GA 657-2006.Detection method for ABO blood type in human body fluid stains-Hemagglutination inhibition test.
1范围
GA 657规定了法医生物物证检验中用凝集抑制试验法检测人体液班ABO血型的材料准备、操作方法和结果判定。
GA 657适用于从事法庭科学检验人体液斑ABO血型。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GA 471- -2004抗A、抗B血清试剂
3原理
在分泌型人体液班中存在有水溶性A型、B型和H型抗原物质,其抗原物质为半抗原,能特异性地与相应抗体结合,从而抑制该抗体与相应的指示红细胞发生凝集,根据抗体与相应指示红细胞发生凝集情况,判断被检人体液斑ABO血型。
4试剂与器材 .
4.1 试剂
a) 标准抗A抗体、标准抗B抗体试剂。符合GA 471- -2004 的各项要求;
b) 抗H抗体试剂(效价应大于16倍);
2) 2%~3%A型、B型.0型人指示红细胞(见附录A);
d) 生理盐水。
4.2器材
a) 台式离心机;
b)光学显微镜;
c) 凹玻板、吸管、试管、离心管;
l) 眼科剪、眼科镊;
e)加样器、加样器吸头;
f) 记号笔。

ICS13.310
中华人民共和国公共安全行业标准GA657-2006
人体液斑ABO血型检测
凝集抑制试验
Detection method for ABO blood type in human body fluid stains-Hemagglutination inhibitiontest2006-11-03发布
中华人民共和国公安部
2007-03-01实施
本标准的4.1a)为强制性的，其余为推荐性的。本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准由全国刑事技术标准化委员会提出并归口。本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、黑龙江省公安厅等。GA657-2006
本标准起草人：温佩忠、张大安、刘开会、李晓平、朱爱民、李澎、刘旭丹、常彩琴、张英兰、李兆隆等1范围
人体液斑ABO血型检测
凝集抑制试验
GA657—2006
本标准规定了法医生物物证检验中用凝集抑制试验法检测人体液斑ABO血型的材料准备、操作方法和结果判定。
本标准适用于从事法庭科学检验人体液斑ABO血型。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标推达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GA471—2004抗A、抗B血清试剂
3原理
在分泌型人体液斑中存在有水溶性A型、B型和H型抗原物质，其抗原物质为半抗原，能特异性地与相应抗体结合，从而抑制该抗体与相应的指示红细胞发生凝集，根据抗体与相应指示红细胞发生凝集情况，判断被检人体液斑ABO血型。4试剂与器材
4.1试剂
标准抗A抗体、标准抗B抗体试剂。符合GA471一2004的各项要求；a）
抗H抗体试剂（效价应大于16倍）；b)
2%~3%A型、B型、O型人指示红细胞（见附录A)；c
d）生理盐水。
4.2器材
台式离心机
b）光学显微镜；
凹玻板、吸管、试管、离心管；c）
眼科剪、眼科镊；
加样器、加样器吸头；
记号笔。
5操作方法
5.1抗体的标化
见附录B。
5.2检验步骤
5.2.1剪取待检体液斑约1cm放人小离心管中，加生理盐水少许浸泡（以能吸出3滴为宜），并充分搅拌、浸泡，根据被检体液斑的陈旧程度，浸泡十几分钟到几小时不等。查标准上建标网wwiz321.netwwW.bzxz.Net
GA657—2006
5.2.2将体液斑浸出液离心，然后吸取上清液3滴，分别加到标记有A，B,O的3排洁净凹玻板的第一凹中，并用生理盐水分别倍比稀释。每一排稀释到第六凹即可。5.2.3每一凹内按标记分别加人1滴标化好的抗A.抗B和抗H抗体试剂。5.2.4混匀后置保湿盒内，室温反应30min。5.2.5.每凹内分别滴加5.1中配制的2%～3%的红细胞悬液1滴，摇动凹玻板混匀，置保湿盒内，室温30min60min，然后肉眼观察凝集情况，必要时光学显微镜下观察，记录结果。6结果判定
结果判定见表1。
表1用凝集抑制试验检测人体液斑ABO血型结果被检体液斑
7注意事项
·抗B
指示红细胞
体液斑没出液稀释倍数
血型判定
非分泌型
7.1在检测体液斑血型时，应作空白对照和已知A型、B型、O型分泌型体液斑对照，并只有当空白和已知对照检测结果正确时，样本的检验结果才能采信。7.2抗体标化的效价，应根据体液斑的陈旧程度来定，检验较新鲜的体液斑时，可将抗体效价标化到116，较陈旧的体液斑或量较少时，将抗体效价标定为1：8。7.3在检测过程中，加待检体液斑浸出液或抗体时，滴的大小应当一致。7.4加人指示红细胞后，应即刻摇动凹玻板，并每隔几分钟摇动1次，避免红细胞粘附凹底，影响凝集的观察。
查标准上建标网wwiz321.net
配制材料
新鲜A型、B型、O型人红细胞；
生理盐水；
离心机、离心管、吸管；
加样器、加样器吸头：
记号笔。
A.2操作步骤
附录A
（规范性附录）
指示红细胞配制
GA657—2006
在3个10mL离心管上分别标记上A型、B型、O型字样，并分别加人5mL～8mL生理盐水，A.2.1
然后在分别加入约0.5mL新鲜A型、B型、O型人红细胞。A.2.2将以上3个离心管离心，800r/min~10001/min，5min。A.2.3轻轻将上清液吸出、弃去。如果上清液为无色透明，进行下一步，如果上清液颜色淡红，则要重复A.2.1和A.2.2步骤，直至其颜色为无色透明。A.2.4用生理盐水将A.2.3洗涤后的红细胞分别配成2%~3%A型、B型和O型红细胞悬液。查标准上建标网wwiz321.net
GA657—2006
B.1标化材料
附录B
（规范性附录）
抗体的标化
标准抗A抗体、标准抗B抗体试剂。符合GA471一2004的各项要求；a)
抗H抗体试剂（效价应大于16倍）；b）
凹玻板：
吸管；
2%~3%A型、B型、O型人指示红细胞；e)
生理盐水；
记号笔。
B.2操作步骤
B.2.1将3排凹玻板分别标记上A、B、O。B.2.2每一排的第一凹内分别加人2滴B.1a)和B.1b)中的抗A抗体、抗B抗体和抗H抗体试剂。其余的凹内分别加人2滴生理盐水。B.2.3将每排的第一凹内分别加人2滴生理盐水，进行倍比稀释，至1024倍。B.2.4于A排的每凹中加人1滴B.1e)中的2%～3%A型指示红细胞：于B排的每凹中加人1滴2%～3%B型指示红细胞；于0排的每凹中加人1滴2%～3%O型指示红细胞。B.2.5混勾，30min内观察细胞凝集情况，并根据其效价，用生理盐水溶液配制成1：8或1：16效价。
B.2.6将配制后的1：8或1：16倍的抗A抗体、抗B抗体和抗H抗体试剂1滴分别与1滴2%～3%A型、B型、O型人指示红细胞反应，其凝集程度和出现凝集时间应尽可能的保持一致。否则应当用抗体原液或生理盐水溶液调节。版权专有侵权必究
书号：155066·2-17419
GA657-2006
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行业标推
人体液斑ABO血型检测
凝集抑制试验
GA657—2006
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开本880×12301/16印张0.5字数9千字2007年1月第一版
2007年1月第一次印刷
书号：155066·2-17419定价8.00元如有印装差错
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