农业部2031号公告-5-2013 转基因植物及其产品成分检测 耐旱玉米MON87460及其衍生品种定性PCR方法

中华人民共和国国家标准

农业部 2031 号公告—5—2013

转基因植物及其产品成分检测
耐旱玉米 MON87460 及其衍生品种
定性 PCR 方法

Detection of genetically modified plants and derived products—
Qualitative PCR method for drought-tolerant maize MON87460
and its derivates

2013-12-04 发布2013-12-04 实施

中华人民共和国农业部发布

前 言

本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由中华人民共和国农业部提出。

本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会(SAC/TC 276)归口。

本标准起草单位:农业部科技发展中心、吉林省农业科学院、中国农业科学院作物科学研究所。

本标准主要起草人:李飞武、赵欣、李葱葱、宋新元、宋贵文、翁建峰、张明、董立明、闫伟、邢珍娟、夏蔚、李新海。

转基因植物及其产品成分检测
耐旱玉米 MON87460 及其衍生品种定性 PCR 方法

1 范围

本标准规定了转基因耐旱玉米 MON87460 转化体特异性定性 PCR 检测方法。

本标准适用于转基因耐旱玉米 MON87460 及其衍生品种以及制品中 MON87460 转化体成分的定性 PCR 检测。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

zSSⅡb 基因 zSSⅡb gene

编码玉米淀粉合酶异构体 zSTSⅡ-2 的基因。

3.2

MON87460 转化体特异性序列 event-specific sequence of MON87460

外源插入片段 5'端与玉米基因组的连接区序列，包括玉米基因组的部分序列和外源插入片段 5'端的水稻肌动蛋白启动子序列。

4 原理

根据转基因耐旱玉米 MON87460 转化体特异性序列设计特异性引物，对试样进行 PCR 扩增。依据是否扩增获得预期的特异性 DNA 片段，判断样品中是否含有 MON87460 转化体成分。

5 试剂和材料

除非另有说明,仅使用分析纯试剂和重蒸馏水或符合 GB/T 6682 规定的一级水。

5.1 琼脂糖。

5.2 10 g/L 溴化乙锭溶液:

称取 1.0 g 溴化乙锭(EB),溶解于 100 mL 水中,避光保存。

警告——溴化乙锭有致癌作用，配制和使用时应戴一次性手套操作并妥善处理废液。

5.3 10 mol/L 氢氧化钠溶液:

在 160 mL 水中加入 80.0 g 氢氧化钠(NaOH),溶解后,冷却至室温,再加水定容到 200 mL。

5.4 500 mmol/L 乙二胺四乙酸二钠溶液(pH 8.0):

称取 18.6 g 乙二铵四乙酸二钠(EDTA-Na₂),加