SN/T 4539.1-2016.Commercial kit method-Tetracyclines-Test method I.
1范围
SN/T 4539.1规定了纯牛奶中四环素类.三聚氰胺和β-内酰胺类残留量的胶体金免疫层析检测方法。
SN/T 4539.1适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中四环素类、三聚氰胺和β-内酰胺类(含头孢
氨苄)残留筛选检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法
3原理
应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理,样品中残留的待测物与检测线上的待测物抗原共同竞争胶体金标记的特异性抗体,通过检测线与控制线颜色深浅比较,对样品中待测物的含量定性判定。
4试剂与材料
4.1四环素类.三聚氰胺和 β-内酰胺类(含头孢氨苄)四联检测试剂盒
本试剂盒参考SN/T 2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价,评价结果参见附录A.
商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2 C~8 C.干燥、避光条件下保存,产品有效期不得少于12个月。试剂盒组成如下:
a)四环素类、三聚氰胺和B-内酰胺类(含头孢氨苄)四联检测试纸条;
b)微孔试剂(主要成分为胶体金标记的四环素类抗体、胶体金标记的β-内酰胺类抗体、胶体金标记的头孢氨苄抗体和胶体金标记的三聚氰胺抗体)。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4539.1—2016
商品化试剂盒检测方法
四环素类
方法—
Commercial kit method-TetracyclinesTest method I2016-06-28发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-02-01实施
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
商品化试剂盒检测方法
四环素类
方法—
SN/T4539.1—2016
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010)68533533
网址spc.net.cn免费标准bzxz.net
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*
开本880×12301/16
2017年2月第一版
印张0.5
字数10千字
2017年2月第一次印刷
印数1-1100
书号：155066·2-31190
定价14.00
本部分为SN/T4539《商品化试剂盒检测方法本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。四环素类》的第1部分。
本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T4539.1—2016
本部分主要起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、深圳市易瑞生物技术有限公司，深圳市检验检疫科学研究院、中华人民共和国吉林出人境检验检疫局、合肥工业大学、内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司、江苏农牧科技职业学院本部分主要起草人：薛峰、李东明、曾德新、郝福星、付辉、蒋原、蔡宝亮、刘涛、王凯民、喻东威、陈伟。-iiKAoNiKAca
HiiKAoNiKAca
1范围
商品化试剂盒检测方法
四环素类方法一
SN/T4539.1—2016
SN/T4539的本部分规定了纯牛奶中四环素类，三聚氰胺和βB-内酰胺类残留量的胶体金免疫层析检测方法。
本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中四环素类、三聚氰胺和β-内酰胺类（含头孢氨)残留筛选检测。
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理
应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的待测物与检测线上的待测物抗原共同竞争胶体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中待测物的含量定性判定4试剂与材料
4.1四环素类、三聚氰胺和β-内酰胺类（含头孢氨苄）四联检测试剂盒本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录A。
商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃～8℃、干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于12个月。试剂盒组成如下：
a）四环素类、三聚氰胺和β-内酰胺类（含头孢氨苄）四联检测试纸条：微孔试剂（主要成分为胶体金标记的四环素类抗体、胶体金标记的β-内酰胺类抗体、胶体金标b)
记的头孢氨抗体和胶体金标记的三聚氰胺抗体）。4.2试剂
三聚氰胺、β-内酰胺类和四环素类对照品。5仪器设备
5.1温育器：40℃±2℃。
5.2移液器：200μL。
iiiKAoNikAca
SN/T4539.12016
6样品制备
检测前样品需充分混匀。
7分析步骤
7.1将温育器温度设定为40℃；吸取200μL样品于微孔中，5～10次抽吸，迅速混合均匀并置于温育器中温育3min。
7.2温育结束后，将试纸条插人到微孔中温育9min。7.3温育结束，停止计时，从微孔中取出测试条，去掉测试条下端的吸水海绵并进行结果判定。检验完毕，余下的测试条放回铝箱袋中并密封好，放到试剂盒中，2℃～8℃保存。7.4
结果判定
通过对比控制带和检测带的颜色深浅来进行结化，需在5min内进行结果判定
目视结果判定依据（如图1所示）无效：控制线（C线）不显色
果判定。由于长时间放置会引起检测带颜色的变页色比控制线（C线）颜色深或者强阴性：检测线（T线）颜
弱阳性：检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当T线）颜色与控制线（C线）颜色浅或者弱。阳性：检测线（T线）不显色，或检测线（Td)
控制线
四环素类检测线
头孢氨检测线
B-内酰胺类检测线
三聚氰胺检测线
空白试纸
9方法性能指标
9.1检出限
弱阳性四环素类头孢氨芋B-内酰胺类三聚氰胺阳性
目视判定示意图
三聚氰胺：150μg/kg：青霉素G：3μg/kg：氨芋西林：4μg/kg：阿莫西林：4μg/kg：氯唑西林：2
iiiKAoNhikAca
SN/T4539.1—2016
8g/kg；苯唑西林：10μg/kg；头孢噻呋：100μg/kg：茶夫西林：25μg/kg；双氯西林：15μg/kg；头孢匹林：12μg/kg：头孢唑林：60μg/kg；头孢哌酮：4μg/kg：头孢乙腈：30μg/kg：头孢喹：20μg/kg：头孢氨芒：40μg/kg，四环素：70μg/kg；土霉素：60μg/kg；金霉素：60μg/kg；强力霉素：60μg/kg。特异性
当浓度≤100mg/kg时，氨基糖苷类、大环内酯类、磺胺类，喹诺酮类和氯霉素均无交叉反应。iKAONiKAca
SN/T4539.1—2016
附录A
（资料性附录）
牛乳中（三聚鼠胺十-内酰胺类十头孢氢十四环素类）四联快速检测试纸条评价结果A.1检出限
三聚氰胺：150ug/kg：青霉素G：3μg/kg：氨芊西林：4ug/kg：阿莫西林：4μg/kg氯唑西林：8μg/kg；苯唑西林：10μg/kg；头孢噻：100μg/kg；萘夫西林：25μg/kg双氯西林：15μg/kg；头孢匹林：12μg/kg头孢唑林：60μg/kg；头孢哌酮：4μg/kg：头孢乙腈：30μg/kg；头孢喹：20μg/kg：头孢氨芋：40μg/kg四环素：70μg/kg：土霉素：60μg/kg；金霉素：60μg/kg：强力霉素：60μg/kg。A.2
特异性
当浓度≤100mg/kg时，氨基糖苷类、大环内酯类、磺胺类、喹诺酮类和氯霉素均无交叉反应。1）本试剂盒评价结果仅适用于深圳市易瑞生物技术有限公司生产的牛乳中四环素类快速检测试纸条。书号：155066·2-31190
SN/T4539.1-2016
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