YC/T 249-2008
基本信息
标准号： YC/T 249-2008
中文名称：烟草及烟草制品蛋白质的测定连续流动法
标准类别：烟草行业标准(YC)
标准状态：现行
发布日期：2008-04-14
实施日期：2008-04-14
出版语种：简体中文
下载格式：.rar.pdf
下载大小：1888116
标准分类号
标准ICS号：农业>>65.160烟草、烟草制品和烟草工业设备
中标分类号：食品>>制烟>>X87烟草制品
关联标准
出版信息
出版社：中国标准出版社
页数：8页
标准价格：10.0 元
出版日期：2008-04-14
相关单位信息
起草人：瞿先中、舒俊生、汪开保、程涛、蒋士盛、田振峰
起草单位：安徽中烟工业公司
归口单位：全国烟草标准化技术委员会(TC 144)
提出单位：国家烟草专卖局
发布部门：国家烟草专卖局
标准简介
本标准规定了烟草及烟草制品中蛋白质的连续流动测定方法。本标准适用于烟草及烟草制品中蛋白质的测定。 YC/T 249-2008 烟草及烟草制品蛋白质的测定连续流动法 YC/T249-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net
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标准内容
ICS_65.160
备案号：23588—2008
中华人民共和国烟草行业标准
YC/T249--2008
烟草及烟草制品
蛋白质的测定
连续流动法
Tobacco and tobacco products-Determination of protein-Continuousflowmethod
2008-04-14发布
数码防伪
国家烟草专卖局
2008-04-14实施
本标准由国家烟草专卖局提出。前言
本标准由全国烟草标准化技术委员会（TC144)归口。本标准起草单位：安徽中烟工业公司。本标准主要起草人：瞿先中、舒俊生、汪开保、程涛、蒋士盛、田振峰。YC/T249-2008
1范围
烟草及烟草制品蛋自质的测定
连续流动法
本标准规定了烟草及烟草制品中蛋白质的连续流动测定方法。本标准适用于烟草及烟草制品中蛋白质的测定。2规范性引用文件
YC/T249-2008
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T5606.1卷烟第1部分：抽样
GB/T19616烟草成批原料取样的—般原则（GB/T19616--2004，ISO4874：2000，MOD）YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法YC/T161烟草及烟草制品总氮的测定连续流动法3原理
用乙酸溶液沉淀样品中的蛋白质氮。样品经消化后，在碱性条件下（pH为12.8～13.1），与试剂溶液在线反应生成靛蓝化合物，在660nm对该靛蓝化合物进行比色测定。4试剂及材料
4.1使用分析纯试剂，水应为蒸馏水或同等纯度的水。4.2乙酸溶液，0.5%（体积分数）。4.3Brij35溶液（聚乙氧基月桂醚）将250gBrij35加人到1000mL水中，加热搅拌直至溶解。4.4浓硫酸。
4.5氧化汞（HgO)，红色。
4.6硫酸钾（K,SO,)。
4.7次氯酸钠溶液：移取6mL次氟酸钠（有效氯含量应不低于5%)于100mL的容量瓶中，用水定容至刻度，加人2滴Brij35溶液（4.3）。4.8氯化钠/硫酸溶液：称取10.0g氯化钠于烧杯中，用水溶解，加入7.5mL浓硫酸（4.4)，转移至1000mL的容量瓶中，用水定容至刻度，加人1mLBrij35溶液（4.3）。4.9水杨酸钠/亚硝基铁氰化钠溶液：称取75.0g水杨酸钠（NazC,HsO）、0.15g亚硝基铁氟化钠[NazFe(CN)，NO·2H,O]于烧杯中，用水溶解，转移至500mL容量瓶中，用水定容至刻度，加人0.5mLBrij35溶液（4.3）。
4.10缓冲溶液：称取25.0g酒石酸钾钠（NaKC,H,O·4H,O)、17.9g磷酸氢二钠（NazHPO,·12H,O)、27.0g氢氧化钠（NaOH)，用水溶解，转移至500mL容量瓶中，用水定容至刻度，加入0.5mLBrij35溶液(4.3)。
4.11进样器清洗液：移取40mL浓硫酸（4.4)于1000mL容量瓶中，缓慢加水定容至刻度。1
YC/T249—2008
4.12标准溶液
4.12.1标准储备液：称取0.943g硫酸铵于烧杯中，精确至0.0001g，用水溶解，转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度。此溶液氮含量为2mg/mL。4.12.2工作标准溶液：分别移取不同量的标准储备液（4.12.1)，按照与样品消化同样的量加人氧化汞（4.5）、硫酸钾（4.6)、浓硫酸（4.4)，并与样品一同消化。根据预计检测到的溶液的总氮含量，制备至少5个工作标准溶液。
5仪器设备
真空抽滤装置，直径90mm布氏漏斗。5.2定量滤纸，无氮。
5.3分析天平，精确至0.1mg。此内容来自标准下载网
连续流动分析仪，由下述各部分组成，管路图见图1。5.4
消化器，建议消化管容量为75mL；取样器；
一比例泵；
渗析器；
一加热槽；
-螺旋管；
一比色计，配660nm滤光片；
一记录仪或其他合适的数据处理装置。橙/白（a.23mL/min），样品
橙/黄（a.15mL/min），样品
6分析步骤
6.1抽样
660nm滤光片
1.0mm×10mm流动池
黑/黑（0.32mL/min），空气
蓝/费（1.40mLmin），盐/硫酸溶液黑/黑（0.32mL/min），空气
红/红（0.80mL/min），盐/硫酸溶液橙/极（0.42mL/min），缓冲溶液愚/黑（a.32mL/min），水杨酸钠/亚硝基铁氰化钠橙/黄（0.16mL/min），次氨酸钠蓝/黄（a.40mL/min），硫酸溶液废液
图1蛋白质测定管路图
按GB/T5606.1或GB/T19616抽取实验室样品。2
6.2按YC/T31制备样品，并测定水分含量。YC/T249-2008
6.3称取约0.5g样品于100mL锥形瓶中，精确至0.0001g。加人25mL乙酸溶液（4.2），缓慢加热，保持沸腾15min，迅速用定量滤纸（5.2)在真空抽滤装置（5.1)内进行抽滤，并用乙酸溶液（4.2)冲洗锥形瓶和沉淀物至滤液无色，然后转移滤纸和沉淀于消化管中。6.4向消化管中加入0.1g氧化汞(4.5)、1.0g硫酸钾（4.6)和5mL浓硫酸(4.4)。6.5将消化管置于消化器上消化。建议采用以下消化器工作参数：在150℃保持1h，升温至370℃保持4h。消化后稍冷却，加人少量水，冷却至室温，用水定容至刻度，摇匀。6.6按照YC/T161上机运行消化后的工作标准溶液和样品溶液（6.5）。如样品溶液浓度超出工作标准溶液的浓度范围，则应重新配置工作标准溶液，并重新测定。7结果的计算与表述
7.1蛋白质含量的计算
以干基计的蛋白质含量以质量分数w计，数值以%表示，按式(1)计算：式中：
m×(i-u,)×100
c样品中总氮的质量，单位为毫克(mg)；m-
样品的质量，单位为毫克(mg)；w——样品水分的质量分数，%；6.25——蛋白质与总氮之间的转换系数。7.2结果的表述
（1）
以两次平行测定结果的平均值作为测定结果，结果精确至0.01%。两次平行测定结果绝对值之差不应大于0.20%。
重复性、回收率和检出限
本标准所规定方法的重复性、回收率和检出限结果见表1。表1烟草中蛋白质测定的重复性、回收率和检出限样品中蛋白质
质量/mg
加人量/回收率/加入量/回收率/加人量/回收率/加人量/回收率/mg
重复性/%
检出限/
(mg/g)
YC/T249-2008
中华人民共和国烟草
行业标准
烟草及烟草制品
蛋白质的测定
连续流动法
YC/T249—2008
中国标准出版社出版发行
北京复兴门外三里河北街16号
邮政编码：100045
网址www.spc.net.cn
电话：6852394668517548
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销
开本880×12301/16
2008年5月第一版
印张0.5字数7千字
2008年5月第一次印刷
书号：155066·2-18747
定价10.00元
如有印装差错
由本社发行中心调换
版权专有
侵权必究
举报电话：(010)68533533
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备案号：23588—2008
中华人民共和国烟草行业标准
YC/T249--2008
烟草及烟草制品
蛋白质的测定
连续流动法
Tobacco and tobacco products-Determination of protein-Continuousflowmethod
2008-04-14发布
数码防伪
国家烟草专卖局
2008-04-14实施
本标准由国家烟草专卖局提出。前言
本标准由全国烟草标准化技术委员会（TC144)归口。本标准起草单位：安徽中烟工业公司。本标准主要起草人：瞿先中、舒俊生、汪开保、程涛、蒋士盛、田振峰。YC/T249-2008
1范围
烟草及烟草制品蛋自质的测定
连续流动法
本标准规定了烟草及烟草制品中蛋白质的连续流动测定方法。本标准适用于烟草及烟草制品中蛋白质的测定。2规范性引用文件
YC/T249-2008
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T5606.1卷烟第1部分：抽样
GB/T19616烟草成批原料取样的—般原则（GB/T19616--2004，ISO4874：2000，MOD）YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法YC/T161烟草及烟草制品总氮的测定连续流动法3原理
用乙酸溶液沉淀样品中的蛋白质氮。样品经消化后，在碱性条件下（pH为12.8～13.1），与试剂溶液在线反应生成靛蓝化合物，在660nm对该靛蓝化合物进行比色测定。4试剂及材料
4.1使用分析纯试剂，水应为蒸馏水或同等纯度的水。4.2乙酸溶液，0.5%（体积分数）。4.3Brij35溶液（聚乙氧基月桂醚）将250gBrij35加人到1000mL水中，加热搅拌直至溶解。4.4浓硫酸。
4.5氧化汞（HgO)，红色。
4.6硫酸钾（K,SO,)。
4.7次氯酸钠溶液：移取6mL次氟酸钠（有效氯含量应不低于5%)于100mL的容量瓶中，用水定容至刻度，加人2滴Brij35溶液（4.3）。4.8氯化钠/硫酸溶液：称取10.0g氯化钠于烧杯中，用水溶解，加入7.5mL浓硫酸（4.4)，转移至1000mL的容量瓶中，用水定容至刻度，加人1mLBrij35溶液（4.3）。4.9水杨酸钠/亚硝基铁氰化钠溶液：称取75.0g水杨酸钠（NazC,HsO）、0.15g亚硝基铁氟化钠[NazFe(CN)，NO·2H,O]于烧杯中，用水溶解，转移至500mL容量瓶中，用水定容至刻度，加人0.5mLBrij35溶液（4.3）。
4.10缓冲溶液：称取25.0g酒石酸钾钠（NaKC,H,O·4H,O)、17.9g磷酸氢二钠（NazHPO,·12H,O)、27.0g氢氧化钠（NaOH)，用水溶解，转移至500mL容量瓶中，用水定容至刻度，加入0.5mLBrij35溶液(4.3)。
4.11进样器清洗液：移取40mL浓硫酸（4.4)于1000mL容量瓶中，缓慢加水定容至刻度。1
YC/T249—2008
4.12标准溶液
4.12.1标准储备液：称取0.943g硫酸铵于烧杯中，精确至0.0001g，用水溶解，转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度。此溶液氮含量为2mg/mL。4.12.2工作标准溶液：分别移取不同量的标准储备液（4.12.1)，按照与样品消化同样的量加人氧化汞（4.5）、硫酸钾（4.6)、浓硫酸（4.4)，并与样品一同消化。根据预计检测到的溶液的总氮含量，制备至少5个工作标准溶液。
5仪器设备
真空抽滤装置，直径90mm布氏漏斗。5.2定量滤纸，无氮。
5.3分析天平，精确至0.1mg。此内容来自标准下载网
连续流动分析仪，由下述各部分组成，管路图见图1。5.4
消化器，建议消化管容量为75mL；取样器；
一比例泵；
渗析器；
一加热槽；
-螺旋管；
一比色计，配660nm滤光片；
一记录仪或其他合适的数据处理装置。橙/白（a.23mL/min），样品
橙/黄（a.15mL/min），样品
6分析步骤
6.1抽样
660nm滤光片
1.0mm×10mm流动池
黑/黑（0.32mL/min），空气
蓝/费（1.40mLmin），盐/硫酸溶液黑/黑（0.32mL/min），空气
红/红（0.80mL/min），盐/硫酸溶液橙/极（0.42mL/min），缓冲溶液愚/黑（a.32mL/min），水杨酸钠/亚硝基铁氰化钠橙/黄（0.16mL/min），次氨酸钠蓝/黄（a.40mL/min），硫酸溶液废液
图1蛋白质测定管路图
按GB/T5606.1或GB/T19616抽取实验室样品。2
6.2按YC/T31制备样品，并测定水分含量。YC/T249-2008
6.3称取约0.5g样品于100mL锥形瓶中，精确至0.0001g。加人25mL乙酸溶液（4.2），缓慢加热，保持沸腾15min，迅速用定量滤纸（5.2)在真空抽滤装置（5.1)内进行抽滤，并用乙酸溶液（4.2)冲洗锥形瓶和沉淀物至滤液无色，然后转移滤纸和沉淀于消化管中。6.4向消化管中加入0.1g氧化汞(4.5)、1.0g硫酸钾（4.6)和5mL浓硫酸(4.4)。6.5将消化管置于消化器上消化。建议采用以下消化器工作参数：在150℃保持1h，升温至370℃保持4h。消化后稍冷却，加人少量水，冷却至室温，用水定容至刻度，摇匀。6.6按照YC/T161上机运行消化后的工作标准溶液和样品溶液（6.5）。如样品溶液浓度超出工作标准溶液的浓度范围，则应重新配置工作标准溶液，并重新测定。7结果的计算与表述
7.1蛋白质含量的计算
以干基计的蛋白质含量以质量分数w计，数值以%表示，按式(1)计算：式中：
m×(i-u,)×100
c样品中总氮的质量，单位为毫克(mg)；m-
样品的质量，单位为毫克(mg)；w——样品水分的质量分数，%；6.25——蛋白质与总氮之间的转换系数。7.2结果的表述
（1）
以两次平行测定结果的平均值作为测定结果，结果精确至0.01%。两次平行测定结果绝对值之差不应大于0.20%。
重复性、回收率和检出限
本标准所规定方法的重复性、回收率和检出限结果见表1。表1烟草中蛋白质测定的重复性、回收率和检出限样品中蛋白质
质量/mg
加人量/回收率/加入量/回收率/加人量/回收率/加人量/回收率/mg
重复性/%
检出限/
(mg/g)
YC/T249-2008
中华人民共和国烟草
行业标准
烟草及烟草制品
蛋白质的测定
连续流动法
YC/T249—2008
中国标准出版社出版发行
北京复兴门外三里河北街16号
邮政编码：100045
网址www.spc.net.cn
电话：6852394668517548
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销
开本880×12301/16
2008年5月第一版
印张0.5字数7千字
2008年5月第一次印刷
书号：155066·2-18747
定价10.00元
如有印装差错
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