本标准规定了鲜乳中抗生素残留量的检验方法。本标准适用于能杀灭嗜热乳酸链球菌的各种常用抗生素的检验。 GB/T 4789.27-2003 食品卫生微生物学检验 鲜乳中抗生素残留量检验 GB/T4789.27-2003 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS07.100.30
中华人民共和国国家标准
GB/T4789.27—2003
代替GB/T4789.27-1994
食品卫生微生物学检验
鲜乳中抗生素残留量检验
Microbiological examination of food hygiene-Examination of residue of antibiotics in fresh milk2003-08-11发布
2004-01-01实施
中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员会
GB/T4789.27-—2003
本标准对GB/T4789.27~—1994《食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留量检验》进行修订。本标准与GB/T4789.27—1994相比主要修改如下：按照GB/T1.1—2000对标准文本的格式和文字进行修改。一修改并规范原标准中的“设备和材料”。本标准自实施之日起，GB/T4789.27—1994同时废止。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。本标准主要起草人：付萍、计融、姚景会、杨宝兰。本标准于1984年首次发布，1994年第一次修订，本次为第二次修订。188
1范围
食品卫生微生物学检验
GB/T4789.27—2003
鲜乳中抗生素残留量检验
本标准规定了鲜乳中抗生素残留量的检验方法。本标准适用于能杀灭嗜热乳酸链球菌的各种常用抗生素的检验。2
设备和材料
2.1冰箱：4℃~-20℃。
2.2恒温培养箱：36℃士1℃。
2.3恒温水浴锅：36℃土1℃、79℃1℃。托盘扭力天平：0g~100g，精度至0.01g。2.4
2.5灭菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）10mL（具0.1mL刻度）。2.6灭菌试管：16mm×160mm。
100℃温度计。
2.8蜡笔。
3菌种、培养基和试剂
3.1菌种：嗜热乳酸链球菌。
3.2脱脂乳：经113℃灭菌20min。3.34%2，35-氯化三苯四氮唑（TTC）水溶液：称取1gTTC，溶于5mL灭菌蒸馏水中，装褐色瓶内于7℃冰箱保存，临用时用灭菌蒸馏水稀释至五倍。如遇溶液变为玉色或淡褐色，则不能再用。4检验程序
鲜乳中抗生素残留检验程序见图1。检样
80，加热5min
冷却37℃以下
加菌液，36±1℃水浴2h
加TTC指示剂，36±1C水浴30mim不显色
显色者
抗生素阴性
36±1℃水浴30min
不显色者wwW.bzxz.Net
抗生素阳性
抗生素阴性
GB/T4789.27—2003
5操作步骤
5.1菌液制备：将菌种移种脱脂乳，经36℃士1℃培养15h后，以灭菌脱脂乳1：1稀释待用。5.2取检样9mL，置16mm×160mm试管内，80℃水浴加热5min冷却37℃以下，加菌液1mL，36℃士1℃水浴培养2h，加TTC0.3mL，36℃士1℃水浴培养30min，观察如为阳性，再于水浴中培养30min作第二次观察，每份检样作两份，另外再作阴性和阳性对照各一份，阳性对照管用无抗生素的乳8mL加抗生素及菌液和TTC。阴性对照管用无抗生素乳9mL加菌液和TTC。5.3判断方法：准确培养30min观察结果，如为阳性，再继续培养30min作第二次观察。观察时要迅速，避免光照过久发生干扰。乳中有抗生素存在，则检样中虽加菌液培养物，但因细菌的繁殖受到抑制，因此指示剂TTC不还原，不显色。与此相反，如果没有抗生素存在，则加入菌液即行增殖，TTC被还原而显红色，也就是说检样呈乳的原色时为阳性，呈红色为阴性。具体内容见表1和表2。表1显色状态判断标准
显色状态
未显色者
微红色者
桃红色一红色
抗生素名称
青酶索素
庆大霉素
卡那莓索
表2检测各种抗生素的灵敏度
最低检出量
0.004单位
0.5单位
0.4单位
5单位
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