中华人民共和国水产行业标准

SC/T 3060—2023

鳕鱼品种的鉴定　实时荧光PCR法

Identification of cod fish species—Real-time PCR method

中华人民共和国农业农村部   发 布

前 言

本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由农业农村部渔业渔政管理局提出。

本文件由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会(SAC/TC 156/SC 3)归口。

本文件起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、日照健安检测技术服务有限公司、荣成泰祥食品股份有限公司、山东时进检测服务有限公司。

本文件主要起草人：姚琳、王联珠、曲梦、江艳华、郭莹莹、朱文嘉、柳淑芳、谭志军、张廷翠、杨青、李娜、蒋昕、毕迎斌。

鳕鱼品种的鉴定 实时荧光 PCR 法

1 范围

本文件描述了以实时荧光PCR法测定鳕鱼源性成分的原理、仪器设备、试剂和材料、样品制备、DNA提取、DNA纯度和浓度测定、测定方法、结果判定与表达、防污染措施。

本文件适用于鳕鱼及易混鱼产品的定性检测。包括太平洋鳕鱼(Gadus macrocephalus)、大西洋鳕鱼(Gadus morhua)、黑线鳕(Melanogrammus aeglefinus)、绿青鳕(Pollachius virens)、蓝鳕(Micromesistius poutassou)、细鳞壮鳕(Albatrossia pectoralis)、狭鳕(Theragra chalcogramma)、阿根廷无须鳕(Merluccius hubbsi)等鳕鱼,以及棘鳞蛇鲭(Ruvettus pretiosus)、异鳞蛇鲭(Lepidocybium flavobrunneum)、小鳞南极犬牙鱼(Dissostichus eleginoides)、费氏南极犬牙鱼(Dissostichus mawsoni)、裸盖鱼(Anoplopoma fimbria)等鳕鱼易混品种。本文件不适用于混合样品。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

GB/T 19495.4 转基因产品检测 实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法

GB/T 27403 实验室质量控制规范 食品分子生物学检测

3 术语和定义

GB/T 19495.4界定的术语和定义适用于本文件。

4 缩略语

下列缩略语适用于本文件。

• BSA:牛血清蛋白(bull serum albumin)
• CO I :细胞色素氧化酶Ⅰ亚基(cytochrome oxidase subunit 1 )
• CTAB:十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide)
• Ct:循环阈值(cycle threshold)
• Cyt b:细胞色素b(cytochrome b)
• DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid)
• DNase:脱氧核糖核酸酶(deoxyribonuclease)
• dATP:脱氧腺苷三磷酸(deoxyadenosine triphosphate)
• dCTP:脱氧胞苷三磷酸(deoxycytidine triphosphate)
• dGTP:脱氧鸟苷三磷酸(deoxyguanosine triphosphate)
• dNTP:脱氧核苷酸三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate)
• dTTP:脱氧胸苷三磷酸(deoxythymidine triphosphate)
• EDTA:乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid)
• FAM:羧基荧光素(carboxy fluorescein)
• IU:酶活性国际单位(international unit)
• MGB:小沟结合物(minor groove binder)
• PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)