本标准规定了食品中抗坏血酸的分光光度法。本标准适用于各类食品中还原型抗坏血酸的测定。本标准不适用于脱氢型抗坏血酸的测定。 GB/T 5009.159-2003 食品中还原型抗坏血酸的测定 GB/T5009.159-2003 标准下载解压密码：www.bzxz.net

TCS 67. G40
中华人民共和国国家标准
GB/T 5009.159-2003
食品中还原型抗坏血酸的测定
Determinalion nf reductive-form nscorblc acid in foods2003-08-11发布
中华人民共和国卫生部
中国国家标雅化管理委建会
2004-01-01实施
本标维附录A是资料性附录
GD/T 5009.159--2003
本标准虫中华人民共和国卫生部树出并归口本标准鱼责起草单位：河北省山市卫生防疫站，参圳起草单位：河北省卫尘朗接站，天津市食品卫生监检验所.古林消以兰防疫站。本标准上要起草人。张文博、李信柴、韩会新，下荫国，青。329
GB/T 5009.159—2003
现行国家标准CB/T12S92—19904蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定方法（荧光法和2,-二硝基苹法）测定的尽氧化脱氢趣抗坏血酸，不催测定其土要减分还尿型抗坏血酸，而且局限干果范类试群，操作非常第项，对营非激化食品，盘白食品等试样的测定更不适应。为此研制了测定食日中抗坏血酸的标检验方法。该法具有灵敏度高，确度好.操作简便，快速，应用范国广等特点：适用于各类食品中批环血酸的定
食品中还原型抗坏血酸的测定
本标亚题定了食缺中抗坏血酸的分光度法，本标准适开乎务类食品中还质型航环血酸的测定，本标准不适用于脱望型抗坏血避的测定，2原理
GB/F5009.159—2603
在乙酸溶中，抗外函酸与固离软B反应生成费色的草曲-2-经基丁酰内酮行生物。在量人慢收被长42U21m1处测定吸光度.与标准系列比较定：3试刻
3.T乙触溶液(2mol/)，吸敢11.6arJ.冰乙酸，加水解释至100mL。3.2乙酸落减（0.5mul/1.），吸取2.9nl.涨乙酸，面水稀群英20mL3.3乙二胶乙毅.二钠抢满（0.25mt/L）称浪9.3号乙胺州乙酸二钠CmHN，QN，21l：下水中，热使之游解后，故冷.烯10。3.4强白流淀剂
3.4.1乙游液（20g/1）：称取22.0g乙胶锌[Z（CHCOO)，·2HO]，加3mL冰乙酸箱于水，并稀程至100mL
3.4.2亚化例溶衰（106g/L)：称取10.亚铁氰化抑[K,Fe(CN>，-3H02,加水客解至m
3.5显色剂图薄整B(FaxBueSatB)帝微<2g/L)准确你取0.2g固监盐.加水溶解于10m惊色窄考瓶中，并带继至刻度（该溶滴在家温下忙存可独定8d以上)，3.抗血触标准幅备落减（(2.0/L)指密称取0,200g抗坏盘酸，20m之落薇（2m0l/L）游解后转人1>0m标色容量瓶中，用水所释至刻度，游勾。此溶液每毫升相当于2.0g抗坏血（℃下述箱内肥存在2d内程定）。3.7抗血模标煤使用滚液（C.19/L).用张池管精密吸取5.0n.坏金酸标准错备落流(2./L于CCmL标色容器扇内、nl.乙酸溶液（2mal/L、用水稀释至度.觀匀此潜液每爽升相当于g抗坏血翻临用时配制？。
4.1分光光度计。bzxZ.net
4.2势碎机。
4.3离心沉淀机。
4.410m兵滨璃比色管：
E分析步骤
5.1试样审随的制备
5.1.1谢质白性良站
5,1.1.1液体试样，坏血毁含量在0.2/，以下试样，解匀始可直接取样测定：抗环血践舍量在33
GD/T5009,159—2003
u,2≤/工以上的试样,用水近量择后测定，5.1.1.2水溶性固体试，准确称取1.0~5.个.精确至0.001g（含1).2g/kg以下抗坏血酸)放人乳体中，加5mL乙敢落谦（2mol/L)研辨落解后，移人100ml.棕色穿盘瓶内，加水稀解至刻度、5.1.1.3范菜.水巢：称取样叮食部分20.0g-50.0于碎机内，加回倍量的乙酸溶（2川m1/1.）揭成匀浆。称取100~20.0&蒙【含0.2g/kg以下抗坏血醛）100mL惊色容量瓶内，加5ml乙酸咨演（2mol/.），用术帮牵刺度，混勾。蹭纸过滤，谐液备用，不易过势的试样可用离心机离心后：上清液供定。
5.1.2蛋凸性食品（奶粉，H粉.恢料、竭化食品等）.周体试样混勺后精密称取5.0~10.0g精确至0.C:范体试详用移液管精案吸取5.0L10.0L于)mL棕色容良瓶内。加10mL乙酸落没（2m0l/L）乙酸锌路辩（22U&/L)和业铁期化钾溶液（106R/L）各7.5ml加水举刻度.混匀，将全部筛离移入离心管内，以3c0t/min离心10min，上清供测定。时取处遇试并相同量的乙酸落液、乙酸锌溶液和亚铁氰化评落液，按同一方法做试剂空白试验。5.2标准曲战的照制
精密吸取C.5.1.0,2,0,4.0.5,0.8,1.0,1.5,2.01ml.抗坏血胶标准使用箱较（相当于抗坏血吸0：10.U,20,J,40,U,60,0.$0,0,100,0.150,0.200.Cg).分别置于10m比色营中，各加0.3mLZ二胺四乙酸二钠降微（0.25m.ol/L)0.5mL乙溶液（n,5mnl/T.)、1.25ml.固蓝盘R落减（2g/J.），加水稀样至划度，混勺）。宝祖（2U%~25℃:）下改留20min后，存人1cm比色血内，以季为参比，于波长420nm处盘收光度，以标游各点吸光度绘精标准曲线。5.3试样测定
5.3.1非蛋白性试样的谢定：精率驶收按5.1.I制备的成样率液0.5mL～5.CmL（约相当于抗坏血敢2(0陷以下）丁m比色内，以下披5.只自加3mL乙二胺西乙磁二钠液(0.25mol/)“.\起依法操作。试择吸光度从标难曲线上查凹护坏而酸含量，5.3.2、蛋白性试样的震笼：精蜜吸取接5.1.2制备的试+游液（约相当于抗环血醛200%以下)和等量试剂空白溶(0.5mL~～5.(mL).各于lUmL比色管内。各加1,5mL乙二胺函Z酸二钠链（0.25mol/L）、1.0拉L乙酸腋（0.5ml/L）、1.25mL固整盐B格减<2g/1.),加水释至刻度，混勾，室祖<20℃~25.）下效置31rmil后：移人1cm比血内，以试剂空白替为参比，于波长42Unm处测量吸光虚，试样吸光速成标难曲线上查出抗坏血晚含量。6结果计算
按下式计算。
戎中：
X——试样中抗坏血酸的告氧，单位为克每百克（旁克每百毫外mg/10og（mg/lOmLc试样测定液中抗坏血的含盘,单位为微克(g)——试样质量(体租)单位为克（毫升(rL）：V试样处圳滋总体积，单位为壶升（);V：测定时所取榕液体积，单位为癌升(mJ），7密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对荒值不将超过算术平均值的10%。332
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