜和测微尺）、电子天平、超净工作台、光照培养箱、高压灭菌锅。4.2用具
培养皿、烧杯，三角瓶、试管、镊子、剪刀、载玻片、盖玻片，量筒，吸管、酒精灯。SN/T 3292—2012
5试剂和培养基
5.1试剂
麦芽糖、蛋门陈、琼脂、无菌水、75%酒精、1.25%次氛酸钠、氨氧化钾。5.2培养基
麦朱糖琼脂培养基（参见附录（）。6检疫鉴定方法
6.1抽样
按SN/T 2122进行袖样。
6.2现场查验
抽取的苗木、木材，木质包装，仔细观察针叶是香褪色，衣面有无流脂.溃疡斑，溃疡斑内有无黑褐色的子实体（子毫盘，用弃子，锯于或刀片分别横向、纵向划开，仔细观祭溃暢斑下面的不质部比是香有特征性的些黑色污渍（在蓝黑色区域的边缘，木质部通常呈红色或色），将可疑症状样本带回实验室作进一步检验。
6.3实验室检验
6.3.1切片检验
将氮似发病样品选取病健交界处或带有黑点部分的组织切片，置于载玻片上，以无菌水作为浮载剂·在显缴镜下逃行规察，或进行保湿培养后再做镜检。6.3.2保湿培养
6. 3.2. 1 苗木
取发病苗木的主根和侧根.用75%酒精消毒1min，用无菌水冲洗3次，切取根部病健交界处3mm~5mn大小的组织置丁垫三层灭菌壶滤纸的培养血中，在2C培养箱中培养，黑暗和光照各12 h 交替,培养 7 d-~10 d
6. 3, 2. 2 术材,木质包装
取发病树枝，千或具疡斑木质部的病健交界处，用75%酒精消毒1min，无菌水冲洗3次，切取3mm～5mm大小的组织置丁艳三层灭菌湿滤纸的培养Ⅲ，在20℃培养箱中培养，黑暗和光照各12h交替,培养7 d-10 d。
6. 3.3分离培养
培养7--10后，观察种子表面或植物组织表面是古有菌丝生长，如有，挑取少量谢丝转到麦芽糖琼脂培养基，在20培养箱中，黑暗和光照各12h交替培养，直至产生病菌繁殖器官。在显微镜下观察有性繁殖器官，如子囊盘、子龚和了衰孢子等。2
KAONIKAca
7鉴定特征
SN/T3292—2012
嗜松枝于溃疡病菌侵染奇主植物，使寄主植物针叶褪色、表面流脂、产生溃疡斑，溃疡斑内常产牛熙褐色的了实体，溃疡斑下面的木质部上具有特征性的蓝黑色污溃，在蓝黑色区域的边缘，木质部通常呈红色或褐色。病菌子粪盘突出，黑褐色，不规则圆盘形，具短中轴，直径2mm~5mm、了袭（85μm~90μum）×160uml。子孢子透明：椭圆形至拟纺锤形，无隔或具单隔膜（极少数具3个隔膜），大小（14μm~-32μm)×（4μm~8μm）。分生孢子壁极薄，透明.无隔膜，圆柱形、端部圆形.具粘性外壳，大小(3,5μm~8.3μm）×(0.7±m-~1.7μm)。嗜松梭干溃疡病菌与近似种的区别参见附录D。8结果判定
如病菌在寄主上的症状和形态特征与第7章描述的相符,即可判定为检出嗜松枝「溃疡病菌Atropetlis piniphita(Weir)Iohman et Cash.9样品,菌种保存
分离菌转接在培养基斜面「·待斜面表面长满菌丝后，貿于4保存，定期（每隔612个月)转接有条件可进行冷冻干燥保存。
检出病菌的样品妥善保存，保存期限为不少于12个月，保存期满灭活处理。itKAoNiiKAca
SN/T3292—2012
A.1分布
美国，加拿大
A.2寄主
附录A
（资料性附录）
嗜松枝干溃疡病菌分布和寄主
扭叶松（Pinuscontorta）、美国自皮松（Palbicael)、北美短叶松（P.banksiana）、黑材松（P.jeffreyi）、加州山松（P.monticola）、西黄松（P.ponderosa）火炬松（P.taeda）、矮松（P.virginiana）S
TTKAoNIKAca
a）成熟的子囊盘
附录B
（资料性附录）
嗜松枝干溃疡病菌形态特征
SN/T3292—2012
b）未开放的子囊盘
嗜松枝干溃疡病菌形态特征（引自ReidJ&FunkA.Mycologia1966.58：417-439）图B.1
TKAONKAca
SN/T3292-2012
发芽糖
蛋白陈
无菌水
附录C
(资料性附录）
麦茅糖琼脂培养基
1 oco ml.
将上述成分加热溶解，分装在三角顺或试管中.121℃高压蒸汽灭南[5min～20min。KAONIKAca
附录D
（资料性附录）
嗜松枝干溃疡病菌与近似种的区别表D.1睹松枝干溃疡病菌与近似种的区别Arropellis. piniphila
子衰盘浸人 5%的 KOH
颤色反应溶液中,KOH 溶液变为
蓝绿色
子囊形子不尺细尖，子囊
疤子捕圆形至拟纺锤形，
无隔膜或具1个隔膜(被
子囊孢子
生长温度
少数具 3个厢膜),
(14 μ~ 32 μm） ×
(4μm~ μm);子囊
(85 μm- 90 μm） ×
160μm
在变朱琼脂培养基上培
养,30 ℃,病菌尘长微弱
A.pinicotat
A. tingens
子囊盘浸人5%的 K(H子囊盘浸人 5%的 KOH溶液中,KOH 溶液变为」溶液中,KOIH 溶液变为蓝绿色
子囊袍了不其细尖，了囊
饱子丝状,针状至摔状,
透明，1至6个细胞，大小
<32μm~63μm）×
(1. 5 μm~3. 5 μm);可囊
(74 μm ~ 178 μm) ×
(8 μm--13 μm)
在麦茅琼脂培养基土培
养,25 ,病菌生长即受
蓝绿色
了囊孢子不具尖，子囊
孢子细长纺锤形，透明;
1 至 4 个细胞(少数 5 或
6个细胞)（20 μI ~
46 μm)X(2 μm--4. D μm);
子囊（70μm130μm）×
(8μm~14 μm)
在麦芽琼脂培养基土培
养,30 ℃，病菌生长受
SN/T 3292—2012
A.dpicutata
子囊盐浸人 5%的
KOH 溶液中,KOH
溶液变为巧克力免费标准bzxz.net
子暴独子具明显的
细尖,子囊孢子拟纺
睡形，1~2个细胞
少数3个细胞，
(20 μm-- 24 μm) ×
(48um~6.5μm)
SN/T:3292—2012
發考文献
Lu] Anon,Atropellia canker of pine. In: Internationally dangcrous forest trc diseases. Miscellancous Publication of the Fornsi Service, US Departinent of Agriculiure. 1963,No. 939,84-85.i2i Baranyay J A,Saabu T, Hunt K. Effect f Atropelli: cankel on growth and unilizasion uflodgcpole pine.Informatian ReportForestry Service,1973,Canadla No.BC-X-86.[3] Diller J D, Diferentiation of three Atropellis spccics,bazel on gross cultural characteristics.Phytopathology.1962,52:1217.1218.[4] Hopikins J C. Atrupellis canker ol lodgepole pine. Etiology,sytrupluns and canker growthrale. Canadian Journal of Bolany.1963,4l.1535-1545._5: Reid J.Funk A. The genus Atropellis, and a new genus af the Ilelotiales assouialed withbranch cankers of wes1trn Herulock. Mycologia 1966,58 :417-439.6JEPPO,Atrupettisspp.http://cppo.org/QCARANTINE/fungi/Atropellis..pinicola/ATRPsP_dls.pdr,2009.
「7游应天等.中国+要外来树种引进裁培.北京科技出版社，1991，[8」中国森林编辑委员会，中国森林（第1卷）.中国林业出版社，1997.L9中国森林编轩委员会，中国森林（第2卷).中国林业出版社,1997L10」廖太林,李胜,叶建仁等.近境木质材料携带松树脂溃疡病的可能性及风险分析.南京林业大学学报（白然科学版）,2004，28（6)：1014，
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