SN/T 4538.1-2016
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出版信息
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标准简介
SN/T 4538.1-2016.Commercial kit method-Melamine- Test method I.
1范围
SN/T 4538.1规定了乳制品中三聚氰胺酶联免疫检测方法。
SN/T 4538.1适用于采用酶联免疫竞争法定性定量检测液态奶与奶粉中的三聚氰胺。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T 2775商 品化食品检测试剂盒评价方法
3原理
在酶标板微孔中预包被偶联抗原,样品中残留的三聚氨胺和微孔中预包被的偶联抗原竞争三聚氰胺抗体,加人酶标二抗,用TMB底物显色,样本吸光值与其残留物三聚氰胺的含量成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中三聚氰胺的含量。
4试剂与材料
4.1三聚氰胺酶联免疫检测试剂盒
在2℃~8℃条件下运输与保存，产品有效期12个月。
本试剂盒参考SN/T 2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价,评价结果参见附录A。试剂盒组成如下:
a)三聚氰胺包被酶标板;
b)三聚氰胺标准品工作液;
c)三聚氰胺抗体工作液;
d)酶标二抗工作液;
e)浓缩样品稀释液;
f)浓缩洗涤液;
g) 底物溶液;
h)终止液。
1范围
SN/T 4538.1规定了乳制品中三聚氰胺酶联免疫检测方法。
SN/T 4538.1适用于采用酶联免疫竞争法定性定量检测液态奶与奶粉中的三聚氰胺。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T 2775商 品化食品检测试剂盒评价方法
3原理
在酶标板微孔中预包被偶联抗原,样品中残留的三聚氨胺和微孔中预包被的偶联抗原竞争三聚氰胺抗体,加人酶标二抗,用TMB底物显色,样本吸光值与其残留物三聚氰胺的含量成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中三聚氰胺的含量。
4试剂与材料
4.1三聚氰胺酶联免疫检测试剂盒
在2℃~8℃条件下运输与保存，产品有效期12个月。
本试剂盒参考SN/T 2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价,评价结果参见附录A。试剂盒组成如下:
a)三聚氰胺包被酶标板;
b)三聚氰胺标准品工作液;
c)三聚氰胺抗体工作液;
d)酶标二抗工作液;
e)浓缩样品稀释液;
f)浓缩洗涤液;
g) 底物溶液;
h)终止液。
标准图片预览
标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4538.1—2016
商品化试剂盒检测方法
三聚氰胺
方法一
Commercial kit method-
Melamine-Test method I
2016-08-23发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-03-01实施
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
商品化试剂盒检测方法
三聚氰胺
方法—
SN/T4538.1—2016
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010)68533533
网址spc.net.cn
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本880×12301/16
印张0.5
字数10千字
2017年12月第一版
2017年12月第一次印刷
印数1-500
书号：155066：2-32438
定价14.00元
SN/T4538《商品化试剂盒检测方法三聚氰胺》分为以下4个部分：
SN/T 4538.1
-SN/T4538.2
SN/T4538.3
商品化试剂盒检测方法
商品化试剂盒检测方法
商品化试剂盒检测方法
商品化试剂盒检测方法
SN/T4538.4
本部分为SN/T4538系列标准的第1部分。三聚氰胺
三聚氰胺
三聚氰胺
三聚氰胺
本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。方法
方法二；
方法三；
方法四。
SN/T4538.1—2016
本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院、北京维德维康生物技术有限公司。本部分主要起草人：邹明强、王燕飞、李莉、马吉湘、薛强。I
1范围
商品化试剂盒检测方法
三聚氰胺
方法一
本部分规定了乳制品中三聚氰胺酶联免疫检测方法SN/T4538.12016
本部分适用于采用酶联免疫竞争法定性定量检测液态奶与奶粉中的三聚氰胺。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理
在酶标板微孔中预包被偶联抗原，样品中残留的三聚氰胺和微孔中预包被的偶联抗原竞争三聚氰胺抗体，加入酶标二抗，用TMB底物显色，样本吸光值与其残留物三聚氰胺的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中三聚氰胺的含量4试剂与材料
4.1三聚氰胺酶联免疫检测试剂盒在2℃～8℃条件下运输与保有，产品有效期12个本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录A。试剂盒组成如下：a）三聚氰胺包被酶标板；
b）三聚氰胺标准品工作液：
c）三聚氰胺抗体工作液；
酶标二抗工作液；
浓缩样品稀释液：
浓缩洗涤液；
底物溶液；
h）终止液。
仪器与设备
微孔板酶标仪450nm/630nm
-TTKAONKAca
SN/T4538.1—2016
5.2振荡器
5.3涡漩仪
5.4离心机
6样品制备
液态奶
取10mL液态奶样品于离心管中，平衡至室温并充分混勾，取50uL进行检测。6.2奶粉
称取1g奶粉于50mL离心管中，加入6mL去离子水，剧烈涡漩1min，至奶粉完全溶解。6.2.2取500uL样品稀释液于新的离心管中，加入500μL溶液后样品，充分涡旋305，取50μL进行检测。
7分析步骤
将所需试剂置于室温（20℃~25℃）平衡30min以上，试剂使用前摇匀。7.1
7.2取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放人自封袋，保存于2℃～8℃。7.3洗涤工作液在使用前也需回温，7.4编号：将样本和标准品对应徽孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
7.5加标准品/样本：加标准品/样本50L到对应的微孔中；7.6加入抗体工作液50μL/孔，轻轻振荡混勾，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反映30min。7.7洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液250μL/孔，充分洗涤3次，每次间隔10s，用吸水纸拍下，拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破。7.8加入酶标Ⅱ抗工作液100μL，避光反应30min。7.9重复7.7。
0显色：加入底物液A液50uL/孔，再加底物液B液50L/孔，轻轻振荡混勾，用盖板膜盖板后置7.10
25℃避光环境反应20min。
7.11测定：加人终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处，最好用双波长450/630nm检测，在5min内读完数据，测定每孔OD值8结果判定
8.1百分吸光率的计算，标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值（双孔）除以第一个标准（0标准）的吸光度值，再乘以100%，见式（1）：百分吸光度值一
式中：
一一标准溶液或样本溶液的平均吸光度值；B。0X10-\标准溶液的平均吸光度值。8.2标准曲线的绘制与计算
......(1)
以标准品百分吸光率为纵坐标，以氯需素标准品浓度（×10-）的对数为横坐标，绘制标准曲线图。2
-iKAoNiKAca
SN/T4538.1—2016
将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中氯霉素实际残留量。液态奶稀释倍数为1奶粉稀释倍数为12。9
方法性能指标
检出限与定量限
牛奶检出限为14.96ug/L，定量限为44.88μg/L；奶粉检出限为20.47μg/kg，定量限为61.41μg/kg。9.2
特异性
交叉反应率：三聚氰胺100%；土霉素：<0.1%；三聚氰酸：<0.1%，三聚氰酸酰胺：<0.1%，三聚氰酸二酰胺：0.1%；头孢曲松钠：0.1%。-rKAoNiKAcabzxz.net
SN/T4538.1—2016
附录A
（资料性附录）
三聚氰胺酶联免疫检测试剂盒评价结果1A.1线性：三聚氰胺的线性范围为10μg/L～810μg/L，相关系数R>0.99。A.2交叉反应率：三聚氰胺100%；土霉素<0.1%；三聚氰酸<0.1%；三聚氰酸一酰胺<0.1%；三聚氰酸二酰胺<0.1%：头孢曲松钠<0.1%。A.3检出限和定量限：牛奶检出限为14.96μg/l，定量限为44.88μg/L，奶粉检出限为20.47pg/kg，定量限为61.41μg/kg。
1）本评价结果仅适用于北京维德维康生物技术有限公司生产的三聚氟胺酶联免疫试剂盒。书号：155066：2-32438
SN/T4538.1-2016
定价：
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商品化试剂盒检测方法
三聚氰胺
方法一
Commercial kit method-
Melamine-Test method I
2016-08-23发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-03-01实施
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
商品化试剂盒检测方法
三聚氰胺
方法—
SN/T4538.1—2016
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010)68533533
网址spc.net.cn
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本880×12301/16
印张0.5
字数10千字
2017年12月第一版
2017年12月第一次印刷
印数1-500
书号：155066：2-32438
定价14.00元
SN/T4538《商品化试剂盒检测方法三聚氰胺》分为以下4个部分：
SN/T 4538.1
-SN/T4538.2
SN/T4538.3
商品化试剂盒检测方法
商品化试剂盒检测方法
商品化试剂盒检测方法
商品化试剂盒检测方法
SN/T4538.4
本部分为SN/T4538系列标准的第1部分。三聚氰胺
三聚氰胺
三聚氰胺
三聚氰胺
本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。方法
方法二；
方法三；
方法四。
SN/T4538.1—2016
本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院、北京维德维康生物技术有限公司。本部分主要起草人：邹明强、王燕飞、李莉、马吉湘、薛强。I
1范围
商品化试剂盒检测方法
三聚氰胺
方法一
本部分规定了乳制品中三聚氰胺酶联免疫检测方法SN/T4538.12016
本部分适用于采用酶联免疫竞争法定性定量检测液态奶与奶粉中的三聚氰胺。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理
在酶标板微孔中预包被偶联抗原，样品中残留的三聚氰胺和微孔中预包被的偶联抗原竞争三聚氰胺抗体，加入酶标二抗，用TMB底物显色，样本吸光值与其残留物三聚氰胺的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中三聚氰胺的含量4试剂与材料
4.1三聚氰胺酶联免疫检测试剂盒在2℃～8℃条件下运输与保有，产品有效期12个本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录A。试剂盒组成如下：a）三聚氰胺包被酶标板；
b）三聚氰胺标准品工作液：
c）三聚氰胺抗体工作液；
酶标二抗工作液；
浓缩样品稀释液：
浓缩洗涤液；
底物溶液；
h）终止液。
仪器与设备
微孔板酶标仪450nm/630nm
-TTKAONKAca
SN/T4538.1—2016
5.2振荡器
5.3涡漩仪
5.4离心机
6样品制备
液态奶
取10mL液态奶样品于离心管中，平衡至室温并充分混勾，取50uL进行检测。6.2奶粉
称取1g奶粉于50mL离心管中，加入6mL去离子水，剧烈涡漩1min，至奶粉完全溶解。6.2.2取500uL样品稀释液于新的离心管中，加入500μL溶液后样品，充分涡旋305，取50μL进行检测。
7分析步骤
将所需试剂置于室温（20℃~25℃）平衡30min以上，试剂使用前摇匀。7.1
7.2取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放人自封袋，保存于2℃～8℃。7.3洗涤工作液在使用前也需回温，7.4编号：将样本和标准品对应徽孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
7.5加标准品/样本：加标准品/样本50L到对应的微孔中；7.6加入抗体工作液50μL/孔，轻轻振荡混勾，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反映30min。7.7洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液250μL/孔，充分洗涤3次，每次间隔10s，用吸水纸拍下，拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破。7.8加入酶标Ⅱ抗工作液100μL，避光反应30min。7.9重复7.7。
0显色：加入底物液A液50uL/孔，再加底物液B液50L/孔，轻轻振荡混勾，用盖板膜盖板后置7.10
25℃避光环境反应20min。
7.11测定：加人终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处，最好用双波长450/630nm检测，在5min内读完数据，测定每孔OD值8结果判定
8.1百分吸光率的计算，标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值（双孔）除以第一个标准（0标准）的吸光度值，再乘以100%，见式（1）：百分吸光度值一
式中：
一一标准溶液或样本溶液的平均吸光度值；B。0X10-\标准溶液的平均吸光度值。8.2标准曲线的绘制与计算
......(1)
以标准品百分吸光率为纵坐标，以氯需素标准品浓度（×10-）的对数为横坐标，绘制标准曲线图。2
-iKAoNiKAca
SN/T4538.1—2016
将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中氯霉素实际残留量。液态奶稀释倍数为1奶粉稀释倍数为12。9
方法性能指标
检出限与定量限
牛奶检出限为14.96ug/L，定量限为44.88μg/L；奶粉检出限为20.47μg/kg，定量限为61.41μg/kg。9.2
特异性
交叉反应率：三聚氰胺100%；土霉素：<0.1%；三聚氰酸：<0.1%，三聚氰酸酰胺：<0.1%，三聚氰酸二酰胺：0.1%；头孢曲松钠：0.1%。-rKAoNiKAcabzxz.net
SN/T4538.1—2016
附录A
（资料性附录）
三聚氰胺酶联免疫检测试剂盒评价结果1A.1线性：三聚氰胺的线性范围为10μg/L～810μg/L，相关系数R>0.99。A.2交叉反应率：三聚氰胺100%；土霉素<0.1%；三聚氰酸<0.1%；三聚氰酸一酰胺<0.1%；三聚氰酸二酰胺<0.1%：头孢曲松钠<0.1%。A.3检出限和定量限：牛奶检出限为14.96μg/l，定量限为44.88μg/L，奶粉检出限为20.47pg/kg，定量限为61.41μg/kg。
1）本评价结果仅适用于北京维德维康生物技术有限公司生产的三聚氟胺酶联免疫试剂盒。书号：155066：2-32438
SN/T4538.1-2016
定价：
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。