SN/T 4533.1-2016.Commercial kit method-Beta-lactamase-Test method I.
1范围
SN/T 4533.1规定了纯牛奶中β-内酰胺酶残留量的胶体金免疫层析检测方法。
SN/T 4533.1适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中β-内酰胺酶残留进行筛选检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法
3原理
本试验为反间接竞争抑制法测定样品中β-内酰胺酶的含量。利用β-内酰胺酶可分解青霉素的原理,快速测定与β-内酰胺酶反应后残留的青霉素的含量,从而间接检测纯牛奶中残留的β-内酰胺酶。
4试剂与材料
4.1β-内酰胺酶检测试剂盒
本试剂盒参考SN/T 2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价,评价结果参见附录A。
商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2 °C~8°C、干燥、避光条件下保存,产品有效期不得少于12个月。试剂盒组成如下:
a)β-内酰胺酶检测试纸条;
b) 白色微孔(主要成分为青霉素G);
c)红色微孔(主要 成分为胶体金标记的青霉素抗体)。
4.2试剂
β-内酰胺酶对照品。
5仪器设备
5.1温育器:40°C±2°C。
5.2便携式读数仪:
测量波长:525 nm,带宽±8 nm,波长准确度±3 nm。
计算方式:峰面积分析,并可计算检测线峰面积/控制线峰面积比值。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4533.1—2016
商品化试剂盒检测方法
β-内酰胺酶
方法一
Commercial kit methodBeta-lactamase-Test method I2016-06-28发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-02-01实施
本部分为SN/T4533《商品化试剂盒检测方法β-内酰胺酶》的第1部分。
本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T4533.1-—2016
本部分主要起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、深圳市易瑞生物技术有限公司、中华人民共和国福建出入境检验检疫局、合肥工业大学、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民共和国上海出人境检验检疫局、内蒙古蒙牛乳业（集团)股份有限公司。本部分主要起草人：薛峰、曾德新、胡月珍、将原、朱海、杨捷琳、郑晶、李梅、蔡宝亮、陈伟、颜治I
1范围
商品化试剂盒检测方法
β-内酰胺酶方法
SN/T4533.1—2016
SN/T4533的本部分规定了纯牛奶中3-内酰胺酶残留量的胶体金免疫层析检测方法。本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中3-内酰胺酶残留进行筛选检测。2规范性引用文件wwW.bzxz.Net
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理
本试验为反间接竞争抑制法测定样品中β-内酰胺酶的含量。利用β-内酰胺酶可分解青霉素的原理，快速测定与β-内酰胺酶反应后残留的青霉素的含量，从而间接检测纯牛奶中残留的β-内酰胺酶4
试剂与材料
β-内酰胺酶检测试剂盒
本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录A。
商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃～8℃，干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于12个月。试剂盒组成如下：
a）(β3-内酰胺酶检测试纸条；b）白色微孔（主要成分为青霉素G)；红色微孔（主要成分为胶体金标记的青霉素抗体）。e
4.2试剂
β-内酰胺酶对照品
5仪器设备
5.1温育器：40℃±2℃。
5.2便携式读数仪：
测量波长：525nm.带宽±8nm，波长准确度士3nm计算方式：峰面积分析，并可计算检测线峰面积/控制线峰面积比值。1
SN/T4533.1—2016
移液器：200μL
6样品制备
检测前样品需充分混勾。
7分析步骤
7.1将温育器温度设定为40℃；吸取200μL样品于白色微孔中，5~10次抽吸，迅速混合均勾并置于温育器温育 9 min。
7.2将白色微孔中的全部样品转移至红色微孔中，上下抽吸8～10次左右。
7.3将红色微孔中全部落液转移回原白色微孔中，上下再抽吸5一6次混勾。
7.4置于温育器中温育3min。
7.5温育结束后，将试纸条插人到微孔中温育7.6温育结束，停止计时，从微孔中取出测试条，去掉测试条下端的吸水海绵并进行结果判定。7.7
检验完毕，余下的测试条密封好放到试剂盒中，2C~8℃保存。8
结果判定
通过对比控制带和检测带的颜色深浅来进行结果判定。由于长时间放置会引起检测带颜色的变化，需在5min内进行结果判定。a）
目视结果判定依据（如图1
1）无效：质控线（C线
阴性（—）)：“检测
)的显色比\控制带（C线）的浅，则说明检测的样品中不含有β-3内酰胺酶残留的水平
内酰胺酶,或者
阳性（+）“检测\带（
中残留的3内酰胺酶
线）的显色与
低于本产品的检出限：
控制\带（C线）
品的检出限。
控制线
-内酰胺酶检测线下
·海绵端
试纸条示意图
空白试纸
无效阴性
目视判定示意图
-样深或者更深，则说明检测的样品阳性
b）通过便携式读数仪对试纸条读值，并依据下列方式进行判定：1）阴性：读数数值<0.6，则判为阴性；2
SN/T4533.1—2016
弱阳性：0.6≤读数数值≤0.9.则判为弱阳性；需要重新检测，若结果依然为弱阳性，则判定为阳性；若结果为阴性，则判定为阴性；阳性：读数数值>0.9，则判为阳性。方法性能指标
检出限
特异性
当浓度100μg/kg时，磺胺类、唑诺酮类、3-内酰胺类、四环素类四大类药物均无交叉反应SN/T4533.12016
检出限
特异性
附录A
资料性附录）
牛乳中β-内酰胺酶快速检测试纸条评价结果!当浓度≤100ug/kg时，磺胺类、喹诺酮类、β-内酰胺类、四坏素类四大类药物均无交义反应。1）本试剂盒评价结果仅适用丁深圳市易瑞生物技术有限公司生产的牛乳中3-内酰胺酶快速检测试纸条。
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