GB/T 17999.4-2008SPF鸡　微生物学监测　第4部分：SPF鸡　血清平板凝集试验

中华人民共和国国家标准

GB/T 17999.4—2008

代替 GB/T 17999.3—1999

SPF鸡 微生物学监测
第4部分：SPF鸡血清平板凝集试验

SPF chicken—Microbiological surveillance—
Part 4: Serum plate agglutination test for SPF chicken

2008-12-31发布2009-05-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会 发布

前 言

GB/T 17999《SPF鸡 微生物学监测》分为10个部分：

• ——第1部分：SPF鸡 微生物学监测总则；
• ——第2部分：SPF鸡 红细胞凝集抑制试验；
• ——第3部分：SPF鸡 血清中和试验；
• ——第4部分：SPF鸡 血清平板凝集试验；
• ——第5部分：SPF鸡 琼脂扩散试验；
• ——第6部分：SPF鸡 酶联免疫吸附试验；
• ——第7部分：SPF鸡 胚敏感试验；
• ——第8部分：SPF鸡 鸡白痢沙门氏菌检验；
• ——第9部分：SPF鸡 试管凝集试验；
• ——第10部分：SPF鸡 间接免疫荧光试验。

本部分为GB/T 17999的第4部分。

本部分修订参照了NY/T 553—2002《禽支原体病诊断技术》和NY/T 538—2002《鸡伤寒和鸡白痢诊断技术》中的有关规定。

本部分代替GB/T 17999.3—1999《SPF鸡 血清平板凝集试验》。

本部分与GB/T 17999.3—1999相比主要变化如下：

• ——增加了生理盐水作为阴性对照。

本部分由中华人民共和国农业部提出。

本部分由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC 181)归口。

本部分起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法斯家禽有限公司。

本部分主要起草人：曲连东、姜骞、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、刘家森、司昌德、郭东春、于海波、孟庆文。

本部分所代替标准的历次版本发布情况为：

• ——GB/T 17999.3—1999。

SPF鸡 微生物学监测

第4部分：SPF鸡 血清平板凝集试验

1 范围

GB/T 17999的本部分规定了鸡血清平板凝集试验的技术要求。

本部分适用于对SPF鸡进行以下病原微生物的血清抗体检测：鸡白痢沙门氏菌（Salmonella pullorum）、鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum）、滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae）、副鸡嗜血杆菌（Haemophilus paragallinarum）。

2 原理

血清平板凝集试验是细菌性抗原与相应的抗体结合后，在适量的电解质参与下，经过一段时间出现肉眼可见的凝集现象，常采用已知的标准细菌性抗原检测相应的凝集抗体。

3 试剂和材料

3.1 试剂

3.1.1 凝集抗原。

3.1.2 阴性血清、阳性血清。

3.1.3 被检血清。

3.2 材料

玻璃板，移液器（TD 10 µL～200 µL）及吸头。

4 操作程序

4.1 使用前10 min～20 min自冰箱取出抗原、阴性标准血清、阳性标准血清及被检血清，使其达到室温。

4.2 用移液器吸取充分混匀的诊断抗原一滴（0.025 mL～0.05 mL），垂直滴于玻璃板上，然后迅速在抗原旁边滴加同量的被检血清一滴（0.025 mL～0.05 mL）。

4.3 用牙签使血清与抗原混合均匀，涂布成直径为1 cm～2 cm的片状，不断摇动玻璃板，2 min内观察结果。

4.4 试验应在20 ℃～25 ℃条件下进行。

4.5 每批试验应设阳性血清、阴性血清及生理盐水对照。

5 结果判定

在2 min内出现50%（++）以上凝集者为阳性。2 min内不凝集（-）者为阴性，介于上述两者之间为可疑，进行复核试验，如仍为可疑，判为阳性。凝集判读标准见表1。