ICS 07.100.30 C53 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 4789.4—2003 代替 GB/T 4789.4-1994 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验 Microbiological examination of food hygiene - Examination of Salmonella 2003-08-11发布 中华人民共和国卫生部 中国国家标准化管理委员会 2004-01-01实施 前言 本标准对 GB/T 4789.4—1994《食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验》进行修订。 本标准与 GB/T 4789.4—1994 相比主要修改如下：按照 GB/T 1.1—2000 对标准文本的格式和文字进行修改，规范原标准中的“设备和材料”。本标准自实施之日起，GB/T 4789.4-1994 同时废止。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准起草单位：江西省卫生防疫站、中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。 本标准主要起草人：何晓青、冉陆、付燕、杨宝兰、姚景会。 本标准于1984年首次发布，1994年第一次修订，本次为第二次修订。 1 范围 本标准规定了食品中沙门氏菌的检验方法。 本标准适用于各类食品及食物中毒样品中沙门氏菌的检验。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有修改单或修订版均不适用于本标准，但鼓励达成协议的各方使用最新版本。 GB/T 4789.28—2003 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂 3 设备和材料 3.1 冰箱：0℃～4℃ 3.2 恒温培养箱：36℃±1℃，42℃ 3.3 显微镜：10×～100× 3.4 均质器或灭菌乳钵 3.5 架盘药物天平：0g～500g，精确至0.5g 3.6 灭菌广口瓶：500mL 3.7 灭菌锥形瓶：500mL、250mL 3.8 灭菌吸管：10mL（具0.1mL刻度） 3.9 灭菌培养皿：90mm 3.10 灭菌小试管：3mm×50mm 3.11 灭菌毛细管 4 培养基和试剂 4.1 缓冲蛋白胨水（BP）：按 GB/T 4789.28—2003 中4.12规定 4.2 氯化镁孔雀绿（MM）增菌液：按 GB/T 4789.28—2003 中4.13规定 4.3 四硫酸钠煌绿（TTB）增菌液：按 GB/T 4789.28—2003 中4.14、4.15规定 4.4 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液：按 GB/T 4789.28—2003 中4.16规定 4.5 亚硫酸铋琼脂（BS）：按 GB/T 4789.28—2003 中4.19规定 4.6 DHL琼脂：按 GB/T 4789.28—2003 中4.20规定 4.7 HE琼脂：按 GB/T 4789.28—2003 中4.21规定 4.8 WS琼脂：按 GB/T 4789.28—2003 中4.23规定 4.9 SS琼脂：按 GB/T 4789.28—2003 中4.22规定 4.10 三糖铁琼脂：按 GB/T 4789.28—2003 中4.26、4.27规定 4.11 蛋白胨水、靛基质试剂：按 GB/T 4789.28—2003 中3.13规定 4.12 尿素琼脂（pH7.2）：按 GB/T 4789.28—2003 中3.15规定 4.13 氰化钾（KCN）培养基：按 GB/T 4789.28—2003 中3.16规定 4.14 氨基酸脱羧酶试验培养基：按 GB/T 4789.28—2003 中3.12规定 4.15 糖发酵管：按 GB/T 4789.28—2003 中3.2规定 4.16 ONPG培养基：按 GB/T 4789.28—2003 中3.3规定 4.17 半固体琼脂：按 GB/T 4789.28—2003 中4.30规定 4.18 丙二酸钠培养基：按 GB/T 4789.28—2003 中3.7规定 4.19 沙门氏菌因子血清：用于初步分型、进一步分型及详细分型 5 检验程序 沙门氏菌检验程序如下： 样品 → 前增菌 → 增菌培养（BP、MM或TTB、SC） → 分离培养（BS、HE等选择性琼脂） → 生化鉴定（靛基质、尿素、KCN、赖氨酸等） → 血清学试验 → 判定结果 冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品：25g+BP 225mL，36℃±1℃预增菌4h，干蛋品18h～24h 10mL接种MM或TTB 100mL，42℃培养 10mL接种SC 100mL，36℃±1℃培养18h～24h 分离培养于BS等平板，36℃培养 挑取可疑菌落进行生化试验与血清学鉴定，必要时继续培养10h～48h