SN/T 3498-2013
基本信息
标准号： SN/T 3498-2013
中文名称：温泉鱼类志贺邻单胞菌病检疫技术规范
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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下载大小：1772303
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
SN/T 3498-2013.Quarantine protocol for Plesiomonas shigelloides from Garra rufa.
1范围
SN/T 3498规定了温泉鱼类志贺邻单胞菌病的检疫技术规范。
SN/T 3498适用于温泉鱼类志贺邻单胞菌病的临床诊断和分离鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3临床诊断
3.1 临床症状
鱼群出现厌食或不吃食;病鱼静止不动或阵发性乱游乱窜，或在池边摩擦,最后衰竭而死;鱼体出现体色异常，呈现黑色;死鱼有较明显的出血症状。
3.2病理变化
病鱼鳍条基部及鱼体两侧轻度充血,体表侧线两侧出现白斑或溃疡斑,随着病情的加重,斑的颜色逐渐变深,严重病情时斑的颜色呈现黑色,鳃盖周围有出血点或出血斑，鳃、肝、肾的颜色均较淡,呈现灰白色;肝脏出现出血点，胆囊肿大:腹腔内积有腹水,腹水呈淡黄色透明或红色浑浊;肠道出血或肠壁变透明,可见肠内容物。
疫病的详细描述参见附录A
4分离鉴定
4.1设备和器械
4.1.1 生物安全柜。
4.1.2普通光学显微镜。
4.1.3高压灭菌锅
1范围
SN/T 3498规定了温泉鱼类志贺邻单胞菌病的检疫技术规范。
SN/T 3498适用于温泉鱼类志贺邻单胞菌病的临床诊断和分离鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3临床诊断
3.1 临床症状
鱼群出现厌食或不吃食;病鱼静止不动或阵发性乱游乱窜，或在池边摩擦,最后衰竭而死;鱼体出现体色异常，呈现黑色;死鱼有较明显的出血症状。
3.2病理变化
病鱼鳍条基部及鱼体两侧轻度充血,体表侧线两侧出现白斑或溃疡斑,随着病情的加重,斑的颜色逐渐变深,严重病情时斑的颜色呈现黑色,鳃盖周围有出血点或出血斑，鳃、肝、肾的颜色均较淡,呈现灰白色;肝脏出现出血点，胆囊肿大:腹腔内积有腹水,腹水呈淡黄色透明或红色浑浊;肠道出血或肠壁变透明,可见肠内容物。
疫病的详细描述参见附录A
4分离鉴定
4.1设备和器械
4.1.1 生物安全柜。
4.1.2普通光学显微镜。
4.1.3高压灭菌锅
标准图片预览
标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T3498—2013
温泉鱼类志贺邻单胞菌病检疫技术规范Quarantine protocol for Plesiomonas shigelloides from Garra rufa2013-03-01发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2013-09-16实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T3498-—2013
本标准起草单位：中华人民共和国四川出人境检验检疫局、四川农业大学、中华人民共和国重庆出入境检验检疫局：
本标准主要起草人：余华、杨光友、王昱、严玉宝、李应国、岳川、刘洋洋、陈世界、周岷江、胡娟、崔鹏博。
1范围
温泉鱼类志贺邻单胞菌病检疫技术规范本标准规定了温泉鱼类志贺邻单胞菌病的检疫技术规范本标准适用于温泉鱼类志贺邻单胞菌病的临床诊断和分离鉴定。2规范性引用文件
SN/T3498—2013
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注白期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方3临床诊断
3.1临床症状
鱼群出现厌食或不吃食；病鱼静现体色异常，呈现黑色；死鱼有较明显的出血症状，3.2病理变化
，或在池边摩擦，最后衰竭而死：鱼体出表侧线两侧出现
白斑或溃疡斑，随着病情的加重，斑的颜色病鱼鳍条基部及鱼体两侧轻度充血，鳃盖周围有出血点或出血斑鱼逐渐变深，严重病情时斑的颜色导现黑鳃、肝、肾的颜色均较淡，呈现灰白色；肝脏出现出血点，胆囊肿大腹腔肉为积有腹水，腹水呈淡黄
色透明或红色浑浊：肠道出血或肠壁变透明，可见肠内容物。
疫病的详细描述参见附录A
4分离鉴定
设备和器械
生物安全柜。
普通光学显微镜。
高压火菌锅。
恒温培养箱（37℃土1℃）
解剖器械。
全自动生化鉴定系统
4.2培养基和试剂
以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682规定的二级水普通营养琼脂平板，制备见附录B的B.14.2.1
SN/T3498—2013
革兰氏染色液，配制见B.2~B.4。SIM培养基，配制见B.5
Kovacs试剂，配制见B.6。
市售触酶试剂。
市售氧化酶试剂。
糖发酵试验管配制见B.7。
O/129诊断纸片，制作见B.8。
市售生化鉴定管（具体名称见附录C)。4.3
类志贺邻单胞菌的分离和鉴定
4.3.1样品采集
挑选5~10尾濒死的或带有上述症状的温泉鱼，使用无菌水冲洗体表后，用75%的酒精棉球擦拭体表，无菌操作解剂发病温泉鱼，采用接种环从病鱼出血点或出血斑处、肝脏、脾牌脏和肾脏蘸取渗出物4.3.2分离和纯化
接种环划线接种到普通营养琼脂平板培养基，37℃恒温培养24h。挑取数个可疑单菌落，划线培养于普通营养琼脂平板上，37℃恒温纯化培养24h。类志贺邻单胞菌于普通营养琼脂平板的纯菌落生长良好，形成边缘整齐、表面湿润、中央隆起、光滑、半透明、灰白色至淡黄色的圆形菌落。4.3.3鉴定
4.3.3.1染色镜检
挑取疑似菌落涂片到干净的玻璃载玻片，在酒精灯火焰上方固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗：滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗；滴加95%乙醇脱色，约30s（或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s水洗：滴加沙黄复染液，复染1min；水洗，风干，镜检。志贺邻单胞菌为革兰氏阴性直杆菌.两端圆润，染色呈红色。4.3.3.2初步生化试验
4.3.3.2.1氧化酶试验
挑取少许单菌落涂抹于无菌的白色的滤纸片上，滴加1%盐酸四甲基对苯二胺（或商品化）氧化酶试剂于菌落之上.15s~-30s呈深紫色到暗绿色为阳性，否则为阴性。4.3.3.2.2触酶试验
挑取少许单菌落涂抹丁干净的载玻片上，滴加2～3滴3头过氧乙酸（或商品化）触酶试剂，10s～20s出现大量气泡者为阳性，否则为阴性。4.3.3.2.3运动性和吲哚试验
取氧化酶、触酶阳性菌落穿刺接种SIM培养基，37℃培养24h，观察，细菌沿穿刺线向两侧扩增为具运动性，否则为不具运动性；往管中加人数滴三氯甲烷（此时不要与火接触），2min后再向管中加数滴Kovacs试剂，出现红色者为吲哚阳性，否则为阴性。4.3.3.2.4糖发酵试验
挑取呵哚阳性.有运动活性的可疑菌落少许。分别接种葡萄糖、麦芽糖发酵管（见B.7）。37℃培2
TKAONKAca
养24h。凡试验管颜色从紫色变为黄色，表明细菌可发酵该种糖类，则判为阳性4.3.3.2.50/129敏感性试验
SN/T3498—2013
挑取发酵葡萄糖、麦芽糖的可菌落接种营养肉汤，37℃培养24h。用无菌玻棒将待检菌菌悬液均匀涂布于营养琼脂平板上，将0/129诊断纸片贴于平板上，置37℃孵育18h24h，观察结果。出现抑菌圈者表示敏感，无抑菌圈者为耐药。4.3.3.3
3确认试验
将上述试验结果均为阳性的菌株，接种到营养琼脂平板（或斜面）。37℃培养24h后，取适量利用全自动生化鉴定仪（或同类设备）进行鉴定。操作方法参照仪器说明书。若无全白动生化鉴定仪，则对照附录C依次进行生化试验。
结果判定
结果判定如下：
若确认试验采用全自动生化鉴定仪（或同类设备），结果以生化鉴定仪的检测报告为准；若确认试验采用生化鉴定管进行附录C中的生化鉴定项日，至少符合星号（*）标示的全部生b)
化特征，则为类志贺邻单胞菌阳性，否则为类志贺邻单胞菌阴性若非星号（*）标示的生化项目只是部分符合，则判定为可疑，进行重复试验仍为可疑，则进行e
基因测序或用全白动生化鉴定仪检测加以确认。5综合判定
如果出现典型临床症状和病理变化，且分离出类志贺邻单胞菌，则诊断为“温泉鱼类志贺邻单胞菌病”。若临床症状、病理变化不显著，但分离出类志贺邻单胞菌，则报告为“检出类志贺邻单胞菌”。否则为阴性。
iiKAoNiiKAca
SN/T3498—2013
附录A
（资料性附录）
疫病概述
温泉鱼学名淡红墨头鱼（Garrarufa），又名“小鱼医生”，为鲤科（Cyprinidae）、墨头鱼属（Gurra）的角类。其身长2cm~10cm，适应水温为18℃40℃，而30℃~35℃的热水比较理想，其最大的特点是喜欢以浮游生物或动物身体上的附着生物为食。该鱼种是从土耳其引进的热带鱼种，把该鱼放在温泉浴池里，让其啄食人的死皮和一些皮肤上的细菌，可以治疗皮肤病，因此被誉为治疗诸如牛皮癣等皮肤病的法宝。
温泉鱼类志贺邻单胞菌病，是由类志贺邻单胞菌（Plesiomonashigelloides）引起的一种温泉鱼细菌性败血症。类志贺邻单胞菌为肠杆菌科邻单胞菌属唯一记录亚种，为革兰阴性直杆菌，短圆状，长3.0um，宽0.8um~1.0μm，兼性厌氧，无芽孢，通常具运动性：菌落呈灰白色、不溶血，中等大小。可成双或短链状排列，有2根～5根极端鞭毛，运动活跃。氧化酶和触酶阳性，硝酸盐还原阳性，发酵葡萄糖和其他一些糖类产酸不产气。生长温度范围广可在8℃45℃生长，在0%～5%的NaCI中可生长，pH范围为4.08.0，绝人多数菌株对O/129敏感类志贺邻单胞菌是感染性腹泻及食物中毒的病原体。主要存在于自然界的水体和土壤中，也见于鱼和其他水生动物以及各种哺乳动物和人类的肠道，可以引发人类的腹泻、食物中毒和哺乳动物等疾病。其感染主要与食人生的海产品有关，流行季节以夏季为主·症状表现为短期的水样腹泻或病程较长的疾样腹泻，感染人群无年龄差别。也多见于机体抵抗力下降的人群，主要引起败血症和脑膜炎，感染儿率低，但死亡率很高。
温泉鱼类志贺邻单胞菌病的典型临床症状是，温泉鱼鱼群出现厌食或不吃食；病鱼静止不动或阵发死；鱼体出现体色异常，星现黑色；死鱼有较明显的出血症性乱游、乱审，或在池边摩擦，最后衰竭而状等。
温泉鱼类志贺邻单胞菌病的典型病理变化是，温泉鱼病鱼鳍条基部及鱼体两侧轻度充血，体表侧线两侧出现白斑或溃疡斑，随着病情的加重，斑的颜色逐新变深，严重病情时斑的颜色呈现黑色：鳃盖周围较淡，呈现灰白色；肝脏出现出血点，胆囊肿大；腹腔内积有腹水，有出血点或出血斑；鳃、肝、肾的颜色均车腹水呈淡黄色透明或红色浑浊：肠道出血或肠壁变透明，可见肠内容物等。rrKAOMiKAca
B.1营养琼脂平板
附录B
（规范性附录）
培养基和试剂的制备
SN/T3498—2013
分别称取蛋白陈10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，琼脂20.0g，蒸馏水1000mL，调节pH7.4～pH7.6，121℃灭菌15min备用
草酸铁结晶紫染液
B.2.1甲液
结晶紫
溶于95%乙醇20mL。
草酸氨
溶于蒸馏水80mL
使用前将甲液和乙液混合。
B.3革兰氏碘液
碘(1)
碘化钾
蒸馏水100mlc
复红酒精染液
碱性复红
95%乙醇
B.5SIM培养基
胰陈20g，多价陈6g，硫酸铁铵0.2g，硫代硫酸钠0.2g，琼脂3.5gpH值7.2士0.2。制法：称取本品30.0g，加热溶解于1000mL.蒸馏水中，分装试管，121高压灭菌15min备用。B.6
Kovacs试剂
对二甲基氨基苯甲醛
koNiKca
SN/T3498-—2013
浓盐酸
糖发酵试验管
先配蛋白水（蛋白陈5.0g，蒸馏水1000mL，调pH至7.4，分装，每瓶100mL）。每100mL蛋白陈水中分别加入葡萄糖1.0g、麦芽糖1.0g，充分溶解，分装试管，121℃高压灭菌20min。0/129试纸片
取2，4二氨基6.7-二异内醇碟啶150mg，溶于10mL乙醇-二乙基乙醚（体积比为1：1）中。把6mm大小的滤纸片浸人该溶液后取出，在空气中晾干，备用。6
irKAoNiKAca
葡萄糖
麦芽糖”
氧化酶
吲噪“
（规范性附录）bzxz.net
温泉鱼类志贺邻单胞菌主要生理生化反应特征表.1
β半乳糖苷酶
精氨酸双水解酶
赖氨酸脱羧酶
鸟氨酸脱羧酶
西蒙斯柠檬酸
HS硫化氧
尿素酶?
注：十为阳性：一为阴性。
温泉鱼类志贺邻单胞菌主要生理生化反应特征反应类型
“标记的生理生化反应项目应同时符合。项
色氨酸脱氨酶
2丁醇3酮（甲基乙酰甲醇）
廿露醇
山梨糖醇
鼠李糖
苦查仁试
L.(+)阿拉伯糖
P溶血索（牛红细胞）
SN/T3498-—2013
反应类型
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温泉鱼类志贺邻单胞菌病检疫技术规范Quarantine protocol for Plesiomonas shigelloides from Garra rufa2013-03-01发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2013-09-16实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T3498-—2013
本标准起草单位：中华人民共和国四川出人境检验检疫局、四川农业大学、中华人民共和国重庆出入境检验检疫局：
本标准主要起草人：余华、杨光友、王昱、严玉宝、李应国、岳川、刘洋洋、陈世界、周岷江、胡娟、崔鹏博。
1范围
温泉鱼类志贺邻单胞菌病检疫技术规范本标准规定了温泉鱼类志贺邻单胞菌病的检疫技术规范本标准适用于温泉鱼类志贺邻单胞菌病的临床诊断和分离鉴定。2规范性引用文件
SN/T3498—2013
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注白期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方3临床诊断
3.1临床症状
鱼群出现厌食或不吃食；病鱼静现体色异常，呈现黑色；死鱼有较明显的出血症状，3.2病理变化
，或在池边摩擦，最后衰竭而死：鱼体出表侧线两侧出现
白斑或溃疡斑，随着病情的加重，斑的颜色病鱼鳍条基部及鱼体两侧轻度充血，鳃盖周围有出血点或出血斑鱼逐渐变深，严重病情时斑的颜色导现黑鳃、肝、肾的颜色均较淡，呈现灰白色；肝脏出现出血点，胆囊肿大腹腔肉为积有腹水，腹水呈淡黄
色透明或红色浑浊：肠道出血或肠壁变透明，可见肠内容物。
疫病的详细描述参见附录A
4分离鉴定
设备和器械
生物安全柜。
普通光学显微镜。
高压火菌锅。
恒温培养箱（37℃土1℃）
解剖器械。
全自动生化鉴定系统
4.2培养基和试剂
以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682规定的二级水普通营养琼脂平板，制备见附录B的B.14.2.1
SN/T3498—2013
革兰氏染色液，配制见B.2~B.4。SIM培养基，配制见B.5
Kovacs试剂，配制见B.6。
市售触酶试剂。
市售氧化酶试剂。
糖发酵试验管配制见B.7。
O/129诊断纸片，制作见B.8。
市售生化鉴定管（具体名称见附录C)。4.3
类志贺邻单胞菌的分离和鉴定
4.3.1样品采集
挑选5~10尾濒死的或带有上述症状的温泉鱼，使用无菌水冲洗体表后，用75%的酒精棉球擦拭体表，无菌操作解剂发病温泉鱼，采用接种环从病鱼出血点或出血斑处、肝脏、脾牌脏和肾脏蘸取渗出物4.3.2分离和纯化
接种环划线接种到普通营养琼脂平板培养基，37℃恒温培养24h。挑取数个可疑单菌落，划线培养于普通营养琼脂平板上，37℃恒温纯化培养24h。类志贺邻单胞菌于普通营养琼脂平板的纯菌落生长良好，形成边缘整齐、表面湿润、中央隆起、光滑、半透明、灰白色至淡黄色的圆形菌落。4.3.3鉴定
4.3.3.1染色镜检
挑取疑似菌落涂片到干净的玻璃载玻片，在酒精灯火焰上方固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗：滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗；滴加95%乙醇脱色，约30s（或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s水洗：滴加沙黄复染液，复染1min；水洗，风干，镜检。志贺邻单胞菌为革兰氏阴性直杆菌.两端圆润，染色呈红色。4.3.3.2初步生化试验
4.3.3.2.1氧化酶试验
挑取少许单菌落涂抹于无菌的白色的滤纸片上，滴加1%盐酸四甲基对苯二胺（或商品化）氧化酶试剂于菌落之上.15s~-30s呈深紫色到暗绿色为阳性，否则为阴性。4.3.3.2.2触酶试验
挑取少许单菌落涂抹丁干净的载玻片上，滴加2～3滴3头过氧乙酸（或商品化）触酶试剂，10s～20s出现大量气泡者为阳性，否则为阴性。4.3.3.2.3运动性和吲哚试验
取氧化酶、触酶阳性菌落穿刺接种SIM培养基，37℃培养24h，观察，细菌沿穿刺线向两侧扩增为具运动性，否则为不具运动性；往管中加人数滴三氯甲烷（此时不要与火接触），2min后再向管中加数滴Kovacs试剂，出现红色者为吲哚阳性，否则为阴性。4.3.3.2.4糖发酵试验
挑取呵哚阳性.有运动活性的可疑菌落少许。分别接种葡萄糖、麦芽糖发酵管（见B.7）。37℃培2
TKAONKAca
养24h。凡试验管颜色从紫色变为黄色，表明细菌可发酵该种糖类，则判为阳性4.3.3.2.50/129敏感性试验
SN/T3498—2013
挑取发酵葡萄糖、麦芽糖的可菌落接种营养肉汤，37℃培养24h。用无菌玻棒将待检菌菌悬液均匀涂布于营养琼脂平板上，将0/129诊断纸片贴于平板上，置37℃孵育18h24h，观察结果。出现抑菌圈者表示敏感，无抑菌圈者为耐药。4.3.3.3
3确认试验
将上述试验结果均为阳性的菌株，接种到营养琼脂平板（或斜面）。37℃培养24h后，取适量利用全自动生化鉴定仪（或同类设备）进行鉴定。操作方法参照仪器说明书。若无全白动生化鉴定仪，则对照附录C依次进行生化试验。
结果判定
结果判定如下：
若确认试验采用全自动生化鉴定仪（或同类设备），结果以生化鉴定仪的检测报告为准；若确认试验采用生化鉴定管进行附录C中的生化鉴定项日，至少符合星号（*）标示的全部生b)
化特征，则为类志贺邻单胞菌阳性，否则为类志贺邻单胞菌阴性若非星号（*）标示的生化项目只是部分符合，则判定为可疑，进行重复试验仍为可疑，则进行e
基因测序或用全白动生化鉴定仪检测加以确认。5综合判定
如果出现典型临床症状和病理变化，且分离出类志贺邻单胞菌，则诊断为“温泉鱼类志贺邻单胞菌病”。若临床症状、病理变化不显著，但分离出类志贺邻单胞菌，则报告为“检出类志贺邻单胞菌”。否则为阴性。
iiKAoNiiKAca
SN/T3498—2013
附录A
（资料性附录）
疫病概述
温泉鱼学名淡红墨头鱼（Garrarufa），又名“小鱼医生”，为鲤科（Cyprinidae）、墨头鱼属（Gurra）的角类。其身长2cm~10cm，适应水温为18℃40℃，而30℃~35℃的热水比较理想，其最大的特点是喜欢以浮游生物或动物身体上的附着生物为食。该鱼种是从土耳其引进的热带鱼种，把该鱼放在温泉浴池里，让其啄食人的死皮和一些皮肤上的细菌，可以治疗皮肤病，因此被誉为治疗诸如牛皮癣等皮肤病的法宝。
温泉鱼类志贺邻单胞菌病，是由类志贺邻单胞菌（Plesiomonashigelloides）引起的一种温泉鱼细菌性败血症。类志贺邻单胞菌为肠杆菌科邻单胞菌属唯一记录亚种，为革兰阴性直杆菌，短圆状，长3.0um，宽0.8um~1.0μm，兼性厌氧，无芽孢，通常具运动性：菌落呈灰白色、不溶血，中等大小。可成双或短链状排列，有2根～5根极端鞭毛，运动活跃。氧化酶和触酶阳性，硝酸盐还原阳性，发酵葡萄糖和其他一些糖类产酸不产气。生长温度范围广可在8℃45℃生长，在0%～5%的NaCI中可生长，pH范围为4.08.0，绝人多数菌株对O/129敏感类志贺邻单胞菌是感染性腹泻及食物中毒的病原体。主要存在于自然界的水体和土壤中，也见于鱼和其他水生动物以及各种哺乳动物和人类的肠道，可以引发人类的腹泻、食物中毒和哺乳动物等疾病。其感染主要与食人生的海产品有关，流行季节以夏季为主·症状表现为短期的水样腹泻或病程较长的疾样腹泻，感染人群无年龄差别。也多见于机体抵抗力下降的人群，主要引起败血症和脑膜炎，感染儿率低，但死亡率很高。
温泉鱼类志贺邻单胞菌病的典型临床症状是，温泉鱼鱼群出现厌食或不吃食；病鱼静止不动或阵发死；鱼体出现体色异常，星现黑色；死鱼有较明显的出血症性乱游、乱审，或在池边摩擦，最后衰竭而状等。
温泉鱼类志贺邻单胞菌病的典型病理变化是，温泉鱼病鱼鳍条基部及鱼体两侧轻度充血，体表侧线两侧出现白斑或溃疡斑，随着病情的加重，斑的颜色逐新变深，严重病情时斑的颜色呈现黑色：鳃盖周围较淡，呈现灰白色；肝脏出现出血点，胆囊肿大；腹腔内积有腹水，有出血点或出血斑；鳃、肝、肾的颜色均车腹水呈淡黄色透明或红色浑浊：肠道出血或肠壁变透明，可见肠内容物等。rrKAOMiKAca
B.1营养琼脂平板
附录B
（规范性附录）
培养基和试剂的制备
SN/T3498—2013
分别称取蛋白陈10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，琼脂20.0g，蒸馏水1000mL，调节pH7.4～pH7.6，121℃灭菌15min备用
草酸铁结晶紫染液
B.2.1甲液
结晶紫
溶于95%乙醇20mL。
草酸氨
溶于蒸馏水80mL
使用前将甲液和乙液混合。
B.3革兰氏碘液
碘(1)
碘化钾
蒸馏水100mlc
复红酒精染液
碱性复红
95%乙醇
B.5SIM培养基
胰陈20g，多价陈6g，硫酸铁铵0.2g，硫代硫酸钠0.2g，琼脂3.5gpH值7.2士0.2。制法：称取本品30.0g，加热溶解于1000mL.蒸馏水中，分装试管，121高压灭菌15min备用。B.6
Kovacs试剂
对二甲基氨基苯甲醛
koNiKca
SN/T3498-—2013
浓盐酸
糖发酵试验管
先配蛋白水（蛋白陈5.0g，蒸馏水1000mL，调pH至7.4，分装，每瓶100mL）。每100mL蛋白陈水中分别加入葡萄糖1.0g、麦芽糖1.0g，充分溶解，分装试管，121℃高压灭菌20min。0/129试纸片
取2，4二氨基6.7-二异内醇碟啶150mg，溶于10mL乙醇-二乙基乙醚（体积比为1：1）中。把6mm大小的滤纸片浸人该溶液后取出，在空气中晾干，备用。6
irKAoNiKAca
葡萄糖
麦芽糖”
氧化酶
吲噪“
（规范性附录）bzxz.net
温泉鱼类志贺邻单胞菌主要生理生化反应特征表.1
β半乳糖苷酶
精氨酸双水解酶
赖氨酸脱羧酶
鸟氨酸脱羧酶
西蒙斯柠檬酸
HS硫化氧
尿素酶?
注：十为阳性：一为阴性。
温泉鱼类志贺邻单胞菌主要生理生化反应特征反应类型
“标记的生理生化反应项目应同时符合。项
色氨酸脱氨酶
2丁醇3酮（甲基乙酰甲醇）
廿露醇
山梨糖醇
鼠李糖
苦查仁试
L.(+)阿拉伯糖
P溶血索（牛红细胞）
SN/T3498-—2013
反应类型
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