ICS 67.180 分类号：X30 备案号：55590-2016 QB 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T5015-2016 甜菜中 α-氨基氮的测定 The determination of α-amino nitrogen in sugar beet 2016-07-11 发布 2017-01-01 实施 中华人民共和国工业和信息化部发布 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国制糖标准化技术委员会（SAC/TC373）归口。 本标准起草单位：广东省生物工程研究所（广州甘蔗糖业研究所）（国家糖业质量监督检验中心）、东莞市东糖集团有限公司、广州市华侨糖厂、华南理工大学、广东恒福糖业集团有限公司、广东金岭糖业集团有限公司、广西洋浦南华糖业集团股份有限公司、南宁糖业股份有限公司、广西农垦糖业集团股份有限公司、广西博庆食品有限公司、广西陆屋欧亚糖业有限公司、广西大学、东莞理工学院、云南英茂糖业（集团）有限公司、南京甘汁园糖业有限公司、新疆绿翔糖业有限责任公司、中粮屯河崇左糖业有限公司、日照市凌云海糖业集团有限公司、博天糖业有限公司、营口北方糖业有限公司、新疆伊力特糖业有限公司、全国糖业标准化中心。 本标准主要起草人：高裕锋、刘少谋、李家威、黄雪影、邓海华、刘锋、尚明久、于淑娟、陈建津、甄振鹏、曾史俊、陆剑华、陈嘉敏、钟宏星、刘学文、陈红香、陈捷、平秋婷、李海乔、马步、谢志、翁卓、李京、蒙军、肖可见、吴遂、梁争柱、蔡纯、林水栖、凌宗仁、秦春城、杨运生、周锡文、温凯、李政、周玉生、王亚彪、丁润声、郑权、李国有、李凯、罗新伟、平亚军、邓广华、章科翔、王勇、孙克非、郭剑雄。 本标准为首次发布。 1 范围 本标准规定了糖料甜菜中α-氨基氮的测定方法。 本标准适用于糖料甜菜中α-氨基氮的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 在微酸性（pH6.0）的铜盐溶液中，α-氨基氮与铜离子生成蓝色络合物，其颜色深浅与α-氨基氮含量成正比，在580 nm波长处进行比色测定，从而计算α-氨基氮含量。 4 试剂 除特别说明外，所用试剂均为分析纯。 4.1 水 应符合GB/T6682中三级水要求。 4.2 碱式醋酸铅溶液 密度（1.24±0.01）g/mL，每100 mL含碱性铅盐（以PbO计）9.5 g～10.5 g。 4.3 稀碱式醋酸铅溶液 取碱式醋酸铅溶液45 mL，用新煮沸并冷却的蒸馏水稀释至1000 mL，避免与空气中二氧化碳接触。 4.4 铜试剂 称取硝酸铜（Cu(NO3)2·3H2O）10 g和醋酸钠（CH3COONa·3H2O）250 g，溶于蒸馏水定容至1000 mL，经0.45 μm滤膜过滤，并用冰醋酸调节pH至6.0。 4.5 醋酸钠溶液 称取醋酸钠（CH3COONa·3H2O）250 g溶于蒸馏水定容至1000 mL，经0.45 μm滤膜过滤，并用冰醋酸调节pH至6.0。 4.6 标准氨基氮溶液 准确称取L-谷氨酸2.7309 g，用蒸馏水溶解并定容至1000 mL，其α-氨基氮浓度为260 mg/L。 5 仪器 5.1 分光光度计 5.2 酸度计 5.3 分析天平：感量0.01 g 5.4 高速植物组织捣碎机 5.5 微孔滤膜过滤器：滤膜孔径0.45 μm，直径50 mm 5.6 容量瓶：100 mL、1000 mL（A类） 5.7 吸管：10 mL、20 mL、50 mL（A类） 5.8 烧杯：250 mL 6 样品制备 从制备好的甜菜糊样品中，称取（26.00±0.05）g样品于蜡光纸或聚乙烯薄膜中，在分析天平上称量后转入高速组织捣碎机，加入（177.0±0.35）mL碱式醋酸铅稀溶液，盖好后以12000 r/min～15000 r/min搅拌3 min（20℃条件下），过滤取清液备用。 7 测定 准确移取50 mL样品提取液于100 mL容量瓶中，用蒸馏水定容。再取25 mL该溶液于250 mL烧杯中备用。 同时配制标准氨基氮溶液梯度系列（0、5、10、20、30、40、50 mL），分别定容至100 mL容量瓶，对应α-氨基氮含量为0 mg/100 mL及不同浓度梯度，用于比色测定建立标准曲线。