ICS 67.080.10 分类号：X50 备案号：51146-2015 QB 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T 4854-2015 橙汁中总糖和果肉的稳定碳同位素比值（13C/12C）测定方法 稳定同位素比值质谱法 Determination of the carbon isotope ratio (13C/12C) of total sugar and pulp in orange juice - Method using isotope ratio mass spectrometry 2015-07-14发布 2016-01-01实施 中华人民共和国工业和信息化部发布 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国食品发酵标准化中心归口。本标准起草单位：中国食品发酵工业研究院、农夫山泉股份有限公司、康师傅中央研究所。本标准主要起草人：钟其顶、徐胜、章咨鹏、王道兵。本标准为首次制定。 1 范围 本标准规定了应用稳定同位素比值质谱法测定橙汁中总糖和果肉稳定碳同位素比值（13C/12C）的方法。本标准适用于橙汁及橙汁饮料中总糖和果肉的稳定碳同位素比值测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期版本适用；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用本文件。GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法。GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法。 3 符号和缩略语 13C/12C：稳定碳同位素比值，为13C与12C原子丰度之比。 δ13C：样品碳同位素比值相对于参考物质的千分差。 PDB：皮狄组白垩纪拟箭石化石，是国际碳同位素比值基准物质。 IRMS：稳定同位素比值质谱仪（Isotope Ratio Mass Spectrometry）。 4 原理 橙汁中的总糖或果肉在元素分析仪中燃烧生成二氧化碳气体，通过IRMS测定其二氧化碳中稳定碳同位素比值，再通过计算得到样品中13C含量。 5 试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水符合GB/T 6682-2008一级水要求。 5.1 氢氧化钙 5.2 0.1 mol/L 硫酸溶液 5.3 氧气（O2）：纯度≥99.99% 5.4 氦气（He）：纯度≥99.999% 5.5 丙酮 5.6 参考物质：国际原子能机构或国家标准物质管理委员会认可的同类标准物质。 6 仪器 元素分析仪 IRMS稳定同位素比值质谱仪（精度优于0.05‰，配连续流进样接口） 离心机（50 mL离心管） 磁力搅拌器 恒温水浴锅 pH计 分析天平（感量0.01 g） 电子天平（感量0.01 mg） 冷冻干燥机 锡舟 7 分析步骤 7.1 橙汁中总糖和果肉初分离 取30 mL样品于离心管中，在3500 r/min条件下离心10 min，分离上清液与沉淀，分别保存备用。 7.2 总糖纯化 将上清液加入1.4 g氢氧化钙，在90℃水浴中加热3 min，混合后离心，取上清液保存，于4℃静置15 h～24 h备用。 7.3 果肉纯化 7.3.1 去除残糖 用水复溶沉淀并搅拌均匀后离心，弃上清，重复3次。 7.3.2 去除脂质 用丙酮处理沉淀，搅拌后离心，弃上清液，挥干丙酮后保留沉淀。 7.4 冷冻干燥 将总糖上清液与果肉沉淀分别冷冻干燥，得到待测粉末样品。 7.5 测定 采用元素分析仪燃烧样品生成CO2，再通过IRMS测定其稳定碳同位素比值。