GA 656-2006
基本信息
标准号： GA 656-2006
中文名称：人血液(痕)ABO血型检测凝集法、解离法
标准类别：公共安全行业标准(GA)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
下载格式：.zip .pdf
下载大小：1624856
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
GA 656-2006.Detection method for ABO blood type in human blood(stains)-Hemagglutination test , elution test.
1范围
GA 656规定了法医生物物证检验中血液(痕)ABO血型检测的材料准备.操作方法和结果判定。
GA 656适用于从事法庭科学检验人血液(痕)ABO血型。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GA 471-2004抗A.抗B血清试剂
3原理
凝集法:人红细胞表面存在有A.B和H抗原物质,在抗A抗体、抗B抗体或抗H抗体的作用下，
发生抗原抗体反应,使红细胞发生凝集。根据与相应抗体发生凝集反应的情况,可判断ABO血型。
解离法(蛋白粘片法) :本法是利用抗原和抗体反应在适宜温度下所形成的抗原抗体复合物,在一定条件下抗原抗体复合物可以释放抗体,而保持抗原和抗体原有的性质不变的原理来设计的。检材中的A.B血型物质,在抗A抗体或抗B抗体存在的情况下,发生抗原抗体反应,形成抗原抗体复合物。当在50℃~56℃条件下,抗原抗体复合物发生解离,使抗体游离于液体中,当温度降低至37C左右时,游离的抗体与相应的指示红细胞抗原发生凝集反应,在显微镜下可观察到凝集发生。根据与相应指示红细胞发生凝集反应的情况,可推断血痕所携带的抗原,判断ABO血型。
1范围
GA 656规定了法医生物物证检验中血液(痕)ABO血型检测的材料准备.操作方法和结果判定。
GA 656适用于从事法庭科学检验人血液(痕)ABO血型。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GA 471-2004抗A.抗B血清试剂
3原理
凝集法:人红细胞表面存在有A.B和H抗原物质,在抗A抗体、抗B抗体或抗H抗体的作用下，
发生抗原抗体反应,使红细胞发生凝集。根据与相应抗体发生凝集反应的情况,可判断ABO血型。
解离法(蛋白粘片法) :本法是利用抗原和抗体反应在适宜温度下所形成的抗原抗体复合物,在一定条件下抗原抗体复合物可以释放抗体,而保持抗原和抗体原有的性质不变的原理来设计的。检材中的A.B血型物质,在抗A抗体或抗B抗体存在的情况下,发生抗原抗体反应,形成抗原抗体复合物。当在50℃~56℃条件下,抗原抗体复合物发生解离,使抗体游离于液体中,当温度降低至37C左右时,游离的抗体与相应的指示红细胞抗原发生凝集反应,在显微镜下可观察到凝集发生。根据与相应指示红细胞发生凝集反应的情况,可推断血痕所携带的抗原,判断ABO血型。
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标准内容
ICS13.310
中华人民共和国公共安全行业标准GA656—2006
人血液（痕）ABO血型检测
凝集法、解离法
Detection method for ABO blood type in human blood(stains)-Hemagglutination test,elution test2006-11-03发布
数码防伪
中华人民共和国公安部
2007-03-01实施
本标准的4.1a)为强制性的，其余为推荐性的。本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准由全国刑事技术标准化委员会提出并归口。本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、黑龙江省公安厅等。GA656--2006
本标准起草人：温佩忠、张大安、刘开会、李晓平、朱爱民、李澎、刘旭丹、常彩琴、张英兰、李兆隆等。1范围
人血液（痕)ABO血型检测
凝集法、解离法
GA656—2006
本标准规定了法医生物物证检验中血液（痕）ABO血型检测的材料准备、操作方法和结果判定。本标准适用于从事法庭科学检验人血液(痕)ABO血型。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标推的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GA471一2004抗A、抗B血清试剂
3原理
疑集法：人红细胞表面存在有A，B和H抗原物质，在抗A抗体、抗B抗体或抗H抗体的作用下，发生抗原抗体反应，使红细胞发生凝集。根据与相应抗体发生凝集反应的情况，可判断ABO血型。解离法（蛋白粘片法）：本法是利用抗原和抗体反应在适宜温度下所形成的抗原抗体复合物，在一定条件下抗原抗体复合物可以释放抗体，而保持抗原和抗体原有的性质不变的原理来设计的。检材中的A、B血型物质，在抗A抗体或抗B抗体存在的情况下，发生抗原抗体反应，形成抗原抗体复合物。当在50℃56℃条件下，抗原抗体复合物发生解离，使抗体游离于液体中，当温度降低至37℃左右时，游离的抗体与相应的指示红细胞抗原发生凝集反应，在显微镜下可观察到凝集发生。根据与相应指示红细胞发生凝集反应的情况，可推断血痕所携带的抗原，判断ABO血型。4试剂与器材
4.1试剂
标准抗A抗体、标准抗B抗体试剂。符合GA471一2004的各项要求；a）bzxz.net
甲醇（分析纯）；
生理盐水；
d）A型、B型指示红细胞悬液（0.1%~0.2%)(见附录A)；e)
鸡蛋清溶液（3%）（见附录B)。4.2器材
台式离心机：
光学显微镜；
负压吸引装置：
恒温箱：
加样器、加样器吸头；
眼科剪、眼科镊、分离针；
载玻片、盖玻片、载玻片架、洗片架、保湿盒、白瓷盘、毛细管；玻璃笔、滤纸。
查标准上建标网wwiz321.net
GA656-2006
5操作方法
5.1凝集法检测人血液ABO血型
5.1.1取待检血液少许，用生理盐水离心洗涤（1000r/min，3min.）1次～3次，并用生理盐水配成3%~5%的红细胞悬液。
5.1.2取洁净凹玻板，两凹处分别标记A与B。两凹内分别滴加标准抗A.标准抗B抗体试剂各1滴。5.1.3于两凹内分别滴加5.1.1中配制的3%～5%的红细胞悬液1滴，摇动凹玻板，摇匀抗体和细胞，室温观察凝集情况，5min~10min后记录结果。5.2蛋白粘片法检测人血痕ABO血型5.2.1取洁净载玻片，用玻璃笔在两端各画一直径0.6cm～0.8cm圆圈。分别用记号笔注明A，B端及检材标号。置于载玻片架上。5.2.2用吸管吸取3%蛋清溶液少许，分别点铺于载玻片A，B端的圆圈内，并吸去多余的蛋清液体。5.2.3以洁净剪刀、锻子取血痕纱布的一根带血痕纱线约0.1cm长（或相应大小的其他类检材，或刮取极微量的检材粉末）于蛋清溶液上，用分离针仔细分离。5.2.4待蛋清自然干燥后，各滴加甲醇溶液一滴固定，自然挥发干燥。5.2.5按标记在A，B两端圆圈内分别滴加抗A，抗B血清试剂覆盖检材，然后将其连同载玻片架放置于保湿盒内，室温负压（760mmHg）吸收20min。如果没有负压吸引器，置4℃～8℃冰箱中吸收约2小时。
5.2.6取出载玻片垂直放在洗片架上，垂直浸人盛有冷自来水的白瓷盘内，不经动立即垂直取出换水，如此反复8次～12次。
5.2.7用滤纸平铺于载玻片上吸干水分，按标记分别在两端滴加相应的0.1%～0.2%指示红细胞，加盖盖玻片，放人56℃恒温箱内热解离5min10min。5.2.8取出载玻片，置保湿盒内室温放置10min20min后，放于显微镜下，以分离针尖轻点盖玻片，观察红细胞凝集情况，记录结果。6结果判定
凝集法结果判定见表1，蛋白粘片法结果判定见表2。表1凝集法检测人血液ABO血型结果判定检材编号
检材编号
表2蛋白粘片法检测人血痕ABO血型结果判定A侧
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结果判定
结果判定
7注意事项
7.1凝集法检测人血液ABO血型
7.1.1待检血液如果为新鲜血液，可以不用洗涤，直接配成3%～5%的红细胞悬液。GA656-2006
7.1.2洗涤红细胞的次数，应根据其上清液的颜色判定。如果颜色发红，说明有红细胞破坏，应轻微洗涤，在判定结果时应考虑此因素，7.1.3抗体和红细胞混合后，应即刻摇动凹玻板，避免红细胞粘附板底，影响凝集的观察。7.1.4肉眼观察难于判定红细胞是否凝集或凝集较弱，难于正常分型时，可在显微镜下观察。必要时检测其血清抗体或用其他方法检测。7.1.5一些难于判断的情况，应考虑亚型及其他稀有型。7.2蛋白粘片法检测人血痕ABO血型7.2.1检验的同时应分别取空白处检材和已知各型的人血痕检材做空白和已知对照，并只有当空白和已知对照检测结果正确时，样本的检验结果才能采信。7.2.2指示红细胞应新鲜配置，并在显微镜下检查有无自凝集现象，隔天使用应进行重新洗涤。另外，指示细胞为同型多人份混合血液制备的较好。7.2.3标推抗A抗体、标准抗B抗体试剂效价应为1：128左右。7.2.4加抗体吸收后的洗涤次数应根据洗涤手法、检材的种类和量做相应的调整，血斑不同于精斑、唾液斑等体液斑和多数组织浸液检材的洗涤次数。洗涤用自来水温度不能过高。7.2.5若无条件负压吸收，则应放于保湿盒内，置4℃～8℃冰箱30min至数小时，使之充分吸收。7.2.6结果观察时间不宜超过1h。7.2.7本法灵敏度高，要严格操作，避免检材交叉污染。查标准上建标网wwiz321.net
GA656—2006
A.1配制材料
新鲜A型、B型、O型人红细胞，
生理盐水；
离心机、离心管、吸管：
加样器、加样器吸头：
记号笔。
A.2操作步骤
附录A
（规范性附录）
指示红细胞配制
A.2.1在3个10mL离心管上分别标上A型、B型、O型字样，并分别加人5mL～8mL生理盐水，然后分别加人约0.5mL新鲜A型、B型、O型人红细胞。A.2.2将以上3个离心管离心，800r/min~1000r/min，5min。A.2.3轻轻将上清液吸出、弃去。如果上清液为无色透明，进行下一步，如果上清液颜色淡红，则要重复A.2.1和A.2.2步骤，直至其颜色为无色透明。A.2.4用生理盐水将A.2.3洗涤后的红细胞分别配成0.1%~0.2%A型、B型和O型红细胞悬液。配制材料
新鲜鸡蛋；
生理盐水：
吸管；
加样器、加样器头。
B.2操作步骤
附录B
(规范性附录）
3%鸡蛋清溶液配制
GA656—2006
B.2.1在10mL离心管中加人5mL生理盐水，并在离心管上标上3%鸡蛋清溶液字样。B.2.2用一尖物在鸡蛋一端开一小口，然后吸出蛋清液0.15mL，并将其加到B.2.1的生理盐水中，用吸管反复吹吸混匀。
GA656-2006
中华人民共和国公共安全
行业标准
人血液（痕）ABO血型检测
凝集法、解离法
GA656—2006
中国标准出版社出版发行
北京复兴门外三里河北街16号
邮政编码：100045
网址bzcbs.com
电话：6852394668517548
中国标准出版社案皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销
开本880×12301/16印张0.75字数9千字2007年1月第一版2007年1月第一次印刷书号：155066·2-17418定价10.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究
举报电话：（010)68533533
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中华人民共和国公共安全行业标准GA656—2006
人血液（痕）ABO血型检测
凝集法、解离法
Detection method for ABO blood type in human blood(stains)-Hemagglutination test,elution test2006-11-03发布
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2007-03-01实施
本标准的4.1a)为强制性的，其余为推荐性的。本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准由全国刑事技术标准化委员会提出并归口。本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、黑龙江省公安厅等。GA656--2006
本标准起草人：温佩忠、张大安、刘开会、李晓平、朱爱民、李澎、刘旭丹、常彩琴、张英兰、李兆隆等。1范围
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凝集法、解离法
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本标准规定了法医生物物证检验中血液（痕）ABO血型检测的材料准备、操作方法和结果判定。本标准适用于从事法庭科学检验人血液(痕)ABO血型。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标推的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GA471一2004抗A、抗B血清试剂
3原理
疑集法：人红细胞表面存在有A，B和H抗原物质，在抗A抗体、抗B抗体或抗H抗体的作用下，发生抗原抗体反应，使红细胞发生凝集。根据与相应抗体发生凝集反应的情况，可判断ABO血型。解离法（蛋白粘片法）：本法是利用抗原和抗体反应在适宜温度下所形成的抗原抗体复合物，在一定条件下抗原抗体复合物可以释放抗体，而保持抗原和抗体原有的性质不变的原理来设计的。检材中的A、B血型物质，在抗A抗体或抗B抗体存在的情况下，发生抗原抗体反应，形成抗原抗体复合物。当在50℃56℃条件下，抗原抗体复合物发生解离，使抗体游离于液体中，当温度降低至37℃左右时，游离的抗体与相应的指示红细胞抗原发生凝集反应，在显微镜下可观察到凝集发生。根据与相应指示红细胞发生凝集反应的情况，可推断血痕所携带的抗原，判断ABO血型。4试剂与器材
4.1试剂
标准抗A抗体、标准抗B抗体试剂。符合GA471一2004的各项要求；a）bzxz.net
甲醇（分析纯）；
生理盐水；
d）A型、B型指示红细胞悬液（0.1%~0.2%)(见附录A)；e)
鸡蛋清溶液（3%）（见附录B)。4.2器材
台式离心机：
光学显微镜；
负压吸引装置：
恒温箱：
加样器、加样器吸头；
眼科剪、眼科镊、分离针；
载玻片、盖玻片、载玻片架、洗片架、保湿盒、白瓷盘、毛细管；玻璃笔、滤纸。
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5操作方法
5.1凝集法检测人血液ABO血型
5.1.1取待检血液少许，用生理盐水离心洗涤（1000r/min，3min.）1次～3次，并用生理盐水配成3%~5%的红细胞悬液。
5.1.2取洁净凹玻板，两凹处分别标记A与B。两凹内分别滴加标准抗A.标准抗B抗体试剂各1滴。5.1.3于两凹内分别滴加5.1.1中配制的3%～5%的红细胞悬液1滴，摇动凹玻板，摇匀抗体和细胞，室温观察凝集情况，5min~10min后记录结果。5.2蛋白粘片法检测人血痕ABO血型5.2.1取洁净载玻片，用玻璃笔在两端各画一直径0.6cm～0.8cm圆圈。分别用记号笔注明A，B端及检材标号。置于载玻片架上。5.2.2用吸管吸取3%蛋清溶液少许，分别点铺于载玻片A，B端的圆圈内，并吸去多余的蛋清液体。5.2.3以洁净剪刀、锻子取血痕纱布的一根带血痕纱线约0.1cm长（或相应大小的其他类检材，或刮取极微量的检材粉末）于蛋清溶液上，用分离针仔细分离。5.2.4待蛋清自然干燥后，各滴加甲醇溶液一滴固定，自然挥发干燥。5.2.5按标记在A，B两端圆圈内分别滴加抗A，抗B血清试剂覆盖检材，然后将其连同载玻片架放置于保湿盒内，室温负压（760mmHg）吸收20min。如果没有负压吸引器，置4℃～8℃冰箱中吸收约2小时。
5.2.6取出载玻片垂直放在洗片架上，垂直浸人盛有冷自来水的白瓷盘内，不经动立即垂直取出换水，如此反复8次～12次。
5.2.7用滤纸平铺于载玻片上吸干水分，按标记分别在两端滴加相应的0.1%～0.2%指示红细胞，加盖盖玻片，放人56℃恒温箱内热解离5min10min。5.2.8取出载玻片，置保湿盒内室温放置10min20min后，放于显微镜下，以分离针尖轻点盖玻片，观察红细胞凝集情况，记录结果。6结果判定
凝集法结果判定见表1，蛋白粘片法结果判定见表2。表1凝集法检测人血液ABO血型结果判定检材编号
检材编号
表2蛋白粘片法检测人血痕ABO血型结果判定A侧
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结果判定
结果判定
7注意事项
7.1凝集法检测人血液ABO血型
7.1.1待检血液如果为新鲜血液，可以不用洗涤，直接配成3%～5%的红细胞悬液。GA656-2006
7.1.2洗涤红细胞的次数，应根据其上清液的颜色判定。如果颜色发红，说明有红细胞破坏，应轻微洗涤，在判定结果时应考虑此因素，7.1.3抗体和红细胞混合后，应即刻摇动凹玻板，避免红细胞粘附板底，影响凝集的观察。7.1.4肉眼观察难于判定红细胞是否凝集或凝集较弱，难于正常分型时，可在显微镜下观察。必要时检测其血清抗体或用其他方法检测。7.1.5一些难于判断的情况，应考虑亚型及其他稀有型。7.2蛋白粘片法检测人血痕ABO血型7.2.1检验的同时应分别取空白处检材和已知各型的人血痕检材做空白和已知对照，并只有当空白和已知对照检测结果正确时，样本的检验结果才能采信。7.2.2指示红细胞应新鲜配置，并在显微镜下检查有无自凝集现象，隔天使用应进行重新洗涤。另外，指示细胞为同型多人份混合血液制备的较好。7.2.3标推抗A抗体、标准抗B抗体试剂效价应为1：128左右。7.2.4加抗体吸收后的洗涤次数应根据洗涤手法、检材的种类和量做相应的调整，血斑不同于精斑、唾液斑等体液斑和多数组织浸液检材的洗涤次数。洗涤用自来水温度不能过高。7.2.5若无条件负压吸收，则应放于保湿盒内，置4℃～8℃冰箱30min至数小时，使之充分吸收。7.2.6结果观察时间不宜超过1h。7.2.7本法灵敏度高，要严格操作，避免检材交叉污染。查标准上建标网wwiz321.net
GA656—2006
A.1配制材料
新鲜A型、B型、O型人红细胞，
生理盐水；
离心机、离心管、吸管：
加样器、加样器吸头：
记号笔。
A.2操作步骤
附录A
（规范性附录）
指示红细胞配制
A.2.1在3个10mL离心管上分别标上A型、B型、O型字样，并分别加人5mL～8mL生理盐水，然后分别加人约0.5mL新鲜A型、B型、O型人红细胞。A.2.2将以上3个离心管离心，800r/min~1000r/min，5min。A.2.3轻轻将上清液吸出、弃去。如果上清液为无色透明，进行下一步，如果上清液颜色淡红，则要重复A.2.1和A.2.2步骤，直至其颜色为无色透明。A.2.4用生理盐水将A.2.3洗涤后的红细胞分别配成0.1%~0.2%A型、B型和O型红细胞悬液。配制材料
新鲜鸡蛋；
生理盐水：
吸管；
加样器、加样器头。
B.2操作步骤
附录B
(规范性附录）
3%鸡蛋清溶液配制
GA656—2006
B.2.1在10mL离心管中加人5mL生理盐水，并在离心管上标上3%鸡蛋清溶液字样。B.2.2用一尖物在鸡蛋一端开一小口，然后吸出蛋清液0.15mL，并将其加到B.2.1的生理盐水中，用吸管反复吹吸混匀。
GA656-2006
中华人民共和国公共安全
行业标准
人血液（痕）ABO血型检测
凝集法、解离法
GA656—2006
中国标准出版社出版发行
北京复兴门外三里河北街16号
邮政编码：100045
网址bzcbs.com
电话：6852394668517548
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开本880×12301/16印张0.75字数9千字2007年1月第一版2007年1月第一次印刷书号：155066·2-17418定价10.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究
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