本文件描述了蜂蜜中17-三十五烯含量测定的气相色谱质谱法。 本文件适用于蜂蜜中17-三十五烯含量的测定。

ICS 67.180.10
CCS x 31
中华人民共和国国家标准
GB/T43448—2023
蜂蜜中 17-三十五烯含量的测定气相色谱质谱法
Determination of17-pentatriacontene in honey-Gas chromatography mass spectrometry method2023-11-27发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2024-06-01实施
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则起草。
GB/T43448—2023
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蜂蜜中17-三十五烯含量的测定
气相色谱质谱法
本文件指述了蜂蛋中17-三十五烯含量测定的气相色谱质谱法。本文件适用于蜂蛋中17-三十五烯含量的测定。2
规范性引用文件
GB/T43448—2023
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GB/T 6682
3术语和定义
分析实验室用水规格和试验方法本文件没有需要界定的术语和定义。4原理
试样用水溶解，石油醚提取.浓缩后经弗罗里硅土固相萃取柱净化.气相色谱质谱法测定.外标法定量。
试剂和材料
异辛烷：色谱纯。
正己烷：色谱纯。
石油醚：分析纯或以上纯度.沸程35℃～60℃。水：GB/T6682规定的一级水。
17-三十五烯标准物质/标准样品：17-Pentatriacontene.C;Hte·纯度≥98%。标准储备液（1mg/ml.）：称取17-三十五烯标准物质/标准样品（5.1.5)10mg·置于烧杯中，加人适量异辛烷（5.1.1)溶解.溶解液及清洗溶液完全转移至10mL.容量瓶中.稀释至刻度.混匀后配制成质量浓度为1mg/ml.的17-三十五烯标准储备液。2℃～8℃保存，有效期6个月。5.2材料
弗罗里硅土周相萃取柱：1000mg/6ml.或相当者。5.2.1
过滤膜：有机系.0.22um。
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仪器和设备
6.1气相色谱质谱仪：配有电子轰击源（EI)。电子平：感量0.00001g和0.01g。6.2www.bzxz.net
高速离心机。
固相萃取装置。
氮吹仪。
涡旋混合器。
振荡器。
试样制备与保存
试样的制备
对无结晶的试验样品，将其搅拌均匀：对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴中温热、振荡，待晶全部融化后搅匀冷却至室温。取0.5kg制备好的试样置于样品瓶中，密封，并做上标记。
取无目标物检出的样品作为空白试样，用于配制基质匹配标准曲线7.2
试样的保存
将试样于常温下保存。
测定步骤
称取5g试样（精确至0.01g）置于50mL离心管，加人10mL水，涡旋混匀。加人20mL石油醛(5.1.3）.振荡30min.10000r/min离心10min，收集上清液。残中加人20ml，石油醚.重复提取1次.合并2次提取液.40℃浓缩至干，用2ml.正已烷（5.1.2）复溶.涡旋混匀，获得提取液备用。净化
固相萃取柱（5.2.1)用6mL正已烷活化后.取提取液上样.用10ml.正已烷洗脱.收集所有流出物，40℃氮气吹干.加入1ml.正已烷.涡旋1min溶解残余物，过滤至进样瓶.供气相色谱质谱仪测定。8.3
基质匹配标准曲线的配制
精密量取标准储备液适量.分别加入至6份经提取和净化的空白试样残渣中，40℃浓缩至干，加人正己烷1ml..涡旋溶解残余物.配制成质量浓度为2.5g/ml.、5g/ml、10μg/ml、20ug/ml.、50ug/ml、100uμg/ml.的基质匹配系列标准溶液.过滤至进样瓶.供气相色谱质谱仪测定。测定
气相色谱条件
气相色谱参考条件如下。
色谱柱：5%苯基-95%甲基聚硅氧烷（15m×0.25mm×0.25μm）石英毛细管柱，或相当者。2
升温程序：60℃保持1min.然后以30℃/min升至310℃.保持6min。载气：氮气（纯度≥99.999%）.流速1.5mL/min。进样口温度：310℃。
进样量：1l。
进样方式：分流进样.分流比10：1。质谱条件
质谱参考条件如下。
离子源温度：230℃。
传输线温度：310℃。
检测方式：选择离子扫描(SIM)。选择离子扫描参数见表1。
中文名称
17-三十五烯
气相色谱质谱测定
定性确证
英文名称
17-三十五烯选择离子扫描参数
选择离子
17-Pentatriacontene
97.1,111.1,125.1,490.6
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定量离子
在相同试验条件下，试样溶液中17-三十五烯的保留时间与基质匹配标准溶液中该化合物的保留时间偏差在土0.5%之内.所有离子都出现.且相对离子丰度与浓度相当的基质匹配标准溶液相对离子半度—致（定性离子参考丰度比为97.1：111.1：125.1：490.6=100：54：27：3），其偏差应符合表2的要求。17-三十五烯的全扫描质谱图利定量离子色谱图见附录A。表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度
最大允许偏差
定量测定
>20%~50%
>10%~20%
≤10%
按照8.4.1和8.4.2设定仪器条件，以基质匹配标准溶液浓度为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，按外标法计算试样中目标物含量。基质匹配标准溶液及试样溶液中的目标物响应值均应在仪器检测的线性范围内。
平行试验
按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。空白试验
除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行测定。3
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结果计算
结果按式(1)计算。
式中：
试样中被测组分含量.单位为毫克每千克（mg/kg)；从标准工作曲线上得到的被测组分溶液质量浓度，单位为微克每毫升（g/ml.）；样品溶液定容体积.单位为毫升（ml.）；所称试样的质量，单位为克(g)。注：计算结果扣除空白值.结果保留3位有效数字或小数点后1位。定量限
本文件所捕述方法中17-三十五烯的定量限为1.0mg/kg。精密度
2次平行测定的绝对差值不超过其算术平均值的15%。4
(资料性）
17-三十五烯的全扫描质谱图和定量离子色谱图A.117-三十五烯的全扫描质谱图（m/=40～550）见图A.1。57.1
顺荷比（m2)
17-三十五烯的全扫描质谱图（m/z40～550）17-三十五烯的定量离子色谱图见图A.2。A.2
采集时刷imin
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17-三十五烯标准溶液（质量浓度为50μg/mL）的定量离子（490.6）色谱图
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