QB/T 1803-1993.General methods of determination for industral enzymes.
1主题内容与适用范围
QB/T 1803规定了工业酶制剂的试验方法。本标准适用于工业酶制剂的检测。
2引用标准
GB 601化学试剂滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备GB 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB 604 化学试剂酸碱指示剂pH变色域测定通用方法GB 1250极限数值的表示方法和判定方法
GB 4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB 4789.3食品卫生微生物学检验大肠菌群测定GB 4789.4食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验
GB 4789.15食品卫生微生物学检验霉菌和酵母数测定GB 6004 试验筛用金属丝编织方孔网
GB 6682实验室用水规格
GB 8170
数值修约规则
GB 8451
食品添加剂中重金属限量试验法
GB 9721化学试剂分子吸收分光光度法通则(紫外和可见光部分)
3总则和基本要求
3.1总则
3.1.1 方法中所采用的名词术语,计量单位应符合国家规定的标准。
3.1.2方法中所用的各种分析仪器(如:分析天平、酸度计、分光光度计和紫外分光光度计等)要按时检定﹔所用的滴定管、移液管﹑容量瓶等器具应按有关检定规程定期校正。
3.1.3方法中所用的“仪器”为试验中所必须使用的特殊仪器，一般实验仪器不再列入。
3.1.4︰方法中所用的水,在未注明其它要求时,应符合GB 6682中三级(或以上)规格要求。
3.1.5方法中所用的试剂,在未注明其它规格时,均指分析纯(A.R)。
3.1.6方法中的“溶液”除另有说明外,均指水溶液;“稀释至刻度”是指用水稀释定容至刻度。
3.1.7 同一检测项目,有两个或两个以上试验方法时,各实验室可根据各自条件选用,但以第一法为仲裁法。
3.1.8理化要求以实测数据报告其试验结果,数据的计算与取舍,遵照GB 8170执行﹔极限值的判定

中华人民共和国轻工行业标准
工业酶制剂通用试验方法
General methods of determinatienfor industral enzymes
1主题内容与适用范围
本标准规定了了业酶制剂的试验方法。本标准适用于工业酶制剂的检测，2引用标准
化学试剂滴定分析（容量分析)用标准溶液的制备GB 601
GB 603
GB 604
化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备化学试剂酸碱指示剂II变色域测定通用方法极限数值的表示方法和判定方法GB 1250
GB4789.2食品1生微生物学检验菌落总数测定GB4789.3食品卫生微生物学检验大肠菌群测定bzxz.net
食品卫牛微生物学检验
沙门氏菌尬验
食品卫生徽生物学检验菌和酵母数测定GH 4789. 15
GB6004
GR6682
GB 8170
GB8451
试验筛用金属丝编织方孔网
实验室用水规
数值修规测
食品添加剂中重金属限基试验法GB9721化学试剂分子吸收分光光度法通则<紫外和可见光部分）3总则和基本要求
3.1总则
3.1.1方法中所来用的名词术语，计量单位应符合国家规定的标推，QB/T 1803—1993
3.1.2方法中所用的各种分析仪器（如：分析天平、胶度计、分光光度计和紫外分光光度计等)要按时检定，所用的滴定誉、移液管，容盘瓶等器具应按有关检定规程定期校正。3.1.3方法中所用的“仪器“为试验中所必须使用的特殊仪器，一般实验仪器不再列人。3.1.4方法中所用的水，在未注明其它要求时，应符合(H 6682 中三级(载以上)规格要求3.1.5方法中所用的试剂，在末注明其它规格时，均指分析纯（A.R)。3.1.6方法中的“溶液”，除另有说明外，均指水溶液，\稀释至刻度”是指用水稀释定容至刻度。3.1.7同一检测项目，有两个或两个以上试验方法时，各实验室可根据各自条件选用，但以第一法为伸裁弦
3.1.8理化要求以实测数据报告其试验结果，数据的计算与取舍，遵照GB8170执行，极限值的判定中华人民共和国轻工业部1993-07-29批准1994-03-01卖施
QB/T 1803-1993
按GB1250修药值比较法进行，结果的有效数宇要与技术要求相一致，3.2基本要求
3.2.1测定样品，必须做行试验，TKAONTKAca
3.2.2标准溶获的泌度，一采用物质的量浓度.单位为摩尔每升或摩尔每立方米表示，如：盐酸标准溶液[c(HCI)—0. Imo1/L]。
3.2.3试验中所用玻璃器皿,用筋须以铬酸洗涤液或合成洗涤剂浸疤，用白来水冲洗，再用蒸缩水洗干静。
3.2.4试验方法中吸取或称量时的有效数字，表示要求达到的精确度。4外观及气味检查
取固体酶样（或10ml.体酶)2g倒入25mL下燥小烧杯中,置于算下先膜其气味，然后，再耳视检查外观，作好赖查记录。
5酶活力的试验方法
活力的懋楚，见附暴A（补充件）。6干爆失重的试验方法
6.1原理
在书压[,将试样置了103℃士2℃电热干燥箱烘下2h，用称量法测定其失去发物的质量，以口分数表示。
6.2仪器和设备
6.2.1电热干烘箱
#03r=2c,
6.2.2 称量瓶 25mm×40mm。
6.2.3干燥器以变色硅胶作-1-嫩剂。z感量C.lmg。
6. 2. 4 分析义平
6.3分析步骤
用烘七至恒重的称量瓶称取酶样约2g精确率0,0002h，置干103C士2℃电热下燥箱中将盖取#，侧放在称量瓶旁，烘干2h,取出，加盖-放人干燥幕中冷却至溢（约 30min）,称量，6.4 计算
X=mme×100
式中：X一一样品的干燥尖重,%(m/m);mi
干爆前，称盘瓶加样品的质量，g：m2---—干燥后，称量瓶加样品的质量，8；m…称量瓶的质量，多。
所得结果表示至筱小数。
6.5结果的允许差
平行试验相对误差不得超过 0. 5%。7细(粒)度的试验方法
7.1原理
取一定量的酶样，用规定的标准筛进行筛分，称鼠，计算通过标筛酶样的质量凸总取样量的白分数（或计算双层筛中间物质量占总取样鼠的百分数）。7.2仪器和设备
7.2.1标推试验筛
QB/T 1803---1993
sSw 1. 18/0. 30mm GB 6004(相当于原14且ssw0.80/0.450mmGB6001(相当于原20月）)ssw心.40/0.250mmGB6004(相尚于原39日）ssw0.25/0.160mmGB6004（相当于原62月）7.2.2物理火平感量为0.2。
7. 3分析步骤
7.3.1称取造体酶样100g，精确至0.2g：7. 3. 2将规定的标准筛装上,筛底岛，然后把称好的样品全部转人标准筛1:,加盖,振荡筛分 5tnil(并,不时敏打筛挪），静置2min，取下上益，小心将筛上物全部转人到已知质量怕烧杯中，用天平称量，按式（2）计算。
7.3.3洗涤剂用酶按产品标准中粒度规定，来用上、下限双层筛进行筛分，取双层筛的中问物（即下层筛的筛上物)质量，按式(3)计算。7.4计算
式中+X,-
X=100元\×100-10-—
样品的细度.%（m/m）；
样品的粒度，（m/）
-筛物（或间物)的质量+！
取样量，
所得结果表示至数。
7.5结果的允许差
乎行试验相对误差不得超过可%。容重的试验方法
8.1原理
量取固体酶样(或泌体酶)100ml.,在20℃:,称其质量,计算单位体积酶的质鼠,即为样品的容重，以E/ml.表示，
8.2 仪器和设备
8. 2. 1恒激水浴
20℃±0.1℃.
8.2.2分析天半感呈为 0. 1mg。8.2. 3容量瓶
100ml（准确校正过），
8.3分析步骤
用--个活净、干嫩的已知质港的1001l.容量瓶，取下瓶塞，在上口处，效·个角玻璃漏斗，将酶样（23℃）白然地缓缓地注人容量瓶中（不要磁），直刻度。取下三角漏斗，期盖瓶塞，称盘。8.4 诈算
式X一样品的容重·/mL,
m, --.—容显孤加样而的质量-g :331
容盘瓶的质量g
100--—联样体积,mL。
所得的结果表示至二位小数，
8.5结果允许差
平行试验相对误差不得趋过5%。9 pH 值的试验方法
9.1原理
QB/T18031993
TTKAONTKAca
将指示(玻璃)极和参比(甘求)电极没人被测样液中,构成·个原电池·其电动势与溶液的1H值有关，通过测录原电池的电动势即可得出溶液的H值。9.2试剂和获液
9.2.1石酸盐标准缓冲溶液用无二氧化碳水溶解外消旋的酒石酸氢钾（KHC,II,O）,并烈振据至饱和游液。25 ℃时,pII3.56。9. 2. 2解酸盐标准缓冲溶護称取磷酸二氧钾(KH,PO,)3. 40g 和磷酸效二钠(Na2HPO,)3. 55g,溶于无二氧化碳的水中并辑释至1000mL。25C时，PH=6.86。解酸二氢钾和磷酸氢二钠须预先在120C土10℃干燥2h：
也可用专供校准用的混合解酸盐pH缓冲剂(25℃pH=6.864)。9. 2-3碘酸盐标准缓泌溶液称取四酸钠(Na,B,O, 10H,O)3. 8l,溶于无二氧化碳水中,并稀释至1000ml.,此溶液浓度c(NhzB,O,10H20)=0. 01mol/l-。25C时,pH 9. 18,存放时应防止空气中二氧化碳进人。
也可用专供校推用的硼砂pH缓冲剂(25CPH=9.18)配制。9.2.4氢氧化钙标准瑷冲溶恢于25℃，用无二氧化碳水溶解氢氧化钙制成饱和溶液，其浓度c1/2Ca(0H)2J成在0.0400～0.0412mol/L。存放时应防止空气中二氧化碳进人。一旦出现混浊，应弃去重配。25C时,pH=12.45.
9.2.5水符合GB 6682中三级水规格。9.3仪器
9. 3. 1 pH 计分度值为 0. 02pH 单位并应备有电磁揽择器。9. 3.2指示(皱璃)电极用前须在水中要泡 24h 以,上,用后应立即清洗,并短人水中。9. 3. 3参比(饱和甘汞)电极使用时中极上端小孔的胶皮塞必须拔出，以防止产生扩散电位，影响测定结果。电极内氯化钾液中不能有气泡，以防止断路。9. 4分析步骤
9. 4. 1将温度补偿旋钮调至 25 ℃,用接近 T被测溶液 pH 值的两种标缓冲溶液校正 pH 计,定位。9. 4.2用水冲洗电极，再用样液洗涤电极，调整样液温度并将凝度补偿调至 25 .测定样液的 pH 值，重复测定操作，直到 pH值读数稳定 Imin 为止。所得结果表示至一位小数。
9.4.3结果的充许差
平行试验之差不得超过 0. 1pH。10洗涤剂用醇制剂潮解（溶解）时间的试验方法10.1原理
称取固体酶样1g,放人一定量的水中,在规烂的温度与揽拌速度下,记录其在水中全部巢解溶解）所需的时间。
10.2仪器
10.2. 1恒温水浴30r:±0.2
10.2.2电磁搅拌器（带猛控的），10.2.3分析天平感量为0.1mg。
10.2.4秒表。
10.3分析步骤
QB/T1803:1993
称取固体酶样1.000g，精确至0.001g，置于事先感有100mL、30℃+0.2℃水的150m1.烧杯，放入一枚转子，肾于30它电磁搅拌器上，立刻计时，以中速搅拌，记录样品在水中全部期解(溶解)的时间，先作预备试验,每30s,停止搅拌观察一改，记录直率部期解(溶解)所需的时问。正式试验时，根据预务试验的结巢，按预测的时间停止搅拌，观察并记录在水中全部谢解（溶解)的时间。所得结果表示至秒。
10.4结果的允许差
平行试验之差不得超过30s。
1醇活力保存率的计算方法
11.1源理
根据标签上标示的酶活力和实测的酶括力,计算出实测酶活力为标示酶活力的有分数。11. 2酶活,力保存率的计算
式中：X-
样品的酶活力保存率，%；
Ei——样品的实测醇活力,u/g(u/mril.)：E—样品的标示酶活力，u/g(u/mL)。所得结果表示至整数
12卫生要求的检测
12. 1重金属的测定,按GB 8451进行，12. 2细菌总数的测定,按(H 4789, 2 进行。12.3大肠菌群的测定，按B4789.3进行。12.4霉菌和酵母菌的测定，按GB 1789.15进行。12.5沙门氏蘑的检验，按GB4789.4进行。（6)
A1C-淀粉酶
41. 1 定义
QB/T 1803—1993
附录A
酶活力的试验方法
(补充件）
TTKAONTKAca
1g 固体酶粉(毁 1mL被体酶),于 60C,pTI一6,条件,1h 液化 1g可溶性淀粉,为 1 个酶活力单位,以u/g(u/mL)表示。
A1.2源理
α 淀粉酶能将淀粉分子链中的α-1,1 葡葡苷键随机切断成长短不--的短链糊精、少压麦穿糖和葡萄糖，而使淀粉对碘呈蓝紫色的特异性反应逐渐消失，是红棕色，其颜色消尖的速度与酶裤性有关，战可通过固定反应后的吸光度计算其酶活力。A1. 3试剂和溶液
A1.3.1原碘液称取碘（I,)11g、碘化钾（KI)22g，用少草水使碘完全游解，然后定容至5(00ml-f棕色瓶中
41. 3.2稀碘液吸取原碘液(A1. 3. 1)2. 0tnl.,加碘化钾 20g用水溶解并定容至 500ml,,贴-1 棕色瓶中
41.3-320g/L 可溶性淀粉1猝液称取叫落性淀粉(以绝干让)2. 000g+精确至 .001g,用水调成浆状物，在撤动下缓缓颁人70mL沸水中，然后,以31rnL水分几次冲洗装淀粉的烧杯，洗液并人其中，加热我究全透明，冷却.定容至100ml，此游液需要当天配制，非：1）聚用新汁菱潮食品化了联合公同生产的叫溶性淀粉。41. 3. 4磷酸缓冲液(pH=6. 0）称取磷酸氢 钠(NazHP), ·12H,O)45. 23g、柠檬酸(C,Hg), H,0)8.07g用水溶解并定容室1000mI，配好后用[H计较正。A1.4仪器和设备
A1.4.1分光光度计应符合（GB9721的有关规定，A1.4.2帕湿水浴60±0.2°.
A1.4. 3 秒表。
A1.4.4试管25tmX200mm。
41.5分析步骤
A1. 5. 1 待测酶液的制备
称取酶粉1~~2g+精确至0.0002g（或吸取液体酶1.00ml.)，先用少盘的磷酸缓冲液(AI.3.4)溶解非用玻璃撑拌摔捣研，将消液小心倾人容最瓶中，犹渣部分再加人少量缓冲液，如此搬研3~-欲，最启全部帮人容量瓶中，用缓钟液定容至刻度（估计睡落力除以1，即活力耐在3.7-5.证1.范围内），摇勺。道过四层纱过撼滤液供测定用。41. 5.2测定
A1.5.2.1吸取性淀粉溶液（A！.3.3）20.0mL于流管（A1.4.4)中、加入缓冲液A1.3.4）5.00m,拼勾后，手60.2温水浴t预热 bmit.A1. 5. 2. 2加入释好的待测酶被(A1. 5. 1)1. 00mL,立刻计,摒匀,推确反应 5min A1.5.2. 3立邸吸取反成液(A1.5. 2. 2)1. 00mL 于稀碘液(A1. 3.2)5. C01L 中，摇与,并以稀碘液作空山，」660m波长下，用10mm比色逊速测定其吸光度（^)。根据其光度表A1,求得测试酶滋的浓度（r）
光度(A）
QB/T 1803--1993
波北度与测试α-资粉酶酶浓浪对照表酶浓接(e）
吸光澳（A）
57:161
酸浓度(c)
4, 257
吸光度(A)
o, 236
酶浓度(e)
吸光度(43
酶浓度(e)
3,9541
OB/T 1803—1993
表AI(续）
吸光度(A)
酶浓度(c)
啵光度(A)
0, 355
TiKANTKAca
酶泼度(e)
吸光度（A）
醉浓度(r)
QB/T 1803---1993
表AI（续）
吸光度(A)
D, 123
酵浓度(e)
吸光度(A)
0, 168
酶浓度(c)
吸光度(A)
酶浓斑(e)
QB/T 1B03---1993
表A1(缕）
吸光度(A3
酶浓度(e）
吸光度(A)
0, 626
TKAONTKAca=
酶浓腹(c)
峻光度（A）
式中：Y-
酶浓度(e)
QR/T 1803—1993
表Ai（完）
吸光度
样品的活力.u/g(u/ml.)：
c-.-测试酶液的浓度.u/mL;
-样品的稀释倍效：
所得结果丧示牟整数。
酶浓度(e)
吸光度(A)
酶浓度(e)
A1.7 结果的允许差
平行试验相对误差不得超过 2%。A2糖化酶
42.1 定义
QB/T1803--1993
TTKAONIKAca-
Ig 固体酶粉(或 1m1. 液体酶),丁 40C、pH一4. 6 的条件下,1h 分解可溶性淀粉产生 [mg 葡萄糖：即为，个活力单位，以u/g(u/mL)表示。A2-2源理
糖化酶有体化淀粉水解的作用,能从淀粉分子非还原性末端开始,分解女-1,4 葡药糖昔键生成葡萄糖。葡萄糖分子含有醛基，能被次碘酸钠氧化,过量的次碘酸钠,酸化后析出碘,再用硫代硫酸钠标准溶液滴定，计算出酶活力。
A2-3试剂和落液
A2.3.1乙酸—Z酸钠缓冲溶液(pH=4. 6)称取乙酸钠(CH,COONa · 3H,0) 6. 7g,溶于水中,加冰乙酸(CH,COOH)2. 6ml-,用水定容率100mL。配好后用 pH计较正，,
2.3.2硫代碰酸钠标准落浓cNazS02一0.05mo1/1按GB601配制与标定。
42.3. 3碘溶液c(1/21z)=0. 1ml/1.按 GB 601 配制 与标定。
A2.3.4氢氧化钠溶被(NaO1)-0.1mo1/L按 GB 601 配制。
2.3.5200g/L氢氧化钠溶婆
称取氢氧化钠20g，用水溶解并定容至100mL。A2. 3.6碱酸浴波 c(1/2H,S0,)=2mol/L量取浓硫酸(密度为1.84)5.fmL,缎缓注人80mL水中,冷却后,定容至100mL。A2.3.720g/L可溶性淀粉液溶
同 A1. 3. 3,
注，2）采用渐江菱湖食品化丁联合公可生产的可游性淀粉。A2.3.8[Og/L淀粉指示液
按GB601配制。或将20g/L叮溶性淀粉溶液稀释-格。A2.4仪器和设备
A2.4.1恒溢水浴
40℃±0.2℃。
A2.4.2秒表。
A2.4.3比色管
A2.5分析步骤
A2.5.1待测酶液的制备
称取酶粉 1～2g,精确至 0. 0002g(或吸取波体酶 1. 00ml),先用少量的艺酸缓冲液(A2. 3. 1)溶解,并用玻璃搅拌样摘研,将上清液小心倾人容量瓶中。沉渣部分再加人少量缓冲液,如此势研 3~4次,最后全部移人容量瓶中，用缓冲液定容至刻度（宿计酶活力按表A2相对应稀释倍数，使活力在100~250/m]，范内），摇勾，通过四层纱布过滤，滤液供测定用：
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