本标准规定了食品中蛋白质的测定方法。本标准适用于食品中蛋白质的测定。本标准不适用于添加无机含氮物质、有机非蛋白质含氮物质的食品测定。本标准第二法检出限为0．070μg/mL；线性范围为0～10．0μg/mL。 GB/T 5009.5-2003 食品中蛋白质的测定 GB/T5009.5-2003 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS 67.040
中华人民共利国国家标准
GB/T5009.5—2003
我誉GB/5009.5--1985
食品中蛋自质的测定
Determination of protein in foods2003-08-11发布
中华人民共和国卫生部
国国家标准化管理委员会
2004-01-01实施
GB/I5009.5—2203
本标准代替心TT30G9.5—14358食品中金H质的换定片运。本标推与GB/TE0G9.51935相比主要修改如下：悠改了标准的中文名殊，起准中文名称改为食品步白质的测；教思GB：工21.41标准端写规则、第4部价：化学断左法对永标准的结均进行落改.
营打门比急伙作为等二法。
本弥生中华人民共和国上生部提出并归：本标准第一法卫生部食品工生盛楚检验所负起草第“法由河北省唐川市卫生矿安站负击，
本标推年一法上要足享人：张文德、信荣，户摘、离总、刻志步.本标准十195年首政没布，本次为第次沈修订3
1范围
食品中蛋自质的测定
本标观定了食品中蛋自质的认定方法。本标准治用干食品中蛋气危的测定。本标准不造用于需加无机含氢物钙有划非蛋与含氨物随的食品划定。本示证第法检自限为).n7<%/mL线性池国火t~.0.0g/ml第一法
2晾理
GB/T5009.5—2033
蛋已质足含低的有机化合物。食拍与硫酸和流酸饲，随酸钟·可加热消化，使蛋质分密，分解的氢与硫酸统合年成流配要：后化使氢渐离.用明酸吸收后以就殿或盐酸标准滴定路激液定，根据酸的泥量乘以换效系效，为蛋白质的合激。3试剂
确够调(CuSO-H:O)
3.2疏酸铆：
硫酸密度为1.115/1，
3.4增性率液(29 g/1.)。
3.5氢瓶化钢落酸4001）
3.G硫酸标准滴定筛微（1/2H.S),>C.U50)0mo1/.点盐酸标焦声定率（HC.）=0.056 0 mal/L-
3.7混合指示液：1中芯7.标穿策（1L）与5份流中酚绎乙醇抢策(18/T.>临用时混合。-E川用3份甲基纪乙醇溶涨(1/L)与【份业甲基蓝乙醇液(%/L)临用日合。仪器
定烈热范转胃，如图1所示。
FA/T5009.5—2003
水气发生器[乎炼报
小斗及状死！
反应率
反应至外层：
-禁质管收测案文！
&—传鼠管：
“一蒸增液接收册。
5分析步露
围 1 定氨氢蒸竭装置
试样处理：称取~2.置伴试或2.0-.00半休试样或收5.
10.10m).~25.00mL体式（约明当氮30mg~-40mR）.格人下燥的100ml.或590ml定氮版中加人3.2多丽酸钢，6g硫酸改20mI.硫醛，销录后于瓶几放一小端斗，为瓶以4角斜支于有小孔的石棉网上，小心加热，小内客物全部炭化：沁沐完全停止后.如驱火力.升保持瓶内满体做沸，至没体呈蓝续色准消透明后，再继续划热3.5h-~！。取下效冷，小心归20πL水：放冷后，移人139m.穿基施中，并用少封水洗定需海、流液并人容量需中，冉址水全刺理，约备用，同时做试剂空口试验5.2测定：校1满好定氮装些，水然气发牛版内装水节三分之二处，加人数炕拨销殊，甲辈红指示液数滴及数童升流酸，以深封水至酸性，升调压器抢制，加势凉带水蒸气发生瓶内的水，5.3向落收瓶内如人Dm.7.频酸缩滤(g/1)及1滴~2避据合指示敢，并使冷避管的下减人滚西下，业确吸取10rl.诚处理被由小满斗灌人反虚室，并以1CJ.水洗涤小绕补生谢人及应室内，样状玻塞塞紧。将10nl。真氧化穿整（4CC/1.倒人小戒杯，缇起.限穿便其爆缓流人反定实.立即将践塞盖紧，并加水于小坡杯以防阴气。或紧感晓灾，无年幕箱。薰说5mim，格动接收瓶，液面离开冷凝管下端，再衰恼1m，然后用步量求迎洗险香下端外部，取下变收瓶。以硫酸变垫破标弹流定溶液(0>满定然色或蓝案色为察点，同例准确吸取0m1.试剂实消化教接.3换作。6结果计算此内容来自标准下载网
式详中蛋自质的含量按式1进行计算，x = -x0. 014 x x icc
!X10/U
武市：
CB/T5009.5—2003
X——试岸中蛋白质的含虽，单位为范每古克或克年百新开（/10ug或/1LIV，一试样消耗硫酸或盐标准滴定液的体积，单价为意升（mT.）：：试剂空户消耗硫酸或盐腰标注滴定液的体积.单位步升(ml.)！随腺或酸标准范定落液浓度.单症对率尔每升（/L）；0.U14-—1.UmL硫酸e(1/2H,SC))=1,UU3mo./L)或盐照te(JICI>-1.(0mal/LJ标净满定率液树当的焱的质量，单位海克（）试样的质查或体权单位为克或<或互IF——氮较算为否口所的系数食物，26，乳制品为6.38；粉为5.70；下米，高单为6.24生为5.46:.米为5.3>1大豆及其制品为5.71;肉与肉制品5.2>:走，小米,在、燥为5.831芝麻，问口类为5,50计算结果保单一位有效数宁，
7精密度
企年宽能承件下获得范两款独文实定结果的对差值不得随过菜术平均值的1务。第二法
8原理
口质尽含氮的有机化合物。食品与疏限率催化剂一间鸡消化，使董白质分解，分解的氢与碗酸结合生成础酸铵。然后在pI4.8的乙酸钠乙曾策阵落装中，蚀与乙酰内酮机甲降反应尘成黄色的%，：乙酰-2.5-二甲基1.4-一氢化吡化合物，在波长4Wnm必通定吸光度，与标准系列比较定草，结果弹以换系教，即为金白质含量9试剂
9. 1硫酸试。
9.2硫酸钾.
9.3预。
9.4氧化钩溶微<300z/1称取%心g载氧化钠加水落解后，放冷并择释至10CmlL.。9.5对硝基苯酚措示剂落浓（/1.：移取1.1g时硝基苯险指示剂游于2Um95乐乙醇中：加水称释至100mrL
9.6Z酸游滴（10l/L.收5.BmL冰乙酸，加水稀释至100ml9.7乙酸钠罐<1mol/L)：称取I无术晚销或g.酸钠(CHCJONa·3HO).水密解后井蒂释至。
9.日乙酸钠-乙酸缓冲游策，量取c)mJ.之酸纳落技（1ml/1)与1ml.乙酸落孩(1l/1混合，谈率为48.
9显乐齐1537%显能与%流酮退水样率101m熟然报摄福室放置稳实三甘）：
9.10氧氮标非情备探液（1.0g/1.)精密弥取t0%:-探21的统酸缺0.172，加水溶解后移人13m.穿盘液中，井烯呼至刻度，流此牌液每惠升相尚于1.0mg1-N(0%下冰内储存稳定以上。
9.11然标准使用被（L.1g/).)：氏改浓管精密顺取luml氮氢标危破备（1,0mg：mL于)m容基瓶.水种郊至刻度，馄，此箱镀寒升和当于10NH-N（1AT:下冰箱内比行39
GR/T 5C03.5—2003
宝！个月，
10快器
10.1分光北度计，
0.2热博强小浴钢<100=1.3r
10.310mL具塞歧璃比色管，
11分析步累
11.1试样消解
精整弥取经份降泥寸过10筛的图体试伴（1g~.5或半固体试槛0,2A~1,0%变股圾液述试样1tr:L-L.移十操的1CCmJ.或25ml.定氛瓶牛，加1k流酸谢，1统酸及mL统醛，摇勾后加口放心漏斗，将旅以4角斜支于有礼的常网上，小心划格，得内穿物全部炭化，池沫完全产1石，加驱火力，并保特帆内液怀流，乡来体益绿色途情遇明下，可继练加热C.，表下放冷，小心m）水，效冷后移人5或13ml窖量我中，并用少盘小选配瓶，选绒产人容量%中，再加水至度，混到备间。取与处理试样柜的链酸锯.统敏钾，请的按间·方达做或利空气试验。
11.2试样商商的制备
情密及取=ml.~5ml.试栏或试剂空白消化液于53mL~[CCmL溶量瓶内，加.1常~*滴对消基爵挡示剂落被<1*/）担勾润氧化钢溶液（300/E.)户和牟苗色，并牌乙移（1m，L)至挖液无色，用水蔡至刻度.混分。
11.3标准曲线的绘制
密收收0.0.05.0.1.C.2,0.,n,0,,1,3ml.氧氮标准使用籍效（相与于NH,-VU,5.0,10.C,27.C，40.060.（.8C.0.二00.0g分别置了1CmL比咨中，加4mL乙酸钠-乙酸规冲溶（pF4）及4m.品色剂，加水帮辉单刻店混，置于100水浴中加热15mm，联出用水冷至室祖后.移人1\比色川内，以零管为要比，于波长40Cm处测量吸光度、料录标推各点吸光度验制标难出线成计算直载回闪方程。
11.4试样测定
精声吸取0.5m--2.\mt.约当了氛小F100m>成样游液和尚年的试剂室白浮减，分别-m比中.以下按11.自*加4乙酸钠-乙融摄酸溶液（>1.x及.是色剂..\起依法操作。让样吸光与标他曲线比较定量或代人标准回归方转求出含整，12计算结果
试择中策户的合站按式（2)进行原，x=.
1 1n0 ×1 000
诚1内含量，单位为克每充成克每百盘或门0：样测定极中氧的命毕，单位为就克（）！试剂空户测定液中熟的合歇，单位为微克收W
瓦样消化极定容体，单位为毫（mI））V：别备试样资液的消化液本积,单位为密(ml.成样视夜总体机单代为老升mI)
移—规定用试群液承单为毫升(1nl.)：成样压正或体机，单位为克或率升（6或mF氮换带为蛋白质的系数
R/T 5009.5—20C3
蛋白质定的氯含量一股为15%~17.6%，接16长计算乘以6.25即为强白质，制品为6.33.而势为5.70玉米商辑类6.24，花生为.46，本为5.大豆及其削品为5.7-肉与肉制品为5.23.人麦小米燕支，谜友为芝底，间类为5.0，精密康
在其复性柔件下获得的两次活立钙定智果的艳划差值不将植则算术平均使的片1
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