ICS 65.080 CCS B10 DB12
天津市地方标准
DB12/T 1271—2023
有机肥中活性大肠杆菌快速测定 PMA-qPCR法
Rapid detection of live Escherichia coli in organic fertilizer by PMA-qPCR method（点击此处添加与国际标准一致性程度的标识）
2023-11-07发布
天津市市场监督管理委员会发布
2023-12-08实施

前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由天津市农业农村委员会提出并归口。本文件起草单位：天津市农业科学院畜牧兽医研究所、农业农村部环境保护科研监测所。本文件主要起草人：张蕾、田雪力、池晶晶、路超、杨春蕾、韩静、王丽丽、白朋勋。

1 范围
本文件规定了有机肥中活性大肠杆菌PMA-qPCR测定方法的试剂与引物、主要仪器设备、样品采集、检测步骤和检测结果等技术内容。本文件适用于有机肥中活性大肠杆菌的检测。

2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件仅该日期对应版本适用；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 19438.1 禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法
GB 19489 实验室生物安全通用要求
NY/T 525 有机肥料

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 活性大肠杆菌 live Escherichia coli
在一定条件下可以引起人和多种动物发生胃肠道感染或尿道等多种局部组织器官感染的致病菌。
3.2 暗反应 dark reaction
二氧化碳在植物细胞内，经一系列酶促反应，被还原成为葡萄糖的过程。
3.3 光反应 light reaction
（略）

4 缩略语
下列缩略语适用于本文件：
PMA：叠氮溴化丙锭（Propidium Monoazide）
PCR：聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）
qPCR：实时荧光定量PCR（Quantitative Real-Time PCR）
SYBR Green I：核酸染料（SYBR Green nucleic acid gel stain）
ROX：参比染料（ROX reference dye）

5 原理
（略）