本文件界定了长牡蛎［Crassostrea gigas(Thunberg，1793)］的术语和定义，确立了学名与分类，规定了主要形态结构特征、生长与繁殖特性、细胞遗传学特性与分子遗传学特性，描述了相应的检测方法，给出了判定规则。 本文件适用于长牡蛎的种质鉴定和检测。

ICS65.150
CCSB51
中华人民共和国国家标准
GB/T20552—2023
代替GB/T20552—2006
长牡蛎
Pacific oyster
2023-12-28发布
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国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2024-07-01实施
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则起草。
GB/T20552—2023
第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件代替GB/T20552—2006《太平洋牡蛎》，与GB/T20552—2006相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：
更改了分类地位（见4.2，2006年版的3.2）；更改了可量性状比值（见5.2，2006年版的4.1.2.1)；删除了壳高与壳长、壳长与体重的关系式（见2006年版的4.1.2.3）；删除了生化遗传学特征及检测方法（见2006年版的第7章、8.2）；增加了分子遗传学特性描述及检测方法（见第8章，9.5）；增加了判定规则（见第10章）。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国农业农村部提出本文件由全国水产标准化技术委员会（SAC/TC156）归口。本文件起草单位：中国海洋大学。本文件主要起草人：李琪、于瑞海、李海昆、徐成勋、刘士凯、孔令锋、于红。本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：2006年首次发布为GB20552—2006，2017年转为推荐性国家标准GB/T20552—2006；一本次为第一次修订。
1范围
长牡蛎
GB/T20552—2023
本文件界定了长牡蛎[Crassostreagigas（Thunberg，1793）的术语和定义，确立了学名与分类，规定了主要形态结构特征、生长与繁殖特性、细胞遗传学特性与分子遗传学特性，描述了相应的检测方法，给出了判定规则
本文件适用于长牡蛎的种质鉴定和检测。规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T18654.2
养殖鱼类种质检验
GB/T22213水产养殖术语
GB/T32757
贝类染色体组型分析
3术语和定义
第2部分：抽样方法
GB/T22213界定的以及下列术语和定义适用于本文件3.1
壳高shellheight
壳顶至壳腹缘的最大距离
shelllength
垂直于壳高、与两壳绞合线平行方向的前后缘间最宽部分的长度。4学名与分类
4.1学名
长牡蛎Crassostreagigas（Thunberg，1793)。4.2分类地位
软体动物门（Mollusca），双壳纲（Bivalvia），牡蛎目（Ostreida），牡蛎科（Ostreidae），巨蛎属（Crassostrea)。
主要形态结构特征
外部形态
贝壳长形，壳较薄。左壳固着，深陷，鳞片粗大：右壳较平，鳞片环生，呈波纹状，排列稀疏，放射肋不1
GB/T20552-—2023
明显。壳顶腔深，并常具有白垩色的沉积物。壳表白垩色到紫褐色。长牡蛎外形见图1标引序号说明：
1—右壳；
一左壳；
壳长；
h壳高。
图1长牡蛎外形
5.2可量性状
1龄~2龄长牡蛎的壳高为53mm~162mm，壳长为26mm~92mm，壳高与壳长的比值为1.05~3.49。
5.3内部结构
5.3.1外套膜：左右两片，有一个愈合点，属二孔型。闭壳肌：1个。
鳃：左右各1对，共4片。
唇瓣：左右各2片。
生长与繁殖特性
1龄长牡蛎壳高为53mm~114mm，壳长为26mm~68mm，质量为8g~53g：2龄长牡蛎壳高为78mm~162mm.壳长为46mm~92mm，质量为53g~214g。6.2繁殖
6.2.1性成熟年龄
1龄。
2性别
雌雄异体，个别雌雄同体，有性逆转现象2
生殖方式
卵生型，体外受精。www.bzxz.net
繁殖季节
5月～7月。
怀卵量
数百万粒至数千万粒。
卵的特征
沉性卵，梨形、椭圆形或圆形。7
细胞遗传学特性
染色体数
二倍体体细胞染色体数：2n=20。7.2核型
GB/T20552—2023
染色体组型见图2，染色体核型公式为：2n=20m，NF=40，其中，m指中部着丝粒染色体，NF指染色体臂数。
分子遗传学特性
长牡蛎染色体组型
线粒体COI基因碱基参考序列如下（621bp)：ATAGTATTTG
TATTCGTTGG
CTTATAATGC
GTTATACCTG
GCTTCTAGTA
GAGTTTTGCC
AACGGAGTTG
GATTTTGAGC
AGACTTTATA
AGTTGTAACT
TAATAATTGG
GCAGACATGC
AGGGTCTCTT
GGGCAGGGTG
TGTTCTTGCG
ACCCTGGAGC
AGGCATGCGT
GGGGTTTGGT
AATTTCCTCG
TATCTTATGC
AACAATTTAC
GGAACTAGGT
TAAGTTTTTA
TGGTTATGAT
AACTGGCTTA
ATTAAATGCA
TTATGTCTAA
CCTCCTTTAT
TTAGGTCTCT 50
GACCCCGTGA 100
TTTTTTCTTT150
TCCCTTTGAT 200
TTTAGATTTT 250
CATTGTAGAA 300
CAACTTACTC 350
GB/T20552—2023
TTATCATGGA
GTATTAGCTC
ATGCGATCTG
GGTTACTTCA
TTACTATACT
GTCGGAGGGG
GTTTGTATAG
TATTTTCAGG
TTGGGGGCCA
TTCTTGCTTT
TTTGACTGAT
GGGACCCTGT
种内K2P遗传距离小于2%
检测方法
按照GB/T18654.2的规定执行。
9.2主要形态结构特征
外部形态
在充足光线下肉眼观察
可量性状
ACCTTGCAAT
TCAATTAATT
TTTACTAGCA
TGACTACTCT
CGTCATTTTA
壳高和壳长按照定义用游标卡尺测量。9.2.3
内部结构
撬开外壳后，在充足光线下肉眼观察。9.3
生长与繁殖特性
9.3.1生长
用游标卡尺测量壳高和壳长，用电子秤称量质量。9.3.2
性成熟年龄
查询养殖记录。
9.3.3性别
通过显微镜观察生殖细胞分辨性别。生殖方式
通过显微镜观察排放的生殖细胞判断生殖方式。9.3.5
繁殖季节
TCTAAGCCTT
TCATAGTAAC
CTATTCCCTT
CCCAGTGTTA
ATACCTCTTT
肉眼观察性腺的发育程度并结合显微镜观察生殖细胞判断繁殖季节。9.3.6
怀卵量
CACCTTGCTG400
GATTAGAAAT 450
GATCTATTAA500
GCTGGAGGTC550
TTTTGACCCT 600
解剖雌贝，将整个卵巢取出，揉碎溶于海水中，经稀释后取一定体积在显微镜下统计卵的数量，计算卵的浓度，进而计算怀卵量，测3次取平均值。4
9.3.7卵的性质
在显微镜下观察卵的形态
细胞遗传学特性
GB/T20552—2023
采用成体鳃组织法，将长牡蛎在0.005%的秋水仙素海水中处理10h，取鳃组织用含0.05%秋水仙素的海水处理45min，其余操作按照GB/T32757的规定执行，其中，低渗时间为30min45min，解离时间为50min，热滴片法滴片。
分子遗传学特性
按附录A执行。
判定规则
当检测结果符合第5章和第7章的要求，可判定该种质时，按第5章和第7章的要求判定2当出现下列情况之一时.增加检测第6章和第8章要求的内容，依据检测结果进行辅助鉴定：10.2
第5章和第7章的项目无法进行检测或者判定时；第三方提出要求时。
GB/T20552—2023
A.1总DNA提取
附录A
（规范性）
长牡蛎coI基因序列分析
取闭壳肌100mg，按照标准的酚-三氯甲烷抽提法或者使用试剂盒进行DNA提取A.2
引物序列
COI-F:5'-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3'，COI-R:5'-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3
PCR扩增
反应体系为25μL，包括0.5μL的TagDNA聚合酶（2.5U/μL），正反引物各0.5uL(10μmol/L)，0.5μL的dNTP(10mmol/L),2.5μL的10XPCR缓冲液[200mmol/LTris-HCl.pH8.4;200mmol/LKCl;100mmol/L（NH）SO；15mmol/LMgClaJ，加灭菌的蒸馏水至25μL，基因组DNA约为20ng。PCR参数包括94℃预变性5min，94℃变性30s.51℃退火30s.72℃延伸1min，循环35次，然后72℃延伸7min。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测后进行双向测序。遗传距离计算
利用Kimura两参数模型（Kimura2-parameter，K2P）计算检测样品的序列与参考序列的遗传距离6
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