SC/T 7216-2022鱼类病毒性神经坏死病诊断方法

鱼类病毒性神经坏死病诊断方法

Diagnostic methods for viral nervous necrosis of fish

前言

本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件代替SC/T 7216—2012《鱼类病毒性神经坏死病(VNN)诊断技术规程》，与SC/T 7216—2012相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：

• 增加了“术语和定义”一章（见第3章）；
• 增加了“临床症状”一章，描述了鱼类病毒性神经坏死病的典型症状（见第7章）；
• 增加了“采样”一章，规范了采样对象、采样数量和采样部位（见第8章）；
• 简化了对病理检查方法的描述（见第9章，2012年版的第6章）；
• 增加了一种病毒分离用的GF-1细胞系（见10.2），增加了病毒分离结果的判定方法（见10.3）；
• 删除了“免疫荧光”（见2012年版的8.1）、“免疫组织化学”（见2012年版的8.2）、“RT-PCR方法”（见2012年版的8.3）；
• 增加了“套式RT-PCR检测”一章（见第11章）；
• 将“实时荧光RT-PCR方法”更改为“RT-qPCR检测”，提供了新的引物、探针、反应体系和反应程序，修改了结果判定方法（见第12章，2012年版的8.4）；
• 将“结果综合判定”更改为“综合判定”，更改了疑似病例、确诊病例的判定方法，增加了病毒携带者的判定方法（见第13章，2012年版的第9章）；
• 删除了“病毒性神经坏死病临床症状和病理变化”（见2012年版的附录B），增加了“鱼类病毒性神经坏死病(VNN)”（见附录B）；
• 增加了鱼类病毒性神经坏死病组织病理特征示例（见附录C）；
• 增加了鱼类神经坏死病毒扩增产物的参考序列（见附录D）。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由农业农村部渔业渔政管理局提出。

本文件由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC 156)归口。

本文件起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、全国水产技术推广总站、福建省淡水水产研究所、福建省水产技术推广总站。

本文件主要起草人：史成银、万晓媛、樊海平、于秀娟、梁艳、吴斌、杨冰、刘莉、李清、林楠、李苗苗、张惠芬、王仁宝、于子健。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：

——2012年首次发布为SC/T 7216—2012；

——本次为第一次修订。

鱼类病毒性神经坏死病诊断方法

1 范围

本文件界定了鱼类病毒性神经坏死病(viral nervous necrosis, VNN)诊断的术语和定义，给出了缩略语、试剂和材料、仪器和设备，描述了临床症状，规定了采样要求，以及组织病理检查、病毒分离、套式 RT-PCR 检测、RT-qPCR 检测和综合判定的方法。

本文件适用于鱼类病毒性神经坏死病的流行病学调查、诊断、检疫和监测。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

SC/T 7011.1 水生动物疾病术语与命名规则 第1部分：水生动物疾病术语

SC/T 7011.2 水生动物疾病术语与命名规则 第2部分：水生动物疾病命名规则

SC/T 7103 水生动物产地检疫采样技术规范

3 术语和定义

SC/T 7011.1 和 SC/T 7011.2 界定的术语和定义适用于本文件。

4 缩略语

下列缩略语适用于本文件。

AMV:禽成髓细胞瘤病毒(avian myeloblastosis virus)

BFN NV:条纹星鲽神经坏死病毒(halibut flounder nervous necrosis virus)

BHQ1:淬灭剂(black hole quencher 1)

CPE:细胞病变效应(cytopathic effect)

Cq:定量循环(quantification cycle)

cDNA:互补 DNA(complementary DNA)

DEPC:焦碳酸二乙酯(diethyl pyrocarbonate)

DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid)

dNTPs:脱氧核糖核苷三磷酸混合物(deoxy-ribonucleoside triphosphate mixture)

EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid)

E-11:从纹鳃鲻细胞系-1(SSN-1)中克隆得到的 E 11 细胞系(E 11 cell line)

FAM:羧基荧光素(carboxyfluorescein)

GF-1:石斑鱼鳍细胞系(grouper fin cell line, GF-1)

NNV:神经坏死病毒(nervous necrosis virus)

PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)

qPCR:实时荧光 PCR(quantitative real-time PCR)

RGN NV:赤点石斑鱼神经坏死病毒(red spotted grouper nervous necrosis virus)

RNA:核糖核酸(ribonucleic acid)

RT-PCR:逆转录 PCR(reverse transcription PCR)

RT-qPCR:实时荧光 RT-PCR(reverse transcription quantitative real-time PCR)

SJNVN:黄带拟鲹神经坏死病毒(striped jack nervous necrosis virus)