NY/T 936-2005饲料中二甲硝咪唑的测定高效液相色谱法

ICS65.120
中华人民共和国农业行业标准
NY/T936—2005
饲料中二甲硝咪唑的测定
高效液相色谱法
Determination of dimatridazole in feedsHigh-performance liquid chromatography2005-09-21发布
2005-12-01实施
中华人民共和国农业部
本标准由中华人民共和国农业部提出。前
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。NY/T936—2005
本标准主要起草单位：农业部饲料质量监督检验测试中心（沈阳）农业部饲料质量监督检验测试中心(济南）。
本标准起草人：田额、曹东、董永亮、张建勋、李俊玲、周太嫣、李永才。I
1范围
饲料中三甲硝咪唑的测定
高效液相色谱法
本标准规定了高效液相色谱法测定饲料中二甲硝咪唑含量的方法。NY/T936—2005
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中二甲硝咪唑含量的测定。本标准检测限为5mg/kg
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682—1992分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1-1993饲料采样方法3原理
用四氯化碳+二甲基甲酰胺（8+2）混合溶液从饲样中提取二甲硝咪唑，经分离提纯，以甲醇+水（3+7)为流动相，C18柱为固定相，紫外检测器309.0nm处测定，根据其响应值计算含量。4试剂和溶液
除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂。水，GB/T6682，二级4.1甲：色谱纯。
4.2四氯化碳+二甲基甲酰胺（8+2)。4.3二甲硝咪唑标准溶液
4.3.1二甲硝咪唑标准贮备液：称取二甲硝咪唑标准品（纯度298%）0.0200g，置于200mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容。
4.3.2二甲硝咪唑标准工作液：分别吸取一定量的标准览备液（4.3.1），置于10mL容量瓶中，用甲醇稀释、定容，配制成浓度为2.0μg/mL，5.0μg/mL，10.0gg/mL，15.0g/mL，20.0gg/mL的标准工作液。
5仪器和设备
5.1实验室常用仪器设备。
5.2恒温水浴锅。
5.3离心分离机。
5.4高效液相色谱仪(带紫外检测器）。5.5玻璃具塞三角瓶：250mL。
5.6微孔滤膜：0.45μmg
NY/T936—2005
6试样的制备
按GB/T14699.11993饲料采样方法采样，选取有代表性的饲料样品，至少500g，四分法缩减至200g，粉碎，使全部通过1mm孔筛，混匀，贮于磨口瓶中备用。分析步骤
7.1提取
称取配合饲料10g或浓缩饲料5g，预混合饲料2g），准确至0.001g，于250mL具塞三角瓶中，加人提取剂（4.2）50.0mL，于60℃土2℃水浴不时振荡提取30min，静止，冷至室温。过滤，取续滤液10.0mL，于75mL具塞离心管中，向离心管中加水萃取两次，每次10.0mLa加人水后，加盖密封，充分振摇3min，静止1min，放气。离心5min（3000r/min），用吸管小心移取上清液于20mL容量瓶中，合并两次上清液，用水定容至刻度，摇，过0，45m微孔滤膜，待测。7.2HPLC工作条件
色谱柱：Cis柱，粒径10gm；柱长250mm，内径4mm或类似分析柱。流动相：甲醇+水（3+7）
波长：309.0nm
流速：1.0mL/min
柱温：室温。
7.3试样的测定
按仪器说明书操作，取适量样品制备液和相应浓度的标准工作液，作多点校准，以色谱峰面积积分值定量。
8测定结果的计算与表述
试样中二甲硝咪唑的含量接式（1）计算：X=mlxD
式中：
每千克试样中二甲硝咪唑的质量，单位为毫克（mg)；试样色谱峰面积对应的二甲硝咪唑的质量，单位为微克（g）：m——试样质量，单位为克（g）；D试样稀释倍数。
每个试样取两份试料进行平行测定，以其算术平均值为测定结果，结果保留至小数点后一位。9允许误差
同一分析者对同一试样同时两次平行测定结果的相对偏差不大于10%。2