ICS 65.020 B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1858.5—2010 番茄主要病害抗病性鉴定技术规程 第5部分：番茄抗疮痴病鉴定技术规程 Rules for evaluation of tomato for resistance to diseases Part 5: Rule for evaluation of tomato for resistance to bacterial scab 2010-05-20 发布 2010-09-01 实施 中华人民共和国农业部发布 前言 NY/T 1858—2010《番茄主要病害抗病性鉴定技术规程》为系列标准，其分为8部分： 第1部分：番茄抗晚疫病鉴定技术规程； 第2部分：番茄抗叶霉病鉴定技术规程； 第3部分：番茄抗枯萎病鉴定技术规程； 第4部分：番茄抗青枯病鉴定技术规程； 第5部分：番茄抗疮痴病鉴定技术规程； 第6部分：番茄抗番茄花叶病毒病鉴定技术规程； 第7部分：番茄抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程； 第8部分：番茄抗南方根结线虫病鉴定技术规程。 本部分为 NY/T 1858—2010 的第5部分。本部分的附录A为资料性附录。 本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。 本部分起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所。 本部分主要起草人：谢内炎、冯兰香、杨宁红、杨举棠、龚惠芝。 1 范围 番茄主要病害抗病性鉴定技术规程第5部分：番茄抗疮痴病鉴定技术规程 本部分规定了番茄抗疮痴病鉴定的术语和定义、接种体制备、鉴定条件和试验设计、接种、病情调查、抗病性评价以及鉴定记录表格。 本部分适用于栽培番茄（Solanum lycopersicum L.）自交系、杂交种、群体、开放授粉品种以及野生茄和番茄近缘种对番茄疮痴病抗性的室内苗期鉴定和评价。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本部分。 2.1 番茄疮痴病 Tomato bacterial scab 由甘蓝黑腐黄单胞菌疮痴致病变种 [Xanthomonas campestris pv. vesicatoria (Doidgc) Dye] 引起。叶片产生近圆形、褐色坏死斑，病斑边缘具窄而褪绿缘的晕环。茎部形成暗褐色、不规则、稍隆起、疮痴状的病斑；青果易出现褐色、近圆形、木栓化的粗髓枯死斑，严重时，病斑相连为不规则形的大块疮痴。 2.2 病原分离物 pathogenic isolate 采用人工方法分离获得的病原物的纯培养物。 2.3 生理小种 physiological race 病原物种内或专化型内在形态上无差异，但在寄主植物的品种上具有显著致病性差异的类群。 2.4 鉴别寄主 differential host 用于鉴定和区分特定病原物的生理小种/致病型/株系的一套带有不同抗性基因的寄主品种、品系或材料。 2.5 致病性 pathogenicity 病原物所具有的破坏寄主植物和引起病变的能力。 2.6 培养基 medium 可以使病原物生长的、自然的或人工配制的基质。 2.7 接种体 inoculum 用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。 2.8 接种悬浮液 inoculum suspension 用于接种的含有定量接种物的液体。 2.9 人工接种 artificial inoculation 在适宜条件下，通过人工操作将接种体置于植物体的适当部位并使之发病的过程。 2.10 病情级别 disease rating scale 人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。 2.11 病害严重等级 disease severity rating (DSR) 通过对植株个体发病程度（病情级别）数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式。 2.12 抗病性 disease resistance 植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状。 2.13 抗病性鉴定 evaluation of disease resistance 通过适宜技术方法鉴定植物对特定病害的抵抗水平。 2.14 抗性评价 evaluation of resistance 根据采用的技术标准判别植物对特定病原反应程度和抵抗水平的描述。 3 接种体制备 3.1 病原物分离 用常规组织分离法，从番茄疮痴病的叶部病斑上分离病原物。分离物经培养性状、菌体形态特征及生理生化反应等鉴定，确认为甘蓝黑腐黄单胞菌疮痴致病变种后，再进行分离物纯化和致病性测定，并保藏备用。 3.2 生理小种鉴定 对用于抗病性鉴定接种的病原分离物进行生理小种鉴定。鉴定方法参照附录A的A.2。 3.3 接种体繁殖和保存 3.3.1 接种体繁殖 挑取一管保藏的疮痴病病菌，在 NA 培养基的平板上划线，置 30℃ 下培养 36h~48h，用灭菌蒸馏水配成细菌浓度约为 3×10^8 cfu/ml 的接种悬浮液。 NA 培养基的制备：牛肉浸膏 3g，蛋白胨 8g，蔗糖或葡萄糖 10g，酵母浸膏 1g，琼脂 17g~20g，加蒸馏水至 1000ml。先将琼脂加热熔化于大部分水中，再将其余各成分用少量水化开加入，调节 pH 至 7.0，分装，高压灭菌（121℃，20min）。 3.3.2 接种体保存 将 NA 培养基上的新鲜疮痴病菌转移到保存培养基斜面上，30℃ 下培养 48h 后，置 4℃ 下保存。 保存培养基的制备：酵母浸膏 10g，D-葡萄糖 20g，碳酸钙 20g，琼脂 12g，蒸馏水 1000mL。先将除碳酸钙外的其他成分加热溶解，然后加入碳酸钙，调 pH 至 7.2，分装和高压灭菌（121℃，20min）。 4 鉴定条件和试验设计 4.1 鉴定室 苗期抗病性鉴定的鉴定室能够人工调节室内温度、湿度和光照，使之具备良好的发病环境。 4.2 鉴定设计 鉴定材料随机排列或顺序排列，每份鉴定材料重复 3 次，每一重复 10 株苗。 4.3 鉴定对照材料 设“嘎春”或“Moneymaker”番茄为感病对照品种，“Hawaii 7998”番茄为抗病对照品种。 4.4 鉴定材料育苗 鉴定材料种子经 10% 次氯酸钠溶液浸种 10min，清水冲洗后置于恒温培养箱中 28℃ 催芽，播种于育苗筐内。育苗基质为草炭、蛭石和菜田土（2:1:1），经高温蒸汽灭菌（134℃，30min）。在日光温室中育苗，室内温度为 18℃~25℃。幼苗应生长健壮、整齐一致。 5 接种 5.1 接种时期 幼苗在 4～5 片真叶期进行接种。 5.2 接种方法 采用喷雾法接种，即用小型喷雾器将配制好的接种悬浮液均匀地喷雾到每一叶片的正反两面，以不形成水滴流下为度。 5.3 接种后的管理 接种后室内白天温度为 24℃~28℃，夜间为 20℃～24℃，最初 36h~48h 内的相对湿度为 100%，以后为 80%~95%，每天光照 12h~14h，强度为 35klx，正常栽培管理。 6 病情调查 6.1 病情级别划分 幼苗病情级别及其相对应的症状描述见表1。 表1 番茄疮痴病病情级别的划分 0：无症状 1：0 < 病斑面积占叶片面积 < 10% 2：10% ≤ 病斑面积占叶片面积 < 25% 3：25% ≤ 病斑面积占叶片面积 < 50% 4：50% ≤ 病斑面积占叶片面积 < 75% 5：75% ≤ 病斑面积占叶片面积 ≤ 100% 6.2 调查时间 接种后 8d~12d 进行。 6.3 病情记载 调查记载每一鉴定植株的病情级别，并计算病害严重等级。 病害严重等级按公式（1）计算： DSR = (Σ x_i n_i) / N (1) 式中： DSR —— 病害严重等级； x_i —— 各病情级别的代表数值； n_i —— 各病情级别的植株数； N —— 调查总植株数。