ZB X 66040-1987还原糖测定法

中华人民共和国专业标准

还原糖测定法 ZB X 66040—87

Determination of reduced sugar

本方法适用于酿造酱油半成品的还原糖测定。

1 亚铁氰化钾快速法

1.1 试剂与溶液

1.1.1 费林氏甲液

称取分析纯硫酸铜(CuSO₄·5H₂O)15g及四甲基蓝(次甲基蓝)0.05g,用蒸馏水溶解,定容至1000mL。

1.1.2 费林氏乙液

称取分析纯酒石酸钾钠50g,分析纯氢氧化钠54g及分析纯亚铁氰化钾4g,用蒸馏水溶解,定容至1000mL。

1.1.3 0.1%葡萄糖标准溶液

精确称取在105℃烘2～3h至恒重的分析纯无水葡萄糖糖1.000g,放入100mL烧杯中,用蒸馏水溶解,定容至1000mL,为防染菌,可加5mL浓盐酸后再定容。

1.2 测定方法

1.2.1 样品处理及吸取

精确吸取样品10mL,用蒸馏水稀释定容至100mL,摇匀吸取稀释液1mL进行测定。稀释度及吸取量根据含糖量可予增减。

1.2.2 空白滴定

精确吸取费林甲、乙液各5mL,放入150mL锥形瓶中,加蒸馏水10mL。再用滴定管加入0.1%葡萄糖标准液9mL。摇匀在电炉(或煤气灯)上加热,使其在2min内沸腾,沸腾30s后,匀速滴入0.1%葡萄糖标准液至蓝色消失即为终点。记录沸腾前后共耗用葡萄糖液毫升数(A)。

1.2.3 预备滴定

精确吸取费林甲、乙液各5mL,放入150mL锥形瓶中,加蒸馏水10mL,再加1mL 10%样品稀释液。根据样品含糖量的高低(估计数),可用糖液滴定管先加入一定量的0.1%葡萄糖液(空白滴定耗用葡萄糖液一般在10mL以上),摇匀加热,沸腾30S后,匀速滴入0.1%葡萄糖液,至蓝色消失即为终点,记下沸腾前后共耗用0.1%葡萄糖标准液毫升数,作正式滴定时参考用。

1.2.4 正式滴定

精确吸取费林甲、乙液各5mL,放入150mL锥形瓶内,加蒸馏水10mL及1mL 10%样品稀释液,再用糖液滴定管加入比预备滴定耗用量少0.5mL左右的0.1%葡萄糖标准液,摇匀后加热,使其在1～2min内沸腾,沸腾30S后匀速滴入0.1%葡萄糖标准液至蓝色消失即为终点,记下沸腾前后共耗用0.1%葡萄糖标准液的毫升数(B)。

1.2 计算

还原糖,g(葡萄糖计)/100mL = (1)

式中:A——空白滴定耗用 0.1%葡萄糖标准液数,mL;

B——正式滴定耗用 0.1%葡萄糖标准液数, mL;

C——1mL0.1%葡萄糖标准液含葡菊量(即 0.001g);

W——吸取样液相当样品量,mL 或 g。

1.4 注意事项

1.4.1 每批试样测试前必须做空白滴定,二次平行测定误差不得超过 0.1mL。

1.4.2 空白滴定、预备滴定及正式滴定操作条件应保持一致。滴定速度应以每秒 1～2滴为宜。热源要稳定,在正式滴定时,待试样沸腾后,标准糖液的滴定量必须控制在 0.5～1mL之内,否则要重做。整个滴定过程必须始终保持沸腾状态。

1.4.3 凡样品含糖量在 6%以上时,应适当增加稀释倍数,否则会加大误差。

1.4.4 酿造酱油在制品常含有非糖还原物质,所以本法测定结果略为偏高。

2 兰 - 艾农 (Lan - Eynon)法

2.1 试剂与溶液

2.1.1 0.5%次甲基蓝

称取0.50g 次甲基蓝,溶于 100mL 蒸馏水中。

2.1.2 费林氏甲液

称取分析纯硫酸铜 (CuSO4 · 5H2O) 69.28g,加蒸馏水溶解定容至 1000mL。

2.1.3 费林氏乙液

称取分析纯酒石酸钾钠 346g及氢氧化钠 100g,加蒸馏水溶解定容至 1000mL。

标定:

称取于 105℃干燥 2～3h 恒重的分析纯葡萄糖 1.000g放入 100mL烧杯中,先以少量蒸馏水溶解后,移入 250mL容量瓶中,用蒸馏水洗净烧杯,洗液并入容量瓶中。待冷至 20℃时,稀释至刻度,摇匀后,将此液装入滴定管中进行滴定。

预备滴定:

吸取费林氏甲、乙液各 5mL 移入 150mL锥形瓶中,加入蒸馏水 30mL,摇匀、加热、待沸腾后,从滴定管迅速滴入上述葡萄糖液。滴定时,保持溶液微沸状态,待溶液变色时,加入次甲基蓝指示剂 2 滴,再继续滴入葡萄糖溶液,直至蓝色完全消失为终点。记下耗用葡萄糖溶液毫升数。

滴定:

吸取费林氏甲、乙液各 5mL移入 150mL 锥形瓶中,混匀,加入蒸馏水 30mL,然后加入比预备滴定少 1mL 的葡萄糖溶液,摇匀后,准确沸腾 2min,加入次甲基蓝指示剂 2 滴,再匀速滴入葡萄糖液,直至蓝色完全消失为终点,记下耗用葡萄糖溶液毫升数。

计算:

G = (2)

式中:G——10mL费林氏甲、乙液相当于葡萄糖数,g;

g——称取葡萄糖数,g;

V——滴定时耗用葡萄糖溶液数,mL;

250——葡萄糖液定容体积,mL。

2.2 操作方法

2.2.1 预备滴定：吸取费林氏甲、乙液各 5mL 移入 150mL 锥形瓶中,加入蒸馏水 30mL, 混匀,加热。待沸腾后,从滴定管迅速滴入 10%样品稀释液,滴定时,保持溶液微沸状态,待溶液变色时,加入次甲基蓝指示剂 2 滴,再继续滴入样品稀释液,直至蓝色完全消失为终点。记下耗用样品稀释液毫升数。

2.2.2 正式滴定：吸取费林氏甲、乙液各 5mL 移入 150mL 锥形瓶中,混匀,加入蒸馏水 30mL,然后加入比预备滴定少 1mL 的被测样品 (10%稀释液)摇匀后,准确沸腾 2min,加入次甲基蓝指示剂 2 滴,再迅速滴入 10%样品稀释液,滴至蓝色完全消失为终点。记下耗用稀释液毫升数。

做平行测定,二次相差不超过 0.1mL。

2.3 计算

还原糖 (以葡萄糖计，g/100mL 或 g) = \frac{G}{V \times 10\%} \times 100 \cdots\cdots(3)

式中: G——10mL 费林氏甲、乙液相当于葡萄糖数, g;

V——滴定费林氏溶液所耗用稀释液数, mL。

2.4 注意事项

与本法 1.4 相同。

附加说明：

本标准由商业部副食品局提出。

本标准由上海市酿造科学研究所起草。

本标准主要起草人须凤高。