SN/T 1358.2-2005马传染性贫血琼脂凝胶免疫扩散试验操作规程

SN

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1358.2—2005

马传染性贫血琼脂凝胶免疫
扩散试验操作规程

Protocol of agar gel immuno-diffusion test for equine infectious anaemia

中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局

前 言

本标准的附录 A 为规范性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准负责起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：杨元杰、朱来华、吴华、韩光来。

本标准是首次发布的出入境检验检疫行业标准。

马传染性贫血琼脂凝胶免疫
扩散试验操作规程

1 范围

本标准规定了马传染性贫血琼脂凝胶免疫扩散试验操作规程。

本标准适用于马传染性贫血抗体水平的检测和诊断。

2 缩略语

下列缩略语适用于本标准。

2.1 AGID Test：琼脂免疫扩散试验。

2.2 EIA：马传染性贫血。

3 原理

抗原和抗体的分子质量一般都在 $2 \times 10^5$ U以下，抗原及其特异性抗体在凝胶中从高浓度区域向低浓度区域扩散时所受阻力很小，基本上呈自由扩散形式。由于不同抗原分子质量、结构、形状和电荷量不同，因此其扩散系数不同，在凝胶中的扩散速度也不同。当抗原与相应抗体经扩散后在凝胶中相遇，形成抗原抗体复合物，若两者在相遇处比例适当，则形成最大复合物。由于复合物分子质量大，颗粒增大，因此不再继续扩散而产生沉淀，呈现出线状或带状，其形成的线状或带状的“特异性屏障”称为免疫沉淀线或免疫沉淀带，可根据抗原与阳性血清之间出现这种沉淀带，抗原与被检血清之间是否出现沉淀带来判定被检血清中是否存在抗体。

4 试剂和材料

4.1 EIA AGID 抗原：由指定单位提供。

4.2 标准阳性血清和标准阴性血清：由指定单位提供。

4.3 受检血清：按照常规方法采血分离血清。$4^\circ\text{C}$冷藏保存。

4.4 磷酸氢二钠($\text{Na}_2\text{HPO}_4 \cdot 12\text{H}_2\text{O}$)：分析纯。

4.5 磷酸二氢钾($\text{KH}_2\text{PO}_4$)：分析纯。

4.6 氯化钠(NaCl)：分析纯。

4.7 无离子水。

4.8 硫柳汞：分析纯。

4.9 琼脂粉：分析纯。

5 器械和设备

5.1 培养箱。

5.2 平皿：规格 $90\text{ mm} \times 15\text{ mm}$，洁净灭菌。

5.3 外径 $5.3\text{ mm}$ 打孔器(或薄壁型金属管)。

5.4 坐标纸。