中华人民共和国水产行业标准

SC/T 7022—2020

对虾体内的病毒扩增和保存方法

In vivo proliferation and preservation method of viruses with penaeid shrimp

中华人民共和国农业部 发布

前 言

本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出。

本标准由全国水产标准化技术委员会（SAC/TC 156）归口。

本标准起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所。

本标准主要起草人：董宣、杨冰、黄健、邱亮、李晨、张庆利、梁艳。

对虾体内的病毒扩增和保存方法

1 范围

本标准给出了对虾体内的病毒扩增和保存的缩略语、试剂和材料、器材和设备，规定了对虾体内的病毒扩增和保存的操作步骤。

本标准适用于对虾体内的病毒扩增和保存。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

• GB/T 25878 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(HHPNV)检测 PCR法
• GB/T 28630.1 白斑综合征(WSD)诊断规程 第1部分：核酸探针斑点杂交检测法
• GB/T 28630.2 白斑综合征(WSD)诊断规程 第2部分：套式PCR检测法
• GB/T 28630.3 白斑综合征(WSD)诊断规程 第3部分：原位杂交检测法
• GB/T 28630.4 白斑综合征(WSD)诊断规程 第4部分：组织病理学诊断法
• GB/T 28630.5 白斑综合征(WSD)诊断规程 第5部分：新鲜组织的T-E染色法
• SC/T 7019—2018 水生动物病原微生物实验室保存规范
• 世界动物卫生组织(OIE)《水生动物疾病诊断手册》第二部分 甲壳动物疾病

3 缩略语

下列缩略语适用于本文件。

• NaN₃:叠氮化钠(sodium azide)
• SPF:无特定病原(specific pathogen free)
• TN:T-N缓冲液(Tris HCl and NaCl buffer)
• Tris:三羟甲基氨基甲烷(tris hydroxymethyl aminomethane)
• WSSV:白斑综合征病毒(white spot syndrome virus)

4 试剂和材料

4.1 除非另有说明，标准中使用的水为蒸馏水、去离子水或相当纯度的水。

4.2 T-N缓冲液：见附录A中的A.1。

5 器材和设备

• 5.1 匀浆器。
• 5.2 高速冷冻离心机。
• 5.3 超速冷冻离心机。
• 5.4 电子显微镜。

6 操作步骤

6.1 实验动物选择

• 6.1.1 选择养成期阶段的SPF凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)或其他品种SPF对虾，暂养7 d。
• 6.1.2 随机挑取对虾个体，按GB/T 28630.1、GB/T 28630.2、GB/T 28630.3、GB/T 28630.4、GB/T