GB/T 17999.3-1999SPF鸡 血清平板凝集试验

GB/T 17999. 3 -- 1999
本标准参照农业部1992年版《鸡白-鸡伤寒沙门氏菌多价染色平板凝集抗原与阴、阳性血清制备及检验规程》编制而成。
SPF鸡微生物学质量控制国家系列标准，包括SPF鸡微生物学监测总则和9种SPF鸡微生物学检测方法。本标准为《SPF鸡血清平板凝集试验》。SPF鸡微生物学检测方法还包括以下部分：GB/T17999.1--1999
GB/T17999.2-1999
GB/T 17999.4—1999
GB/T 17999. ---1999
GB/T 17999.6—1999
GB/T 17999. 7--1999
GB/T 17999.8—1999
GB/T 17999. 9--1999
红细胞凝集抑制试验；
SPF鸡
SPF鸡
SPF鸡
SPF鸡
SPF鸡
SPF鸡
血清中和试验；
琼脂扩散试验；
酶联免疫吸附试验；
胚敏感试验；
鸡白沙门氏菌检验；
试管凝集试验；
SPF鸡
SPF鸡间接免疫荧光试验。
本标准由中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出。本标准由农业部畜牧兽医司归口。本标准起草单位：中国兽药监察所、农业部实验动物研究中心。本标准主要起草人：张学琴、陈德威、赵立红。74
1范围
中华人民共和国国家标准
SPF鸡
血清平板凝集试验
SpF chicken---Serum plate agglutination testGB/T 17999.3--1999
本标准规定了鸡血清平板凝集试验所用试剂、材料，操作程序及结果判定等本标准适用JSPF鸡感染以下病原菌后的凝集抗体的监测：鸡白沙门氏菌（Salmonella pullo-rum），鸡毒支原体（Mycoplasmugallisepticum）、滑液囊支原体（Mycoplasmasynoviae）、副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum)。2原理
血清平板凝集试验是细菌性抗原与相应的抗体结合后，在适量的电解质参与下，经过一段时间出现肉眼可见的凝集现象。常采用已知的标准细菌性抗原液检测相应的凝集抗体。3试剂和材料
3.1试剂
3.1.1凝集抗原。
3.1.2阴性、性血清。
3.1.3被检血清。
3.2材料
3.2.1玻璃板。
3.2.2移液器（TD10μL200μl)及吸头。4揉作程序
4.1使用前10min~20min自冰箱取出抗原、阴性或阳性血清与被检血清，使其达到室温。4.2用移液器取充分混匀的诊断抗原一滴（0.025ml.～0.05ml.），垂直滴于玻璃板上，然后迅速在抗原旁边滴加同量的被检血清一滴（0.025mL～0.05mL）。4.3用牙签使血清与抗原混合均匀，涂布成直径为1cm~2cm的片状，不断摇动玻璃板，2min内观察结果。
4.4试验应在20℃～25C条件下进行。4.5每批试验应设阳性血清与阴性血清对照。5结果判定
在2min内出现50%（+十）以上凝集者为阳性，2min内不凝集（一）者为阴性，介于上述两者之间为可凝，凝集判读标准见表1。
国家质量技术监督局1999-11~10批准2000-04-01实施
GB/T17999.3—1999
表1血清平板凝集试验判读标准
平板所见
出现大的凝集块，底质清亮，即100%凝集出现明显凝集块，底质稍有混浊，即75%凝集出现可见的凝集颗粒，底质混浊，即50%凝集底质极混浊，出现轻微可见的微细颗粒，即25%凝集
底质均匀一致极混浊，无凝集现象，即不凝集结